Determinación de anticuerpos antinucleares

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Transcripción de la presentación:

Determinación de anticuerpos antinucleares Autoinmunidad Determinación de anticuerpos antinucleares 1065. Inmunología Aplicada.Enseñanza Experimental Dra. Ana Esther Aguilar Cárdenas

Técnicas para la determinación de los anticuerpos antinucleares Los anticuerpos antinucleares (ANA) son anticuerpos dirigidos contra el material nuclear y se pueden detectar mediante técnicas inmunológicas. Inmunofluorescencia Ensayos inmunoenzimáticos

Títulos de ANA El título de una prueba positiva de ANA es importante para el diagnóstico de los trastornos del tejido conectivo. Los individuos sanos tienen títulos negativos o bajos. Los pacientes con trastornos del tejido conectivo generalmente tienen títulos elevados. Pueden observarse títulos intermedios o altos en familiares no afectados, en personas mayores, en mujeres gestantes, en pacientes con infecciones crónicas, en pacientes con neoplasias y en algunos individuos sanos.

Valor predictivo de las pruebas de ANA El valor predictivo positivo es una medida del número de individuos con una prueba positiva que tienen la enfermedad, comparado con todos los individuos que tienen un resultado positivo.

Tipos de ANA En inmunofluorescencia, se observan cinco patrones básicos de ANA: Moteado Homogéneo Periférico Centromérico Nucleolar

El modelo moteado se correlaciona con anticuerpos frente constituyentes nucleares que no son DNA (pe RNP) y se observa en TMTC, LES y esclerosis sistémica progresiva. Los patrones homogéneo y periférico se correlacionan con anticuerpos frente a histonas y al DNA nativo respectivamente y se asocian a LES. Estos dos patrones pueden coexistir.

El modelo centromérico es característico del síndrome de CREST Los anticuerpos dirigidos contra nucleolos producen un patrón nucleolar y se asocia con esclerodermia

Células HEp-2 con patrón moteado

Enfermedades asociadas

Otros autoanticuerpos (cANCA/pANCA) Anti-proteínasa 3: cANCA Anti-MPO: pANCA

Enfermedades asociadas

Portaobjetos con células Hep-2 Suero del paciente con anticuerpos Inmunofluorescencia Procedimiento Portaobjetos con células Hep-2 como sustrato DNAdoble cadena DNAcadena sencilla Ribonucleoproteínas Histonas + Suero del paciente con anticuerpos Incubar y lavar

Anti IgG humana marcada con isotiocianato de fluoresceína Incubar lavar Solución de montaje Observar en microscopio estimulando al fluorocromo con luz UV