AGENDA Saludo Reflexión Desarrollo del tema Conclusión Dinámica

INTEGRANTES KEVIN ODIEL GUTIERREZ SONIA YANIRA PORTILLO SEGUNDO JEANNETTE IVONNE VASQUEZ DE ROMERO

REFLEXION

PRUEBAS MICROBIOLOGICAS PARA LIQUIDO CEFALORRAQUIDEO

Líquido cefalorraquídeo Es un líquido de color transparente, que baña al encéfalo y la médula espinal. Circula por el espacio subaracnoideo, los ventrículos cerebrales y el canal medular central

Función del LCR El líquido cefalorraquídeo tiene 3 funciones vitales muy importantes: Mantener flotante el encéfalo, actuando como colchón o amortiguador . Sirve de vehículo para transportar los nutrientes al cerebro y eliminar los desechos . Fluir entre el cráneo y la médula espinal para compensar los cambios en el volumen de sangre intracraneal manteniendo una presión constante

El liquido cefalorraquideo puede presentarse turbio por la presencia de leucocitos o la presencia de pigmentos biliares. Numerosas enfermedades alteran su composición

El estudio de liquido cefalorraquideo es importante y con frecuencia es determinante en las infecciones meníngeas y hemorragias. También es útil en el estudio de las enfermedades desmielizantes del sistema nervioso central o periférico.

Clasificación etiológica Las infecciones del SNC se dividen en varias categorías que pueden diferenciarse fácilmente entre sí mediante el examen del LCR Meningitis purulenta Encefalitis Meningoencefalitis amebiana Absceso cerebral

Interés clínico del LCR Infecciones del SNC Procesos vasculares Enfermedades desmielizantes Tumores del Sistema Nervioso Central

La eliminación del líquido cefalorraquídeo Se lleva a cabo a través de las vellosidades aracnoideas, proyección de las células de la aracnoide sobre los senos vasculares que alberga la duramadre. Estos senos desembocarán directamente en el torrente sanguíneo

Composición del lcr Sodio, Potasio, Calcio, Cloro, Sales inorgánicas (fosfatos) y Componentes orgánicos (glucosa). 

Obtención de LCR por punción lumbar por punción cisternal por punción ventricular

La presión normal depende de la posición del paciente durante su toma así como la edad. Recién nacido = 1,5 – 8 cm de agua Menor de 6 años = 4 – 8 cm de agua Adulto = 18 – 25 cm de agua Ventrículos = - 5 a 8 cm de agua  

Procedimiento 1-El médico debe obtener la muestra de LCR por punción lumbar 2-Una vez que llegó la muestra al laboratorio reportar la apariencia de la muestra haciendo énfasis en la claridad, turbidez, color, purulencia, presencia de sangre, coágulos o películas. 3-Uno de los tubos no se centrifuga, enviarlo para que se le haga el examen citoquímico. El otro tubo sirve para análisis microbiológico

4-Independientemente del aspecto del LCR, esté debe centrifugarse a 2500 r.p.m. por 20 minutos para concentrar la muestra. 5-Separar el sobrenadante el cual será usado para la prueba rápida de aglutinación en látex. (VDRL para neurosífilis). 6-El sedimento se empleará para cultivo y realizar un frotis y teñirlo con la técnica de Gram.

EXAMEN FÍSICO ASPECTO Normalmente limpio, claro y sin sedimento, si se presenta turbio, puede deberse a la presencia de leucocitos

COLOR Normalmente incoloro. Si el color oscila entre color pálido y anaranjado o amarillento se denomina xantocromía y puede deberse a: Oxihemoglobina Hematohemoglobina Bilirrubina Elevada conservación de proteínas (niveles superiores 150 mg/dl)  Tras de una hemorragia subaracnoidea (de 2-4 horas después) es normal la satocromia, que desaparece tras 4-8 días

COÁGULOS Y SEDIMENTOS No deben aparecer coágulos en reposo, pero si lo hacen pueden indicar: Coágulos sedimentados, en caso de meningitis purulenta. Coágulos floculantes, en caso de sífilis. Coágulos a modo de tela de araña, con películas suspendidas con la superficie del líquido en Meningitis Tuberculosa.

Se suele obtener en 2 tubos Tubo # 1 es para microbiología Centrifugar con rapidez Teñir el sedimento con gran A la vez sembrar en medio especial No conservar en refrigeración, pues algunos gérmenes se dañan

Tubo # 2 para citología, bioquímica, serología y hematología Hacer estudios hematológicos antes de que transcurra dos horas desde la extracción Centrifugar y usar el sobrante (química sanguínea) Se investiga glucosa y proteínas No conservar durante más de dos horas, pues los leucocitos consumen la glucosa

EXAMEN BIOQUÍMICO PROTEÍNAS El LCR contiene muy pocas proteínas en relación al plasma (14-45 mg/100 ml), siendo las principales: Albúminas - > prealbúminas -> globulinas. 

Un aumento en la concentración de proteínas de LCR puede estar causada por Meningitis purulenta. Meningitis grave Alteraciones endocrinas, metabólicas, etc. Aumento de la síntesis de proteínas en SNC

GLUCOSA Los valores normales de glucosa en LCR es de 40-80 mg/dl (60%-110% de la concentración en sangre)   Una disminución de los niveles de glucosa pueden indicar una Meningitis purolenta abscesos cerebrales, tumores, etc. La determinación de glucosa en LCR se puede hacer por los métodos espectrofotométricos.

ENZIMAS En el LCR están presentes muchas enzimas (GOT, GPT, etc), pero solo la LDH parece clínicamente útil. La LDH aumenta en los siguientes casos: Hemorragia subaracnoidea Meningitis baceriana Tumores del SNC

HEMATOLOGÍA EXAMEN MICROSCÓPICO Examen macroscópico

EL LCR apenas presenta células, suele ser normal: En adulto, de 0 a 0.5 células mononucleadas En niños de 0 a 30  La presencia de hematíes suele ser normal

RECUENTO CELULAR Debe efectuarse antes de una hora tras la extracción. Para el recuento se utiliza una cámara cuenta glóbulos como la de Neubayer. Un aumento anormal de células se llama: Pleositosis y es causada por tumores cerebrales, meningitis tuberculosa, etc.

Recuento Diferencial: CITODIAGNOSTICO Recuento Diferencial: El primer paso de un recuento diferencial de LCR es concentrar los leucocitos a través de distintas técnicas como: Centrifugación con tinción de Wright del sedimento resuspendido (también con May-Grumwald-Giemsa)

TIPO CELULAR ADULTO RECIEN NACIDO LINFOSITO 62 20 MONOCITO 36 72 NEUTROFILO 2 3 EOSINOFILO Raros

Claro ligeramente turbio Patología Aspecto Células Proteínas Glucosa Meningitis bacteriana Turbio 500-10000 80-500 <40 Meningitis vírica Claro ligeramente turbio 5-300 30-100 Normal Meningitis tuberculosa Claro 100-600 50-300 Meningitis fungica Ligeramente turbio 40-400 Hemorragia subaracnoidea Xantocromico 25-1000 Aumentada Normal o aumentada

CULTIVO DE LCR Proceso de la muestra para el cultivo Las muestras deben trasportarse rápidamente al laboratorio y ser procesadas inmediatamente no después de 30 minutos de recolectados. Rotular con el nombre del paciente, número de registro, fecha y naturaleza de la muestra. Si el médico sospecha que la muestra puede contener bacilos alcohol ácidos resistentes debe hacerlo saber en su solicitud al laboratorio

Agar Sangre Agar Chocolate El sedimento se siembra en placas con gelosa chocolate y gelosa sangre. Las placas se incuban a 37ºC en tensión parcial de CO2 de 24 a 48 horas. Si hay desarrollo bacteriano identificar colonias. Si después de 48 horas no hay desarrollo bacteriano pueden ser descartados. Agar Sangre Agar Chocolate

Diseminar por estrías en toda la superficie de los medios sólidos. Introducir el agar sangre de carnero y el agar chocolate en jarro húmedo con candela encendida (anaerobiosis). Incubar todos los medios a 36ºC, excepto el sabouraud que se incuba a temperatura ambiente, para el aislamiento de hongos patógenos, especialmente Cryptococcus neoformans

Agar Sangre y Agar Chocolate

Son los medios más frecuentemente empleados en el cultivo de LCR Son los medios más frecuentemente empleados en el cultivo de LCR. Son medios en los que crecen la mayor parte de las bacterias patógenas. Constan de un medio base de nutrientes, agar y sangre de carnero que constituye un suplemento nutricional para el cultivo. Deben incubarse en atmósfera de Co2 de 35-36ºC para Neisseria meningitidis y Haemophylus influenzae. Éste último solo crece en agar chocolate ya que necesita de factores intraeritrocitarios

Agar sangre de carnero Agar Chocolate. Agar Mac Conkey Sabouraud (hongos) Lowenstein Jensen (solo si se investiga BAAR)

En portaobjetos nuevos o bien limpios con alcohol, hacer dos frotis pequeños (de aproximadamente un centímetro de diámetro) en el centro de la lámina. Colorear un frotis con Gram y otro con Ziehl Neelsen.

Significado de los resultados anormales Si el LCR luce turbio, eso podría significar que hay una infección o una acumulación de la medula de glóbulos blancos o proteínas. Si el LCR luce sanguinolento o rojo, puede ser signo de sangrado u obstrucción de la medula espinal. Si se ve marrón, naranja o amarillo, puede ser un signo de aumento de la proteína en el LCR o un sangrado previo (hace más de 3 días).

El aumento de la presencia en el LCR puede deberse al aumento de la presión intracraneal (presión en el cráneo); mientras que la disminución en la presión del LCR puede deberse a un tumor de medula espinal, shock, desmayo o como diabética. El aumento de la proteína puede verse la sangre en el LCR, diabetes, polineuritis, tumores, lesión y cualquier infección inflamatoria o infecciosa; mientras que la disminución de la proteína es un signo de producción de LCR rápido.

Procesamiento de LCR