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VIRUS DE INMUNODEFICIENCIA HUMANA. Tipos: VIH-1 y VIH-2 Virus esférico envuelto (90–130 nm) Genoma:2 hebras simples de ARN + (9,8 kb) Proteínas de Superficie.

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1 VIRUS DE INMUNODEFICIENCIA HUMANA

2 Tipos: VIH-1 y VIH-2 Virus esférico envuelto (90–130 nm) Genoma:2 hebras simples de ARN + (9,8 kb) Proteínas de Superficie gp120-gp41 // gp105-gp36 Polimerasas unidas al ARN p65/51; p31 // p68 – p34 Proteinas del Core p17 -p24 // p16 - p26 Familia Retroviridae Subfamilia Orthoretrovirinae Género Lentivirus

3 Los viriones contienen 2% de ácido nucleico.(2 ARN (+) y 1 ARNt (trp, pro,lys) Genoma : 2 moléculas de ARN de sentido positivo que poseen cap en el extremo 5 y una cadena polyA en su extremo 3. Su tamaño varía entre 8 a 11 kb. R: repetidos directos ( nt) U5: región no codificante. Comienza retrotranscripción PBS: sitio de union del primer para la retrotranscripción Leader: aprox nt. Está en el extremo 5 de todos los ARNm VIH-2 VIH-1 PPT: zona de polipurinas. (aprox 10 nt). Lugar de iniciación de la síntesis de la hebra + durante la retrotranscripción U3: Contiene los elementos promotores de la transcripción del provirus gag: codifica proteinas del Core y la PR pol: codifica enzimas (RT, IN) env: codifica glicoproteinas de superficie

4 Organización genómica del HIV-1

5 Ciclo replicativo del HIV

6 TIPOGRUPOSUBTIPORECOMBINANTES M (mayor) A,B,C,D,E,F B/F, A/G, A/E, A/C, G,H,I,J,K,L A/G/J HIV-1O (outlier) N (no M, no O) HIV-2A,B,C,D,E,F DIVERSIDAD GENETICA DEL VIH

7 Alta tasa de variabilidad Alta tasa de error en la lectura de la Retrotranscriptasa: 1 nucleótido/ciclo replicativo Alta tasa de replicación viral: 4,4 x particulas virales por dia. Recombinacion retroviral: Formas Recombinantes Circulantes (CRFs), Formas Recombinantes Unicas (URFs) VIRUS RECOMBINANTE VIRUS HETEROCIGOTO

8 ESTRUCTURA GENÓMICA DE LAS FORMAS RECOMBINANTES A B C D E F G H J K Sin Clasificar Sin Secuenciar CRFs URFs

9 Distribución geográfica del VIH (Tipos,Subtipos y CRFs ) CRF12-BF,C,D B/F,B/D A,C,D,F B,D B,A,C,D,G A,D,E,O A B,F, C A A,B B A B A, B, C,D A,B A VIH-1 VIH-2 ?

10 HISTORIA NATURAL DE LA INFECCION POR VIH Seroconversión Infección asintomática SIDA 4-8 semanas aprox. 10 años 2-3 años

11 PCR DNA proviral (cualitativa) RNA viral (cualitativa) Carga Viral (nºde copias ARNv /ml) (cuantitativa) CICLO DEL VIRUS DE INMUNODEFICIENCIA HUMANA Células blanco: Linfocitos T CD4,Monocitos,Macrofagos, Células deLangherans, Células dendríticas ARN viral HIV

12 DIAGNOSTICO DE LABORATORIO Estudio de respuesta inmune humoral: IgM, IgA, IgG Test de Tamizaje : Enzimo inmuno análisis (EIA) Test rápidos Aglutinación de partículas Test Confirmatorios Western Blot (WB) Ensayo en Línea (LIA) Detección directa de presencia viral Estudio de Proteinas virales (Ag p24) Estudio de Acidos nucleicos : ADN proviral ARN viral

13 Estudio de respuesta inmune humoral: IgM, IgA, IgG Los test serológicos se basan en la interacción Antígeno – Anticuerpo. Test de Tamizaje altamente sensiblesSon altamente sensibles para poder detectar los Ac en la muestra. Detectan anticuerpos para HIV-1 y HIV-2 (sin lograr discriminar) Detectan anticuerpos contra grupo M y O Antígenos: Lisado total de virus, Proteinas recombinantes, Peptidos sintéticos Test Confirmatorios altamente específicosSon altamente específicos para confirmar con certeza la presencia de Ac. Específicos contra HIV. Pueden discriminar infección por HIV-1 o por HIV-2

14 HIV-2 env HIV-1 env HIV-1 pol E Soporte Solido HIV-2 env HIV-1 env HIV- 1gag HIV-O HIV-2 env HIV-1 env HIV-1 pol E E HIV-2 E Sustrato Proteinas recombinantes Peptidos sinteticos Ac paciente Ag viral Ac conjugado HIV-2 env HIV-1 env HIV-1gag HIV-O E EIA 4ª GENERACION Muy buena especificidad Detecta bajos títulos de Anticuerpos (seroconversión) Buena sensibilidad para Ac. anti HIV-2 y Ac. anti grupo M y O de HIV-1, Detecta IgG e IgM Detecta Ag virales HIV-1 (grupo M y O) HIV-2

15 TEST RAPIDOS

16 TEST CONFIRMATORIOS Western Blot LIA Criterios: WB Positivo: p24,gp41,gp120/160 (p24 con al menos otra) WB Negativo: Ausencia total de Bandas WB mejorado ID muestra /- gp120 gp 41 p31 p24 P17 gp105 gp36

17 Algoritmo para el diagnóstico serológico de la infección por VIH Técnicas de Tamizaje No Reactivo informar Reactivo Laboratorio Periférico Banco de Sangre Laboratorio de Referencia 2 Técnicas de Tamizaje Distinta Configuración antigénica No Reactivo (-/-) informar Reactivo (+/+) Discordante (+/-) WESTERN BLOT Positivo *IndeterminadoNegativo INFORMAR Repetir serología en 30 días

18 Diagnostico Molecular de la Infección por HIV Detección cualitativa de Acido Nucleico (ADN proviral o ARN viral) Diagnóstico en niños nacidos de madres seropositivas Serología indeterminada Hipoglobulinemia Detección cuantitativa de Acido Nucleico (ARN viral) Carga Viral ( nº copias de ARN v/ml) en pacientes infectados Inicio de tratamiento Evaluación de tratamiento Cambios de tratamiento Estudio resistencia a drogas antiretrovirales

19 infectado serorrevertido IgA en sangre: indicador de una respuesta inmunológica específica a la infección viral en el niño.

20 Seguimiento en el laboratorio del niño nacido de madre VIH + nacido de madre VIH + PCR, Elisa, Western Blot PCR -PCR+- PCRPCR Carga ViralCarga Viral Población LinfocitariaPoblación Linfocitaria PCR PCR - PCR + PCR PCR Carga Viral Población Linfocitaria Infección poco probable PCR + PCR - PCR 48 hs – 2 semanas de vida 1 – 2 meses de vida >5 meses de vida PCR + PCR - nueva PCR PCR + PCR - PCR Carga Viral Población Linfocitaria PCR + PCR - nueva PCR infectado PCR -

21 Diagnostico de no infección: 3 PCR –Diagnostico de no infección: 3 PCR – 2 muestras negativas en dos momentos distintos en niños >1 mes de vida, más 1 muestra negativa en > 4 meses de vida Diagnostico de infección: 3 PCR +Diagnostico de infección: 3 PCR + 3 muestras positivas en dos momentos distintos y al menos una de ellas en niños > 4 meses Diagnostico de serorreversión:Diagnostico de serorreversión: 2 o más muestras con ELISA y Western Blot negativos entre los 6 y 18 meses de edad y dosificación de inmunoglobulinas normales En todos los casos seguir con ELISA hasta 18 meses de edad Seguimiento en el laboratorio del niño nacido de madre VIH + nacido de madre VIH +

22 Diagnostico de la Infección por VIH Niños mayores de 18 meses: ELISA - Western Blot Niños menores de 18 meses: Determinación Cualitativa ADN proviral ARN viral Seguimiento de Niños infectados Carga Viral : nº de copias de ARN v/ ml Inicio de tratamiento Evaluación de tratamiento Cambios de tratamiento Estudio de Resistencia a drogas antirretrovirales El LABORATORIO de VIROLOGÍA EN LA INFECCIÓN POR VIH EN PEDIATRIA EN LA INFECCIÓN POR VIH EN PEDIATRIA

23 ADULTOS Y NIÑOS QUE VIVIAN CON EL VIH A FINES DEL 2006

24 Epidemia de SIDA en Uruguay casos acumulados de VIH + ( /2006) casos acumulados de SIDA ( /2006) casos acumulados VIH/SIDA ( /2006) 1983 inicio de la epidemia del VIH/SIDA

25 MECANISMO DE TRANSMISIÓN SIDA EN URUGUAY

26 RELACION H/M EN SIDA ANUAL URUGUAY.- Años

27 VIH Y SIDA POR GRUPOS ETARIOS URUGUAY.- Años

28 Estado de Situación Tendencia creciente del VIH /SIDA Prevalencia de 0,23% en el 2000 a 0,45% 2004 Pico máxima incidencia en población joven, con aumento progresivo de las mujeres. JUVENILIZACIÓN Y FEMINIZACIÓN DE LA EPIDEMIA La situación de vulnerabilidad de mujeres y adolescentes / jóvenes, y de las poblaciones con prevalencia mayor a 5%:usuarios de drogas, hombres que tienen sexo con hombres (HSH), personas privadas de libertad,

29 Silencio Uno de los riesgos de ésta epidemia es el Silencio Rompamos el silencio y derribemos los obstáculos que impiden una prevención y atención del VIH/SIDA eficaces.


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