Microbiología Clase 3 Gram negativos de importancia clínica Bioq. Denise Risnik (drisnik@hotmail.com)

Tinción de Gram

Estructura

Gram negativos

Toxinas bacterianas La capacidad de los microorganismos para producir toxinas es un factor importante en su capacidad para producir enfermedad. Las toxinas producidas por los microorganismos pueden ser excretadas al medio que les rodea (EXOTOXINAS) o formar parte de la célula (ENDOTOXINAS).  Las EXOTOXINAS son sustancias que secretan los microorganismos y causan daño según la estructura del mismo. Las ENDOTOXINAS son parte de la membrana de las bacterias gram negativas exclusivamente. 

Endotoxina Los lipopolisacáridos (LPS) constituyen el antígeno O y la endotoxina de las bacterias Gram negativas. Están localizados en la membrana externa de la envoltura celular bacteriana y juegan un papel muy importante en la patogénesis de las infecciones bacterianas, así como en la interacción con el hospedero y su sistema de defensa. El lípido A es responsable de las propiedades patofisiológicas de las endotoxinas. El polisacárido O, que es la porción mas externa, le confiere a la bacteria su especificidad serológica. El oligosacárido nuclear o core une el polisacárido O al lípido A.

Patógenos bacterianos intestinales Salmonella spp Shigella spp Aeromonas spp Vibrio cholerae Campylobacter spp Yersinia enterocolítica E. coli enteropatógenena E coli enteroagregativa E coli enteroinvasiva E coli enterotoxigénica E coli enterohemorrágica

Patógenos bacterianos urinarios Ambulatórios Hospitalizados E. coli (80%) P. mirabilis (5%) K. pneumoniae (3%) S. saprophyticus (5%) E. faecalis (2%) S. agalactiae E. coli (50%) K. pneumoniae (5%) E. cloacae (5%) C. freundii (5%) P. aeruginosa (10-20%) E. faecalis (10-20%) S. aureus (5-10%) Candida spp (20%)

Enterobacterias Familia Enterobacteriaceas Hábitat: intestino del hombre y animales Bacilos gram negativos anaerobios facultativos No esporulados La mayoría son móviles (Flagelos) Catalasa positivos (con excepciones) Oxidasa negativo (excepto Plesiomonas) Generalmente desarrollan en medios comunes Móviles (excepto Shigella y Klebsiella)

Sitios de infección de enterobacterias

Escherichia coli Bacilos Aislados o de a pares Pueden tener capsula como no En Gral.. Tienen flagelos. Oxidasa negativos Citrato negativos Flora intestinal habitual. Patógeno oportunista Patógeno mas frecuente de infección urinaria Importante en enfermedades intestinales donde dependiendo de la cepa desarrolla distinto cuadro clínico

Cepas diarrogenicas E. coli enteropatogena (ECEP) E. coli enterotoxigenica (ECET) E. coli enteroinvasiva (ECEI) E. coli enterohemorragica (ECEH) E. coli enteroadherente agregativo (ECEA)

ECEP Atrofia de microvellosidades Con infiltrado inflamatorio Fiebre, vómitos y diarrea con mucus pero sin sangre Es el patógeno mas frecuente de gastroenteritis en Argentina principalmente en niños

ECET Mas común en países en vías de desarrollo “Diarrea del viajero” en habitantes de países desarrollados Contaminación fecal de agua y alimentos Puede causar diarrea moderada hasta un cuadro similar al del cólera con una seria deshidratación Elabora enterotoxinas termoestables y/o termolábiles La termolábil es similar a la toxina colérica actúan sobre la célula intestinal induciéndola a la secreción de fluido sin daño visible de la misma. Diarrea acuosa

ECEI Invade y prolifera dentro de la célula intestinal Cuadro de disentería (inflamación del colon con diarrea mucosa y sanguinolenta) similar al de Shigella spp Fiebre mayor a 38 °C, dolor abdominal, deposiciones sanguinolentas con infiltrado.

ECEH Diarrea sanguinolenta sin infiltrado ni fiebre E. coli O157 H7 Colitis hemorrágica y síndrome urémico hemolítico (SUH), complicaciones extraintestinales SUH: falla renal, anemia hemolítica y trombocitopenia Produce exotoxinas vero / shigalike (termolábil) La Argentina tiene una de las mayores incidencias de SUH en el mundo Reservorio en intestino animal. Transmisión por alimentos Agar McConkey sorbitol (colonias incoloras)

Mecanismos

Shigella spp Bacilos no fermentadores de lactosa Inmóviles No esporulado Anaerobio facultativo Invade la célula del colon y la lleva a la muerte Diarrea con sangre, infiltrado y mucus. Inhibición de absorción de agua Vía fecal-oral, alimentos (crudos) o agua. Disentirá Producción de exotoxina Shiga (S. dysenteriae) Letargo, confusión, cefalea y convulsiones Medios: SS, XLD, McConkey, EMB y deoxicolato

Salmonella spp BGN Móviles Anaerobios facultativos No esporulados Causan infecciones sistémicas (fiebre entérica) o localizada (gastroenteritis o enterocolitis) Contaminación fecal de agua y alimentos S. Typhi y S Parathyphi específicos del hombre y agentes casuales de la fiebre entérica. Hay portadores asintomáticos

Salmonella Thyphi y Parathyphi Exclusivas del hombre Dosis infectiva pequeña Incubación prolongada (1 o 2 semanas Thyphi u 1 a 10 días Parathyphi) Septicemia con síndrome tifoideo Pueden producir portadores permanentes Son fagocitados por macrófagos que permiten su diseminación por vía linfohematica Fiebre, decaimiento, constipación luego diarrea, roseolas (solo en tifoidea), perforación intestinal, tromboflebitis, colecistitis y abscesos

Otros serotipos Afectan al hombre y a los animales Dosis infectiva grande Incubación corta (18-72 hs.) Producen gastroenteritis que comúnmente no pasa a la sangre Nauseas, vómitos, dolor abdominal, fiebre, diarrea liquida mucosanguinolenta Autolimita

Yersinia pestis Coco-bacilos gram – Inmóvil A partir de medios líquidos se ven en cadenas No esporulado Peste bubónica que afecta a la rata y se transmite al hombre por intermedio de ciertas pulgas Alta mortalidad Fiebre, inflamación de ganglios, hemorragias petequiales en piel o vísceras Tiene endotoxina y exotoxina

Citrobacter Principal: C. freundii Infección urinaria Infección quirúrgica Bacteriemia y sepsis Meningitis y abscesos cerebrales

Klebsiella Principales: K. pneumoniae y K. oxytoca Infecciones nosocomiales (resistentes) Infecciones urinarias Sitio quirúrgico Bacteriemia Neumonía Meningitis

Enterobacter Infecciones nosocomiales E. cloacae y E. aerogenes: infecciones pulmonares, sistema nervioso central, genitourinarias, de heridas y bacteriemias E.sakasakii : Sepsis y meningitis del recién nacido (cronobacter)

Serratia Principal: S. marcenscens Infecciones nosocomiales Se transmite de persona a persona, fluidos hospitalarios contaminados, endoscopio, etc. Infecciones de sitio quirúrgico, urinarias, bacteriemias y respiratorias

Proteus, Morganella y Providencia Infección urinaria Se relacionan con formación de cálculos, orinas alcalinas y con cristales de fosfatos También infecciones en piel, subcutáneas, heridas, quemaduras, otitis y sistema nervioso central Principales: P. mirabilis y M. morganii

Vibrio cholerae Familia Vibronacea (se diferencia de Enterobacteriacea principalmente por ser oxidasa +) Bacilo en forma de coma, gram – Sin capsula No esporula Un solo flagelo largo y en el polo Anaerobios facultativos No tolera la desecación y la temperatura de cocción De los mas de 70 serogrupos solo el 01 genera cólera Gran numero de portadores asintomáticos

Vibrio cholerae Agente etiológico del cólera (perdida rápida y masiva de líquidos gastrointestinales, perdida salina, acidosis y shock Sin tratamiento tiene mortalidad de un 60%. Con reposición de liquido y electrolitos baja al 1% Agua contaminada con heces humanas De 10 a 20 litros de heces por día eliminando en estas una gran cantidad del microorganismo Mas susceptibles grupo sanguíneo 0 Rh + Actúa por medio de una exotoxina (toxina colérica) Nauseas, vómitos, diarrea, espasmos abdominales Heces liquidas, voluminosas y claras (“en agua de arroz”)

Vibrio cholerae Requisitos para la infección: Penetración por vía oral Sobrepasar la barrera gástrica por su pH acido Sobrevivir al peristaltismo intestinal (adhesina y flagelo permiten entrada al moco de la pared intestinal) Producir la toxina colérica

Bacilos gram – no fermentadores Pseudomonas aeruginosa Acinetobacter spp (bacilos cocoides y cocos) Ambos son importantes en infecciones intrahospitalarias

Pseudomonas aeruginosa Tiene un pigmento verde y olor particular (frutal) En agar sangre es β-hemolítica Polimorfismo cultural En Levine colonias traslucidas (lac -) Oxidasa + , móvil Aerobio estricto TSI (prueba bioquímica importante) Se aísla de suelo, agua, plantas , animales y el hombre Tiene endo y exotoxina

Pseudomonas aeruginosa Neumonía, inf. Urinaria y de sitio quirúrgico hospitalarias Oportunista Otitis, infección de cornea, bacteriemia, endocarditis, piel, osteoarticulares, meningitis y abscesos cerebrales Resistencia natural y adquirida a muchos ATB Eritema gangrenoso

Acinetobacter spp. Suelo, agua y flora habitual de piel, boca, uretra y vagina Infecciones hospitalarias Gran resistencia El mas importante es A. baumannii Es oportunista Inmóvil Oxidasa negativo Aerobio estricto Neumonía (asistencia respiratoria), urinaria, meningitis, bacteriemia, endocarditis y sitio quirúrgico

Cocos gram – de importancia clínica Neisseria gonorrhoeae Neisseria meningitidis Moraxella catarrhalis Acinetobacter spp Son todas aeróbicas

Nesisseria Diplococos Inmóviles Sin endosporo Oxidasa + Catalasa + Crecen mejor en ambientes húmedos y con 5% de dióxido de carbono Se usan medios selectivos como el Thayer-Martin modificado que es agar chocolate con varios antibióticos.

Neisseria N. gonorrhoeae alta prevalencia y baja mortalidad. (gonococo). Gonorrea N. meningitidis baja prevalencia y alta mortalidad (meningococo). Meningitis y septicemia meningococica Patógenos exclusivos del hombre Gonorrea: infección genital ascendente que puede llevar a la infertilidad en mujeres

Microbiología biomédica. Basualdo Bibliografía: Microbiología biomédica. Basualdo Microbiología. Brock Muchas Gracias!!