regulación de medicamentos biotecnológicos en la UE ; calidad Sol Ruiz Chile – 1 Octubre 2010 regulación de medicamentos biotecnológicos en la UE ; calidad Sol Ruiz AEMPS Sol Ruiz
iológicos Biotecnológicos debido a su complejidad no pueden ser completamente caracterizados mediante técnicas analíticas solamente calidad determinada por la combinación de análisis físico-químicos y biológicos, además del proceso de producción y su control (controles en proceso) Biotecnológicos la actividad biológica e inmunogenicidad dependen de todas las “características estructurales” DIRECTIVA 2003/63/CE DE LA COMISIÓN de 25 de junio de 2003 Sol Ruiz
Productos biotecnológicos proteínas y glicoproteínas moléculas grandes y complejas microheterogeneidad inherente debido a modificaciones post-traduccionales Sol Ruiz
PROTEÍNAS RECOMBINANTES i) Idénticas a la molécula natural Insulina* Hormona de crecimiento ii) Moléculas modificadas/nuevas Proteínas de fusión (TNFR:Fc) Anticuerpos monoclonales “humanizados” Sol Ruiz
'Pharmed' goats seek drug license Imagine you could get life-saving medicines from milking a common farmyard animal. That idea moves a step closer to becoming a reality this week, as the European Medicines Agency (EMEA) considers the final stages of an application to license a natural human protein extracted from the milk of goats. 22 February 2006 Sol Ruiz
EU funding for GM plant vaccines European scientists have launched a project to make pharmaceutically useful products in genetically modified crops. The consortium, called Pharma-Planta, wants to produce vaccines and other treatments for major diseases, such as HIV/Aids, rabies and TB. The EU has put 12 million euros (£8m) into the project, which hopes to start clinical trials by 2009. The first product, possibly grown in maize, is likely to be an antibody that can be used to block HIV transmission. It would be incorporated into a microbicidal cream that could be used in the vagina. 12 July 2004 Sol Ruiz
Proteínas Recombinantes: QC Calidad, eficacia: Caracterización compleja Impurezas (del proceso de producción y relacionadas con el producto) Seguridad: Control de bancos celulares Control durante el proceso de producción Control de reactivos (e.g. suero bovino, enzimas) Estudios de inactivación viral Sol Ruiz
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EVALUACION DE LA CALIDAD DE PRODUCTOS BIOLOGICOS / BIOTECNOLOGICOS MATERIAL DE PARTIDA PROCESO DE PRODUCCION CARACTERIZACIÓN CONSISTENCIA DE PRODUCCIÓN ESTABILIDAD Sol Ruiz
Producción y control de calidad de productos derivados de la tecnología del DNA recombinante (3AB1A) Aspectos generales a controlar durante el proceso de producción: caracterización del vector de expresión su estabilidad durante todo el proceso establecimiento y control de los bancos celulares controles durante la fermentación y la purificación del producto requisitos mínimos para la caracterización del producto determinación de la consistencia de producción ensayos de liberación del producto
materiales de partida Sol Ruiz
End Of Production Cells (EOPC) materiales de partida Master Cell Bank (MCB) Working Cell Bank (WCB) End Of Production Cells (EOPC)
Líneas celulares de mamífero - Fácil producción a gran escala - Producción rápida, costo bajo - No modificaciones secundarias o BACTERIAS LEVADURAS - Menor antigenicidad - Producción compleja, costo elevado - Riesgo de contaminación Líneas celulares de mamífero - Menor antigenicidad (?) - Mantenimiento de animales, GMP - Riesgo de contaminación Animales TRANSGÉNICOS Sol Ruiz
Validación del proceso de producción
Sterile Filtrate – Batch Purified Product (Drug Substance) proceso de producción Cloned Cells MCB Cells WCB Cells Production Cells Production Harvest Clarified Supernatant Ultradiafiltration Anion Exchange Chromatography Ammonium Sulphate Precipitation Hydrophobic Interaction Chromatography Reverse Phase Chromatography Gel Filtration for Buffer Exchange Nanofiltration for Virus Removal Sterile Filtrate – Batch Purified Product (Drug Substance) sruiz@aemps.es
in-process controls Sol Ruiz
Pool dilution factor: 4.5 to 5.5 fold Operating Parameters Process Step In‑process Controls Load rate: 5 to 10 g/L resin Pool dilution factor: 4.5 to 5.5 fold Elution flow rate: 0.15 to 0.20 CV/min Pool hold temperature: 2.0- 8.0C Column: Cation exchange chromatography SP Sepharose HP resin, bed volume ~21.5 L RP‑HPLC purity, main peak: 86.8% CEX‑HPLC purity, main peak: 81.8% SE‑HPLC purity, main peak: 99.0% E coli protein: 2.5 ng/mg Bacterial endotoxin: < 0.24 EU/mL Aerobic bioburden: < 30 CFU/mL Step yield: 32.2% to 63.3% Pool volume: 40.9 to 77.4 L Position of start collect: 46.6 to 95.1 min Peak shape: Pass Sol Ruiz
< 17 ng/mL (below the LOQ) Gentamicin Impurity Residual level Host cell DNA < 2.5 ng/max. dose CHO Proteins < 0.375 µg/max. dose Insulin < 17 ng/mL (below the LOQ) Gentamicin < 2.5 ng/mL (below the LOQ) Anti-foam agent < 12.5 µg/mL Protein A < 0.4 ng/mL TRIS < 83 µM (10 g/mL) Sol Ruiz
ICH Q7A · Note for Guidance on Process Validation VALIDACION del PROCESO de PRODUCCION Requerimientos mínimos para productos biológicos/biotecnológicos: Numero de lotes de producción requerido depende de la complejidad del proceso de producción Al menos tres lotes consecutivos obtenidos a la escala de producción comercial propuesta ICH Q7A · Note for Guidance on Process Validation Sol Ruiz
caracterización Sol Ruiz
Caracterización Físico-Química Estructura primaria Análisis de la composición de aminoácidos Secuenciación N/C-terminal Mapa peptídico y secuenciación/MS Estructura secundaria y terciaria Dicroísmo circular Resonancia Magnética Nuclear Cristalografía de rayos-X Inmuno-reactividad Ensayos biológicos Otras propiedades Carga: CE, IEC, IEF Tamaño: AUC, SDS-PAGE, SE-HPLC, MALDI-TOF MS Inmuno-reactividad: IP, WB Composición (cualitativa y cuantitativa)
Actividad Biológica Ensayos biológicos en cultivos celulares INTERFERON Ensayos biológicos en animales ERITROPOYETINA Ensayos bioquímicos FACTOR VIII potencia consistencia de producción
Modificación de proteínas (product-related impurities) Oxidación Desamidación Agregación Clipping Plegamiento inadecuado Glicosilación alterada Modificación química Puentes disulfuro inadecuados
especificaciones biotecnológicos Estudios de estabilidad ICH Q6B Caracterización extensiva durante el desarrollo del producto cumplimiento de GMPs Controles en-proceso Control de los materiales de partida estrategia QA Estudios de estabilidad Validación de la producción Especificaciones SEGURIDAD & EFICACIA
Métodos y criterios de aceptación para productos biológicos y biotecnológicos (CPMP/ICH/365/96 ICH Topic Q6B) No se recomiendan métodos ni límites específicos (propios del fabricante en función de su propia experiencia) Describe los principios que deben guiar el establecimiento de especificaciones a diferentes niveles del proceso de producción: caracterización del producto controles en proceso materiales de partida liberación del producto validación de los métodos de análisis uso de estándares de referencia, etc. e.g. formas desamido
EurPh monographs biotech products rDNA products EPO insulin somatropin IFN alfa IFN gamma glucagon rhuFVIII alteplase (rtPA) calcitonin HBsAg molgramostim (GM-CSF) MoAbs biotech products
especificaciones de biotecnológicos Las especificaciones de una monografía de Ph. Eur. se consideran requisitos mínimos pero no son suficientes para definir cada producto en particular. Las especificaciones son propias de cada producto y asociadas a cada proceso de producción (ej. EPO)
estabilidad
Estudios de estabilidad de productos biotecnológicos/biológicos (3AB5A CMPM/ICH/138/95 ICH Topic 5QC) Estudios de estabilidad que han de presentarse al solicitar la autorización comercial Incluye aspectos tales como frecuencia a la que se debe medir la estabilidad condiciones de almacenamiento parámetros que deben ser medidos criterios de selección de los lotes que se incluyen en los estudios, etc.
selection of batches Final product at least 3 batches, representative of the scale of production and the material used in preclinical and clinical studies Final container, from different batches of bulk material where possible Minimum of 6 months stability data at the time of submission Expiry date based upon the actual data submitted
guías / directrices europeas Sol Ruiz
www.emea.europa.eu/htms/human/humanguidelines/biologicals.htm Sol Ruiz
autorización de biotecnológicos en la UE Sol Ruiz
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dossier medicamento biosimilar idéntico al de cualquier (módulo 3) idéntico al de cualquier biotecnológico + estudios de comparabilidad frente al producto de referencia
1 Octubre 2010 GRACIAS ! Sol Ruiz sruiz@aemps.es