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Examen directo KOH - NaOH 20 – 40X KOH Piel - Uñas Hifas hialinas septadas con o sin ramificación a veces se fragmentan en artroconidios Hifas toruloídeas.

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2 Examen directo KOH - NaOH 20 – 40X KOH

3 Piel - Uñas Hifas hialinas septadas con o sin ramificación a veces se fragmentan en artroconidios Hifas toruloídeas o hifas alteradas

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5 Pelos: 3 tipos de parasitismo Ectotrix: artroconidios en el exterior del pelo. (Microsporum canis) Ectotrix

6 Endótrix artroconidios e hifas en el interior del pelo burbujas de aire en el interior del pelo, hifas y artroconidios en el interior y exterior. Fávico

7 Sabouraud (Sb) glucosado Agar papa (PDA) Lactrimel pigmentos y fructificación DTM (Dermatophyte test medium) rojo de fenol que en presencia de metabolitos alcalinos producidos por los dermatofitos vira el color del medio amarillento a rojo Agar Miel de Sabouraud 4. Cultivo

8 Incubación: 25-28ºC 35-37ºC Tiempo: h\ 15 días con antibióticos (cloranfenicol \ estreptomicina) con y sin cicloheximida Inhibe especies de Scopulariopsis, Fusarium, Endersonula, Trichosporon, Aspergillus 4. Cultivo

9 Observación Detalle Descripción Identificación

10 Morfología macroscópica Colonias alcanzan su madurez y Colonias alcanzan su madurez y estabilidad entre 2-3 semanas. Se debe considerar: Textura (glabra, algodonosa granular, pulverulenta, etc) Textura (glabra, algodonosa granular, pulverulenta, etc) Topografía (rugosa, crateriforme, verrucosa, plegada) Topografía (rugosa, crateriforme, verrucosa, plegada) Color de la superficie y reverso de la colonia Color de la superficie y reverso de la colonia Velocidad de crecimiento Velocidad de crecimiento Difusión de pigmento Difusión de pigmento Identificación

11 MORFOLOGIA MICROSCOPICA Hifas hialinas septadas, ramificadas. Conidios: Macroconidios y microconidios. Permiten la diferenciación en 3 géneros Micro conidios (2-5 micras) Macro conidios (15-90 micras)

12 Macroconidios: paredes gruesas, rugosas, fusiformes de tamaño variable, multiseptados (1-15 septos), Microconidios: - sésiles, pedicilados o clavados, escasos o ausentes (en algunas especies) - generalmente se disponen solitarios a lo largo de la hifa. (abundantes) Género Microsporum

13 M. canis

14 M. gypseum

15 Género Epidermophyton E. floccosum Macroconidios : Macroconidios : ampliamente clavados, extremos redondeados, paredes lisas y delgadas con 1-4 septos (gralmente abundantes) nacen solitarios o en racimos. No produce microconidios

16 E. floccosum

17 Microconidios : - globosos, piriformes, clavados, sésiles, pedicilados, - nacen solitarios a lo largo de la hifa o como racimos de uvas. Macroconidios: Paredes delgadas y lisas, 1-12 septos, nacen solitarios o en racimos. Paredes delgadas y lisas, 1-12 septos, nacen solitarios o en racimos. Forma: variable, elongados (làpiz), clavado, fusiforme, cilindrofusiforme, extremo distal romo. Forma: variable, elongados (làpiz), clavado, fusiforme, cilindrofusiforme, extremo distal romo. (abundantes) Trichophyton

18 Trichophyton rubrum

19 Trichophyton mentagrophytes

20 T. interdigitale

21 Trichophyton mentagrophytes

22 Determinación de caracteristicas fisiológicas o bioquímicas Prueba de la ureasa Agar urea de Christensen: diferencia diferencia T rubrum de T. mentagrophytes Positivo : aparición de color rojo donde se inoculó la cepa incógnita Interpretación : T rubrum : negativo T mentagrophytes : positivo contiene rojo de fenol, cuando se hidroliza la urea, se libera amonio, alcalinizando el medio Incubar a 25° y leer diariamente hasta el 7° día

23 Perforación del pelo in vitro Perforación del pelo in vitro Lectura : Observación microscópica del pelo. Perforaciones en forma de cuña que penetran radialmente el pelo Propósito : Diferenciar T.rubrum de T mentagrophytes detecta la formación de órganos perforadores. Interpretación : T. mentagrophytes : perfora el pelo. T. rubrum : crece y no perfora. Técnica : - Colocar segmentos de pelo humano (pre-púberes ) de mm en una placa de petri. Autoclavar 120°C por 15 min. - Agregar 20 ml de agua destilada esteril y 2-3 gotas de extracto de levadura al 10% esterilizado previamente por filtración. - Inocular las placas con la colonia en estudio. - Incubar las placas a 25°C en oscuridad y examinar semanalmente durante 4 semanas.

24 FIN!!!!!


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