Genética Forense

Identificación de personas, filiación, criminalística. ¿Qué es?  Es el uso de ciertas técnicas empleadas en genética para la identificación de los individuos en base al análisis del ADN.  ¿Para qué sirve? Identificación de personas, filiación, criminalística.

VARIABILIDAD DEL GENOMA Polimorfismos Cambios en la secuencia del ADN que ocurre con una frecuencia relativamente elevada, en general en más del 1% de la población. Existen distintos tipos de polimorfismos, y si bien originan una variabilidad genética normal, algunos de ellos pueden afectar la estructura o expresión de una proteína, y por ende, tener una consecuencia biológica. Es allí donde radica la importancia médica del estudio y comprensión de los polimorfismos genéticos.

Polimorfismos de secuencia: Genes HLA Polimorfismos de longitud: Mini y Microsatélites Polimorfismos de nucleótido único (SNPs) Son los más frecuentes y pueden asociarse a determinadas enfermedades o respuestas a fármacos.

Repeticiones en tándem en el genoma humano… CLASE NÚMERO DE BASES REPETIDAS NÚMERO DE COPIAS O REPETICIONES LOCALIZACION ADN satélite 5 a 171 106 Centrómero ADN telomérico 6 104 Telómero ADN minisatélite 6 a 24 102- 103 Telómeros, En todos los cromosomas ADN microsatélite 1 a 4 105 En todos los cromosomas

Minisatélites VNTRs Microsatélites o STRs Región conservada Región repetida

¿Qué técnicas se emplean para estudiar los STRs?

1. DNA FINGERPRINTING

SONDA UNILOCUS SONDA MULTILOCUS

2. PCR Individuo 1 Individuo 2 Individuo 3 Individuo 4 Individuo 5

VARIANTE MULTIPLEX

ELECTROFORESIS CAPILAR

STR 1 STR 2 STR 3 STR 4

¿Se puede obtener un resultado concluyente analizando sólo un STR? NO Cuanto mayor sea el número de marcadores analizados, menos probabilidades existen de encontrarnos con un resultado poco confiable: la probabilidad que dos individuos compartan el mismo patrón de bandas para un solo locus es de 5 en 100; pero aumenta a 1 en 3.3 millones si analizamos 5 locus.

RASTREO DE LA VÍA MATERNA: ADN MITOCONDRIAL 100-1000 mitocondrias/célula 2-3 copias de ADN/mitocondria 16,5 Kb de longitud Herencia materna: no se recombina en meiosis D-loop: secuencias variables que permiten distinguir los linajes matenros

Distribución de los haplogrupos de ADN mitocondrial (ADNmt) NATIVO AMERICANO Haplogrupo: Cambios nucleotídicos diagnósticos que forman sistemas jerárquicos en los linajes del ADNmt y del cromosoma Y. Wallace DC., Annu. Rev. Genet., 2005

¿Qué técnicas se emplean para estudiar el D-loop? - PCR + RFLP con 7 endonucleasas - PCR + Hibridación con sondas - PCR + secuenciación - Real Time PCR con gradientes de temperatura (High resolution melting) - Microarrays

RASTREO DE LA VÍA PATERNA: CROMOSOMA Y 60% constitutido por STRs.

Distribución de los haplogrupos del cromosoma Y NATIVO AMERICANO www.scs.illinois.edu/~mcdonald/worldhaplogroupsmaps.pdf

¿Qué técnicas se emplean para estudiar el cromosoma Y? DNA fingerprinting PCR multiplex Si bien los marcadores de filiación materna y paterna son extremadamente útiles, deben ser -en todos los casos- evaluados conjuntamente con marcadores autosómicos.