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GAMETOGENESIS HUMANA FEMENINA Presenta: Dr. Pedro A. Ponce B. Profesor titular: Dr. Héctor S. Godoy M. Profesor adjunto: Biol. Luciano Cedillo CURSO DE.

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1 GAMETOGENESIS HUMANA FEMENINA Presenta: Dr. Pedro A. Ponce B. Profesor titular: Dr. Héctor S. Godoy M. Profesor adjunto: Biol. Luciano Cedillo CURSO DE SUBESPECIALIDAD EN BIOLOGIA DE LA REPRODUCCION HOSPITAL ANGELES DEL PEDREGAL (Marzo Febrero 2013)

2 Objetivos Aspectos generales del aparato reproductor femenino El ovario Fases: mitótica y meiótica Crecimiento ovocitario y folicular Maduración Regulación de la ovogénesis Ovulación Eficencia de la ovogénesis – atresia Ultraestructura: ovocito y complejo cumulús-ovocito.

3 Aparato reproductor femenino

4 Embriología Identificación de células germinales: 3 wks Endodermo Señales: - TGF β - BMP-2,BMP -4

5 Marcadores Células germinales (fosfoproteínas): - SMAD1 - SMAD 2 - SMAD 4 Fragilis/Iftm3 Blimp1/Prdm1 Dppa3 Pou5f1 (Oct4)= factor transcripcional.

6 Migración Saco de Yolk a intestino : 4 semanas Intestino a cresta genital: 6 semanas.

7 Migración y proliferación C-kit receptor tyrosine kinasa Ligando (kit-ligand) Integrin B1(surface) Genes: - TIAR1 - LIF (leukemia factor inhibitor)

8 Morfología

9 A las crestas gonadales Oogonia Inducción del desarrollo Síndrome de Turner

10 Ovario Corte sagitalSuperficie ovárica

11 Número de oogonias Mitosis: 6-7 semanas: 10,000 8 semanas: 600,000 Mitosis, meiosis y atresia: 20 semanas: 6-7 mill. - 2/3 intra- meiosis - 1/3 oogonia 7 meses: apoptosis NO oogonias al nacimiento

12 Apoptosis Mitosis Atresia: - Pico a los 5 meses kit-ligando LIF Fas ligando TGF-B Activina

13 Número de folículos primordiales Al nacimiento: - 700,000 Pubertad: - 300,000 Edad reproductiva: a 500

14

15 Ovario Células de la granulosaCélulas de la teca Mesotelio epitelial superficial del ovario Lamina basal Restricción sanguínea: - Leucocitos - Alto peso molecular - Contacto intercelular Mesenquima del estroma Interticial primaria: - Evidente a las 12 semanas - Desaparece a las 20 semanas - Funcionalmente limitado Céllulas teca-intersticiales: - Producción de andrógenos Intersticial secundario: - Teca interna hipertrofiada de foliculos atrésicos

16 Ovario

17

18 Estroma ováricoInnervación ovárica Células fibroblásticas Sin actividad esteroidogénica Receptores para andrógenos: - densidad Aislante: - Folículo y cuerpo lúteo - Bioquímico Extrínseco: - Símpatico y sensorial - Flujo sanguíneo Intrínseco: - Sistema intraovárico neurotrópico

19 Ovario

20 Mitosis (Llegada a la cresta gonadal)

21 Meiosis I

22

23 Ovocito en MI

24 Meiosis II

25

26 Transición meiosis I - II L H

27 Extrusión del primer cuerpo polar 32 horas despúes de la estimulación 6 a 8 horas antes de la ovulación

28 Meiosis I y II Meiosis I y II

29 Telofase II

30 LH

31

32

33 Crecimiento ovocitario y folicular

34 Iniciación del crecimiento ovárico 5 – 6 semanas hasta menopausia Folículo primordial Células de la granulosa: - Morfología : plano a cuboidal - Proliferación Oocito: - Tamaño - Zona pelúcida

35 Zona pelúcida Matriz extracelular glucoprotéica Grosor : 17 um Volúmen: 1.89x10 6 um 3 Espacio perivitelino

36 Zona pelúcida (1500X)

37 Zona pelúcida (9000X)

38 Zona pelúcida (27700X)

39 Zona pelúcida (75000X)

40 Morfología : Células de la granulosa mRNA Follistatin mRNA

41 Iniciación del crecimiento

42 Del folículo primodial al primario

43 Tamaño del oocito folículo primario al secundario 15 células de la granulosa 600 células de la granulosa: - Folículo: 110 a 120 um - Oocito: 80 um - Vesícula germinal: um Teca interna Teca externa por expansión Migración: - GDF 9 Receptores: - FSH - Estrógenos - Andrógenos - Unión gap (CG-CT)

44

45 Del folículo primario al secundario

46 Factores que inician el crecimiento ovárico

47 Crecimiento ovocitario (Desde el folículo secundario) Diferenciación y crecimiento Célula metabólicamente activa: - mRNAs y proteínas Transporte bidireccional: (uniones gap) - Nutrientes - Factores de crecimiento - Moléculas

48 Crecimiento ovocitario (Desde el folículo secundario) Elaboración de la zona pelúcida Aumento en el número de organelos: - Mitocondrias (500,000) - Pérdida de centriolos - Distribución (vesícula germinal) Competencia meiótica: - Maduración meiótica - Tamaño crítico

49 Mitocondrias y RE liso

50

51 Formación de folículos antrales Antro: - Separación del complejo cúmulo-ovoforo - Vehículo para nutrientes - Remoción de desperdicios metabólicos - Ambiente para maduración y crecimiento Aquoporinas: Expansión = Mittelschmerz - Cyclin D2

52 Adquisión de compentencia meiótica

53 Crecimiento ovocitario (Desde el folículo secundario) Incremento: - Proteínas CDK1 - Cyclin B - CDC25 Gasto de energía: - ATP sustratos de la granulosa - no disyunción y aneuploidia

54 Núcleo vesícula germinal Final del crecimiento Antes de la maduración meiótica Núcleo grande Pálido Inactivo

55 Maduración (durante y después de la ovulación) Ruptura de la membrana nuclear de la vesícula germinal Primera división meiótica y extrusión del primer cuerpo polar La detención de la meiosis: metafase II(MII)

56 Del folículo secundario a folículo de Graff

57 Folículo de Graff Ovocito : - Diámetro: – 130 um - Área: 4.5 x 10 4 um2 - Vólumen: 1.43 x 10 6 umm3

58 Ovulación

59 Ruptura folicular Presión hidrostática(?) Presión coloidósmotica Formación del stigma Proteasas: - Activador plasminógeno - ADAMTS - Catepsina L

60 Maduración NUCLEARCITOPLASMATICA Estimulación por LH Transcripción de genes Meiosis: - Señalización de células foliculares a ovocito - Gap - AMPc Ruptura vesícula germinal Condensación de cromatina Estimulación por LH Movimiento de organelos Desaparición de Golgi: - No sintetiza nuevas proteínas Movimiento de cromatina: - Asimetría del ovocito Pérdida de microvellosidades

61 Ovocito maduro

62 Células del cúmulo – oovóforo (Postovulación)

63 Cúmulo - oovóforo células Uniones lineares y anulares Desde la ovulación hasta 72 hrs de la fertilización Matriz mucoelástica por LH Inducción de la meiosis y maduración citoplásmatica

64 Cúmulo - oovóforo Células autólogas pueden mejorar morfología embrionaria, tazas de implantación y embarazos clínicos in vitro.

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68 Fibronectina y tenascin- C

69 Bibliografía

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