PRÀCTICA 6: PREPARACIÓ DELS CROMOSOMES POLITÈNICS DE DROSOPHILA BUZZATII. MAPES CITOLÒGICS I OBSERVACIÓ D’INVERSIONS PARACÈNTRIQUES.

Presentación del tema: "PRÀCTICA 6: PREPARACIÓ DELS CROMOSOMES POLITÈNICS DE DROSOPHILA BUZZATII. MAPES CITOLÒGICS I OBSERVACIÓ D’INVERSIONS PARACÈNTRIQUES."— Transcripción de la presentación:

1 PRÀCTICA 6: PREPARACIÓ DELS CROMOSOMES POLITÈNICS DE DROSOPHILA BUZZATII. MAPES CITOLÒGICS I OBSERVACIÓ D’INVERSIONS PARACÈNTRIQUES

2 CROMOSOMES POLITÈNICS
Què són? Són cromosomes gegants, constituïts per moltes còpies de DNA paral·leles a la cromàtide inicial. A on es troben? En alguns teixits de larves de dípters (ex. Drosophila): glàndules salivals, epiteli intestinal, tubs de Malpighi, etc. Protozous, insectes, mamífers, plantes…

3 CROMOSOMES POLITÈNICS Només es duplica l’Eucromatina
Perquè apareixen? És una estratègia que utilitza l’organisme per produir gran quantitat d’una substància. Ex. CP en glàndules salivals de Drosophila: estadi ràpid creixement Larva substància queratinosa  fabricar la pupa (glàndules salivals) Mateixos cromosomes  nº gens  més producte Només es duplica l’Eucromatina

4 CROMOSOMES POLITÈNICS
Com es formen? Endoreplicació / Endomitosi D.Buzzatii 10 rondes (gl. Salivals) Nº cromàtides: 2 cromosomes homòlegs 1ª ronda de replicació 2ª ronda de replicació 3ª ronda de replicació 4ª ronda de replicació 4 8 16 32 etc. 1CP 2

5 CROMOCENTRE

6 CROMOSOMES POLITÈNICS
Interfase (poc condensats i en síntesi)  tamany Elevat nivell d’activitat transcripcional Bandes i interbandes

7 CROMOSOMES POLITÈNICS
TELÒMER CENTRÒMER Extrems - Bandes/ Interbandes - Engruiximents/ Constriccions

8 CROMOSOMES POLITÈNICS
Perquè pot ser útil el seu estudi? Localització de gens Detectar activitat transcripcional Polimorfismes cromosòmics L’alteració estructural més freqüent a Drosophila és la inversió d’un fragment cromosòmic. A B C D E F C A B E D C F G

9 OBJECTIUS Obtenir preparacions de cromosomes politènics (CP) (sessió 1) Determinar els diferents elements del cariotip i reconèixer les diferents ordenacions presents en poblacions de D.buzzatii (sessió 2)

10 SESSIÓ 1: OBTENCIÓ DE CP Drosophila buzzatii
Cromosomes : 2n = 12 sexual, II, III, IV, V, VI Glàndules salivals de larves de 3r estadi Identificació: - larves més grans - espiracles ataronjats - moviment (no pupant)

11 SESSIÓ 1: OBTENCIÓ DE CP Sol. dissecció

12 SESSIÓ 1: OBTENCIÓ DE CP mandíbules glàndules salivars espiracles
tràquea intestí anus gonada

13 SESSIÓ 1: OBTENCIÓ DE CP orceïna 30 minuts

14 SESSIÓ 1: OBTENCIÓ DE CP + cubre “squash” microscopi 100X

15 SESSIÓ 2: IDENTIFICACIÓ CP de D.buzzatii
TELÒMER CENTRÒMER Banda clara Puff

16 SESSIÓ 2: IDENTIFICACIÓ CP de D.buzzatii
Cromosoma II (St)

17 SESSIÓ 2: IDENTIFICACIÓ CP de D.buzzatii

18 IDENTIFICACIÓ CROMOSOMES
4 3 5 X 5 2 Pag. 55 guió. Figura 3. 6

19 CROMOSOMA 2 j st st/j