REUNION VIRTUAL – 10 de diciembre de 2008 “ESTANDARIZACIÓN ANALÍTICA DE LOS LABORATORIOS CLÍNICOS EN LA REGIÓN LATINOAMERICANA: PROBLEMAS Y ESTRATEGIAS PARA RESOLVERLOS” REUNION VIRTUAL – 10 de diciembre de 2008

UNIVERSIDAD DE BUENOS AIRES Facultad de Farmacia y Bioquímica Departamento de Bioquímica Clínica Hospital de Clínicas “José de San Martín” Profesor Titular Dr. Gustavo A. Negri

Estandarización Ejecutar normas de uso uniforme en la práctica uso de una metodología uniforme y aprobada Comparar con un estándar de propiedades conocidas y definidas uso de un mismo calibrador común para métodos diferentes

Armonización de mediciones interlaboratoriales Control de calidad externo Interpretación clínica por parte del médico

IFCC: 2 aproximaciones 1ª aproximación (década del ’70): - Definir condiciones de método de referencia - Instar a usar el mismo método Problemas: - Adaptación a rutina, automatización, desarrollo tecnológico - Recomendaciones de las sociedades nacionales * Resultados EQA demuestran altos CV interlaboratorio

IFCC: 2 aproximaciones 2ª aproximación (actualidad): Sistema de referencia - Métodos de referencia - Materiales de referencia - Laboratorios de referencia Concepto básico de esta aproximación es calibrar los métodos de rutina

El sistema de referencia provee: - trazabilidad - cuantificación de incertidumbres - comparabilidad

Sistemas de Referencia Son necesarios para producir resultados útiles y confiables: Establecer el comportamiento de los sistemas de medición. Demostrar la comparabilidad de diferentes procedimientos utilizados en análisis de rutina destinados a medir la misma cantidad. Asignar valores a materiales de referencia que se utilizarán para calibraciones o para control de procedimientos de mediciones de rutina. Para las mediciones que realiza el laboratorio clínico es de vital importancia que los resultados reportados a los médicos y a los pacientes sean comparables, reproducibles y exactos. ISO 15193

Valor observado Valor verdadero TRAZABILIDAD Propiedad del resultado de una medición o el valor de un estándar por la cual éste puede relacionarse a referencias establecidas (estándares nacionales o internacionales) a través de una cadena continua de calibraciones cada una con sus incertidumbres establecidas. ISO 17511 Valor observado Valor verdadero

Cadena de trazabilidad

Resultado Definición de la unidad SI CGPM Procedimiento de medición primario de referencia Calibrador primario BIPM NMI ARML Procedimiento de medición secundario de referencia NMI ARML ML Calibrador secundario Procedimiento de medición seleccionado por el fabricante Calibrador de trabajo del fabricante Procedimiento de medición del fabricante Calibrador producido por el fabricante Procedimiento de rutina del usuario Muestra de rutina Resultado ARML: Laboratorio de referencia acreditado ML: Laboratorio del productor

Los analitos medidos pueden ser clasificados según la cadena de trazabilidad Categoría A: Aquellos para los cuales los resultados de medición son trazables a las unidades SI (p.ej. mol) Son compuestos químicos bien definidos, p.ej. glucosa, colesterol, urea, hormonas esteroides. Categoría B: Aquellos cuyos resultados no son trazables a las unidades SI,sino que solo lo son a estándares de mayor jerarquía en la cadena de calibración. se expresan en términos de unidades arbitrarias, como por ejemplo U.I.. Se basan en funciones biológicas, como ensayos de coagulación o actividad catalítica enzimática. También se basan en inmunoprocedimientos (Elisa) o en amplificación de ácidos nucleicos.

PROCEDIMIENTO DE MEDIDA Etapa preanalítica o premetrológica. Sistema de medida : - reactivos - equipo de medida El resultado de toda medición contiene un error, es decir una desviación sobre un valor “real” (verdadero) de la magnitud que se mide. Cualquier resultado cuantitativo tiene más utilidad si se acompaña de algún tipo de estimación del error inherente a la medición (variación analítica) Variación Analítica Variación Biológica

Error de medida y sus componentes

Error sistemático (ES) Error sistemático Veracidad Causas: a- Calibración incorrecta (afecta a todas las muestras) b- Inespecificidad metrológica (afecta a las muestras que tienen magnitudes interferentes) Cuando el equipo de medida está adecuadamente calibrado y el proceso de medida es suficientemente específico. ES 0

ERRORES SISTEMÁTICOS EN LOS PROCEDIMIENTOS ANALÍTICOS Una de las causas más importantes de la dispersión interlaboratorio Reviste gravedad en el sistema de salud: Diagnósticos inadecuados: falsos positivos o negativos. Interpretación errónea por parte del médico en control evolutivo y terapéutico del paciente.

Calibradores y controles utilizados en el DIV Con trazabilidad asegurada a sistemas de referencia establecidos. Se transfiere la trazabilidad a las mediciones realizadas utilizando sistemas homogéneos. Normas ISO relacionadas con medición de cantidades en muestras biológicas: - 17511: trazabilidad metrológica de los valores asignados a calibradores y materiales de control. - 18153: trazabilidad metrológica de los valores de concentración catalítica de enzimas asignados a calibradores y materiales de control.

Calibración exitosa de un método de rutina a partir de un método de referencia Relación entre ambos debe ser constante para todas las muestras Se demuestra cuanto más extenso es el muestreo El concepto de una relación constante intermétodo para todas las muestras ha sido descripto por el término conmutabilidad

La cadena de trazabilidad será válida A- El método de referencia y los métodos de rutina deben tener igual especificidad para el analito. B- Los distintos materiales involucrados deben tener conmutabilidad con el material humano

Conmutabilidad

La conmutabilidad de los materiales de referencia con las muestras de pacientes debe ser testeada por uno o varios métodos (con especificidad analítica igual a la del método de referencia). Ésta depende de: Fuente Proceso de purificación Matriz (cofactores, efectores, aditivos, estabilizantes) Procesamiento del producto final

Cuestion esencial: las propiedades del calibrador enzimático deben ser tan similares como sea posible a aquellas de la enzima en su matriz natural. Heterogeneidad molecular En la práctica la relación encontrada entre los métodos de rutina y de referencia para el calibrador debe ser la misma que la relación promedio encontrada para un gran número de muestras (normales y patológicas)