INMUNOFLUORESCENCIA Dr. Juan Carlos Aldave Médico Especialista en Inmunología Clínica y Alergología Comité de Inmunodeficiencias Primarias Asociación Latinoamericana de Inmunología
Objetivos de la práctica: Conocer el fundamento de la técnica de inmunofluorescencia
Inmunofluorescencia Es una prueba de diagnóstico serológico que tiene dos variedades principales: IF directa: para detección de antígenos en una muestra clínica IF indirecta: para detección de anticuerpos específicos en el suero del paciente
Inmunofluorescencia directa (IFD) Prueba de una sola etapa Sobre una lámina depositamos una muestra en la que buscamos la presencia de un determinado antígeno (antígeno problema)
Inmunofluorescencia directa (IFD) Añadimos anticuerpos específicos del antígeno problema, marcados con isotiocianato de fluoresceína (conjugado) Si el antígeno problema se encuentra presente en la muestra, el conjugado se une. En caso contrario el conjugado se elimina con un lavado de la lámina
Inmunofluorescencia indirecta (IFI) Prueba de 2 etapas Sobre una lámina que lleva pegado un antígeno conocido, añadimos el suero del paciente Si el suero contiene anticuerpos específicos, éstos se unen al antígeno
Inmunofluorescencia indirecta (IFI) Posteriormente se añaden anticuerpos anti-inmunoglobulina humana marcada con isotiocianato de fluoresceína (conjugado) El conjugado se unirá a los anticuerpos del paciente
Lectura de inmunofluorescencia La lectura se hace con un microscopio de fluorescencia, cuya luz estimula al isotiocianato de fluoresceína, haciendo que emita luz fluorescente de color verde La observación de luz verde fluorescente en la lámina indica la presencia del antígeno en la muestra (IFD) o de anticuerpos específicos en el suero (IFI)
IFI: primera etapa IFI: segunda etapa
Utilidad de la IF en la detección de anticuerpos antinucleares (ANA)
¿QUÉ SON? ANTÍGENO ANTICUERPO
Importancia Asociación con enfermedades del tejido conectivo Participación en la patogenia de la enfermedad Anti DNA – nefritis lúpica Anti Ro – bloqueo cardiaco congénito
“Que Dios los cuide mucho y bendiga su familia y trabajo” GRACIAS