CROMATOGRAFÍA DE GEL FILTRACIÓN Columna de vidrio Lana de vidrio Gel Sephadex G-25 1 2 3 1.- K3Fe(CN)4 2.- Hemoglobina 3.- Blue Dextrano MATERIALES
PROCEDIMIENTO: 1 1) Coloque lana de vidrio en el fondo de la columna y apisonela con una varilla de vidrio.
2 2) Vierta la suspensión de gel , agitando esporádicamente con la varilla para resuspender el gel. Verifique que el tapón de la columna está cerrado.
3 líquido lana de vidrio Gel (12 cm de altura) 3) Deje sedimentar el sólido (gel) y luego abra el tapón para descartar el líquido en exceso (el menisco del líquido debe quedar a la altura del gel).
Mezcla de Proteína (roja) 4 Punta de la pipeta Muestra: Mezcla de Proteína (roja) + Sal (amarilla) 4) Aplique gota a gota la muestra con la columna tapada. Acerque la punta de la pipeta al gel para que no se deforme el frente del gel con el agregado de muestra.
5 5) Siga agregando buffer con la columna destapada, para que el frente siga avanzando. Observe la separación de los componentes de la mezcla. Recoja fracciones de 2ml a la salida de la columna.