Aplicacciones tecnológicas de las Bacterias del Ácido Láctico

USINA CELULAR PLANO DA APRESENTAÇÃO Bactérias Lácticas Utilização tradicional Novas utilizações das BL L. lactis Clonagem e Expressão Sistemas de expressão Sistemas de endereçamento USINA CELULAR

Tecnología del ADN recombinante Microbiologia Bioquímica INTEGRACIÓN Fisiologia Genética

Nuevas utilización de BAL Producción de proteínas heterologas de interes biotecnológico USINA ENZIMAS Tecnológica Terapuetica (Probióticos GM) ANTÍGENOS - Veículos vacunales (vacunas orales)

Lactococcus lactis: BAL MODELO Orden de la membrana Expresión de capa S de L. brevis Capítulo VI Lactococcus lactis: BAL MODELO Bacteria ampliamente utilizada en la industria alimentaría De fácil manipulación dentro de las LAB Sólo la proteína USP45 es secretada en cantidades suficientes para observarse mediante tinción de Coomassie blue Información genética disponible

Sistema NICE de direccionamiento protéico (Le Loir et al., 2001) MOTIVOS DE DIRECCIONAMIENTO PROTÉICO Sistema NICE de direccionamiento protéico (Le Loir et al., 2001) Membrana Citoplasma Parede celular Medio extra-celular Nuc cwaM6 PnisA nuc spUsp45 pCYT:Nuc pSEC:Nuc pANC:Nuc

MOTIVOS DE ENDEREÇAMENTO PROTÉICO sobrenadante Ancla LPXT parede celular membrana CWA citoplasma precursor SP Proteína secretada Proteína anclada

Expresión direccionada Secretada Citoplasmática Anclada

Sistema de expresión NICE

Sistema de expresión XIES Cmr PxylT rbsusp45 Slp T spusp45 Membrana Citoplasma Pared celular Medio extra-celular Nuc Cmr : Resistencia a Cloranfenicol PXyl T: Promotor de la Xilosa permeasa rbs usp45: Sitio de Unión al Ribosoma del gen usp45 SP usp45: Péptido señal de la proteína USP45

BAL como vehículos vacunales L. Lactis Se encuentra en números productos lácteos fermentados Hay una lisis parcial en el intestino No coloniza el epitelio intestinal Tiempo de transito es discreto Efecto se produce en un tiempo limitado

BAL como vehículos vacunales 1. Expresión de antígenos en forma citoplasmática Al ocurrir la lisis parcial en el intestino los antígenos son liberados

BAL como vehículos vacunales 2. Expresión de antígenos en forma secretada Los antígenos interactúan directamente formando parte de la partícula completa o de los fragmentos luego de la lisis parcial

BAL como vehículos vacunales 1. Expresión de antígenos en forma secretada Los antígenos se van liberando para interactuar con el sistema inmune en todo el proceso

BAL como vehículos vacunales Antígeno en forma secretada

BAL como vehículos vacunales Antígeno en forma secretada