Revisión de artículo Presenta: Dr. Pedro A. Ponce B. Profesor titular: Dr. Héctor Godoy M. Profesor adjunto: Dr. A. Ulloa-Aguirre. CURSO DE SUBESPECIALIDAD.

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1 Revisión de artículo Presenta: Dr. Pedro A. Ponce B. Profesor titular: Dr. Héctor Godoy M. Profesor adjunto: Dr. A. Ulloa-Aguirre. CURSO DE SUBESPECIALIDAD EN BIOLOGIA DE LA REPRODUCCION HOSPITAL ANGELES DEL PEDREGAL (Febrero 2011- Marzo 2013)

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5 α FSH-h + β ( HGC + FSH-h) Elonova ® MSD. Receptor FSH : in vitro 1. Unión 2. Transactivación 3. Farmacocinética- farmacodinamia 4. Bioactividad

6 Unión con el receptor FSH (rata)- in vitro 1. Células CHO ( Chinese hamster ovarian) 2. Fracción del receptor en membrana 3. FSH® marcada con 125-I (yodo) 4. FSH® analogo (competidor) 5. Centrifugado 6. Radiación en la membrana (gama counter)

7 Unión (in-vitro)

8 Activación del receptor FSH (rata)- in vitro 1. Células CHO ( Chinese hamster ovarian) 2. Genes (receptor) y reporter ( luciferase) 3. 1250 células 4. 0.012 a 20 ng coriofolitropina alfa/ml 5. 0.006 a 9.6 ng FSH® /ml 6. Incubación: CO2 - 4min- 37oC 7. Luciferase: Cuentas de luminiscencia

9 Activación (in-vitro)

10 Activación del receptor del TSH (h) y LH (h) – in vitro 1. Células CHO ( Chinese hamster ovarian) 2. Receptor TSH y LH 3. Actividad de la luciferase

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12 Farmacocinética (rata) 1. Coriofolitropina y FSH® : 20μg/kg sc. 2. Dos grupos: 8 3. Muestras sanguíneas: 0, 2, 4, 12, 48 y 96 h 4. Inmunoensayo y fluorinmunoensayo 5. LLOQ: < 92ng/ml.

13 Farmacocinética (perro) 1. Coriofolitropina alfa : 20μg/ml 2. FSH® : 25 μg/ml 3. Dos grupos: 8 4. Muestras sanguíneas: 0, 1, 3, 8,12, 24, 32, 48, 72, 96, 144 y 192 h 5. Inmunoensayo y fluorinmunoesnayo 6. LLOQ (Coriofolitropina alfa):< 0.3 ng/ml 7. LLOQ (FSH®): < 86 ng/ml.

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15 Farmacodinamia (rata): E2, P4 y aumento del peso ovárico: 1. 21 días de vida y 50 g de peso 2. Día 1: 1 dosis de FSH® o Coriofolitropina alfa. 3. Día 2 y 3: 1 dosis hGC (13.3 IU) 4. FSH®: 0, 0.19, 0.36, 0.63, 1.14, 2.04, 3.68, 6.61, 11.86, 21.38, 38.34 y 68.96 μg/kg 5. Coliofolitropina alfa: 0, 0.05, 0.09, 0.16, 0.29, 0.51, 0.92, 1.65, 2.97, 5.34, 9.58 y 17.24 μg/kg 6. 72 horas de la primera inyección = muestras sanguíneas y necropsia 7. Peso ovárico y niveles séricos de E2 y P4.

16 Farmacodinamia (rata) 1. 25 – 26 días de vida 2. 4 inyecciones sc 3. FSH® (0.03, 0.06, 0.13, 0.25 y 50 μg) n=6 en dos días (0, 8, 24 y 32 h) – 2.5, 5, 10, 20 y 40 μg/ml de dosis total. 4. A las 52 horas - hGC (20 UI)- ovulación 5. Control: hGC 6. Gas CO2/O2 18 horas del disparo 7. Disección de oviductos = # de ovocitos

17 Número de ovocitos inducidos (in-vivo)

18 Peso ovárico (in-vivo)

19 Estradiol sérico (in-vivo)

20 Progesterona sérica (in-vivo)

21 Conclusiones Unión y transactivación: Específico y comparable en ambas. Sin la activación del receptor de TSH y LH. Farmacocinética (T1/2): 1. Coriofolitropina alfa: 17.3 h(ratas) y 46.9 h(perro) 2. 1.5 a 2 veces más larga que FSH® Bioactividad( # de ovocitos, peso ovárico, E2 y P4): 1. 2 a 4 veces aumentada que FSH®

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