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UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz.

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1 UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz Soto Cruz Rivera Paula Ameyali Vela Veliz Mayra Irais López Guerra Domingo Lara Sánchez Elías Reyes Karol Leyda

2 Recordar que…. Los hongos crecen en dos formas: Levaduras Células únicas de forma esférica (3-15 µm). producto de gemación. pseudohifas Levaduras Células únicas de forma esférica (3-15 µm). producto de gemación. pseudohifas Mohos Colonias filamentosas multicelulares. Túbulos cilíndricos Micelos Algunos divididos por septos. Mohos Colonias filamentosas multicelulares. Túbulos cilíndricos Micelos Algunos divididos por septos. Brook G, Butel j, Morse S

3 Especímenes clínicos Secreción de heridas BiopsiasOrina Cutánea (pelo, piel, uñas) Exudados mucosas MO Sangre Secreción de VRB

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6 Dx Micológico Toma de muestra Adecuada y abundante Recursos del Lab. Reactivos. Medios de cultivo. Equipos. Personal Con experienci a en toma y manejo

7 Examen Directo KOH Hidróxido de potasio… gr Glicerol ml Agua destilada ml KOH-dimetil sulfoxido Hidróxido de potasio gr Dimetilsulfóxido..40 ml Agua destilada ml Sol. Salina Cloruro de sodio… gr Agua destilada. 100 ml

8 Limitaciones Sitio anatómico Cantidad de muestra # de microorganismos Tipo de paciente Calidad del personal del Lab. Artefactos

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12 Cultivo de la Muestra (envases)

13 Cultivo de la Muestra (Agar) SaburaudMicosel, micobiótico 2% glucosa. pH 6.9 Medios estándar. No ideal para esporulación. Puede contener cloranfenicol o gentamicina. Harina de soja Dextrosa Ciclohexamida y cloranfenicol

14 Papa-DextrosaBHI con/sin Antibiótico Base de pulpa de papa. Glucosa/dextrosa Como estimulante de pigmento: Zanahoria y bilis Hongos filamentosos y levaduras. Sangre de carnero. Antibiótico: Cloranfenicol, Gentamicina, Cicloheximida. Conservar a 2-8 °C en una bolsa Colonias de Penicillium expansum (A) y Botrytis cinerea (B), creciendo en medio Agar Papa Dextrosa.

15 Temperatura °C 37 °C Tiempo Levaduras hr. Hongos filamentosos No patógenos 2-4 días Patógenos 6-15 días

16 Identificación de hongos Color Tasa de crecimiento

17 Algodonosa Aterciopelada Granular o polvorienta glabrosa Textura

18 (colinas y valles) Rugosa Umbonada Verrucosa Aplanada Topografía

19 Examen del Cultivo Cardaje Azul de algodón de lactofenol Fenol, concentrado..20 ml Acido láctico ml Glicerol ml Azul de algodón gr Agua destilada ml Fragmentos hifales Metamina Argentica de Gomori Tiñe de negro la pared celular Ac. Peryodico de Schiff Tiñe de negro la pared celular

20 Cinta Adhesiva Microcultivo

21 Trichophyton rubrum

22 Trichophyton tonsurans

23 Trichophyton mentagrophytes

24 Microsporum canis

25 Epidermophyton floccosum

26 Pitiriasis Versicolor

27 Coccidioides immitis Fase micelial °C Fase tisular 37 °C

28 Aspergillus spp. Morfología colonial

29 Medios de cultivo Agar Saburaud Papa-Dextrosa Extracto de Malta Glucosa 20 g/L Extracto de malta Peptona 1 Agar 15 pH = 5,4 (selectivo) Czapek-Dox Medio para el cultivo de hongos y bacterias capaces de utilizar el nitrato de sodio como única fuente de nitrógeno. Aspergillus terreus on Czapek dox agar showing typical suede-like cinnamon-buff to sand brown colonies while reverse is yellow to deep dirty brown.

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35 Bibliografía Murray P, Rosenthal K, Pfaüer M. (2006). Microbiología Medica. 5 edic. Edit. El sevier. Madrid. España. Pp Brook G, Butel j, Morse S. (2005). microbiología Medica de Jawetz, Mednick y Adelberg. 25 edic. Edit. Manual moderno. Cali. Colombia. P Pumarola A, Rodríguez A, García J, Piedrola G. (nd). Microbiología y parasitología Medica. 2 edic. edit. Salvat. Barcelona. España. P 752. González G. (nd). Métodos básicos en el laboratorio de micología. Identificación de hongos. Consultado el 17 de marzo del disponible en: Magaña M, Magaña M. dermatología. (2003). Editorial panamericana. México DF. Pp. 22 [versión web] Silva D. (nd). Pitiriasis versicolor. Consultado el 17 de marzo del disponible en: SA. (nd). Agares. Consultado el 17 de marzo del disponible en: BD. (2007). Mycosel Agar. Consultado el 17 de marzo del disponible en: Biocen. Agar Czapek-Dox. Consultado el 17 de marzo del disponible en: HWG. ( ). Agar Czapek-Dox. Consultado el 17 de marzo del disponible en:

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