UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE UNIVERSIDAD VERACRUZANA FAC. DE BIOANALISIS XALAPA EE. MICOLOGIA Examen directo y Medios de cultivo Presentan: Rosas Ordoñez Gabriela Dulce Dilian Ortiz Soto Cruz Rivera Paula Ameyali Vela Veliz Mayra Irais López Guerra Domingo Lara Sánchez Elías Reyes Karol Leyda

Recordar que…. Los hongos crecen en dos formas: Levaduras Mohos Células únicas de forma esférica (3-15 µm). producto de gemación. pseudohifas Mohos Colonias filamentosas multicelulares. Túbulos cilíndricos Micelos Algunos divididos por septos. Brook G, Butel j, Morse S. 2005.

Cutánea (pelo, piel, uñas) Especímenes clínicos Secreción de heridas Biopsias Orina Cutánea (pelo, piel, uñas) Exudados mucosas MO Sangre Secreción de VRB

Dx Micológico Adecuada y abundante Reactivos. Medios de cultivo. Toma de muestra Adecuada y abundante Recursos del Lab. Reactivos. Medios de cultivo. Equipos . Personal Con experiencia en toma y manejo

Examen Directo KOH Hidróxido de potasio…....20 gr Glicerol.......20 ml Agua destilada.....60 ml KOH-dimetil sulfoxido Hidróxido de potasio................10 gr Dimetilsulfóxido..40 ml Agua destilada.............50 ml Sol. Salina Cloruro de sodio…. 0.85 gr Agua destilada. 100 ml

Calidad del personal del Lab. Limitaciones Sitio anatómico Cantidad de muestra # de microorganismos Tipo de paciente Calidad del personal del Lab. Artefactos

Cultivo de la Muestra (envases)

Cultivo de la Muestra (Agar) Saburaud Micosel, micobiótico 2% glucosa. pH 6.9 Medios estándar. No ideal para esporulación. Puede contener cloranfenicol o gentamicina. Harina de soja Dextrosa Ciclohexamida y cloranfenicol

Como estimulante de pigmento: Zanahoria y bilis Papa-Dextrosa BHI con/sin Antibiótico Base de pulpa de papa. Glucosa/dextrosa Como estimulante de pigmento: Zanahoria y bilis Hongos filamentosos y levaduras. Sangre de carnero. Antibiótico: Cloranfenicol, Gentamicina, Cicloheximida. Colonias de Penicillium expansum (A) y Botrytis cinerea (B), creciendo en medio Agar Papa Dextrosa. Conservar a 2-8 °C en una bolsa

Temperatura 25-30 °C 37 °C Tiempo Levaduras 24-48 hr. Hongos filamentosos No patógenos 2-4 días Patógenos 6-15 días

Identificación de hongos Color Tasa de crecimiento

Granular o polvorienta glabrosa Textura Algodonosa Aterciopelada Granular o polvorienta glabrosa

Topografía (colinas y valles) Rugosa Umbonada Verrucosa Aplanada

Examen del Cultivo Cardaje Fragmentos hifales Azul de algodón de lactofenol Fenol, concentrado..20 ml Acido láctico............20 ml Glicerol....................40 ml Azul de algodón.....0.50 gr Agua destilada.........20 ml Fragmentos hifales Metamina Argentica de Gomori Tiñe de negro la pared celular Ac. Peryodico de Schiff Cardaje

Microcultivo Cinta Adhesiva

Trichophyton rubrum

Trichophyton tonsurans

Trichophyton mentagrophytes

Microsporum canis

Epidermophyton floccosum

Pitiriasis Versicolor

Coccidioides immitis Fase tisular 37 °C Fase micelial 25-30 °C

Aspergillus spp. Morfología colonial

Medios de cultivo Agar Saburaud Papa-Dextrosa Extracto de Malta Glucosa 20 g/L Extracto de malta Peptona 1 Agar 15 pH = 5,4 (selectivo) Czapek-Dox Medio para el cultivo de hongos y bacterias capaces de utilizar el nitrato de sodio como única fuente de nitrógeno. Aspergillus terreus on Czapek dox agar showing typical suede-like cinnamon-buff to sand brown colonies while reverse is yellow to deep dirty brown.

Identificación de Estructuras

Bibliografía Murray P, Rosenthal K, Pfaüer M. (2006). Microbiología Medica. 5 edic. Edit. El sevier. Madrid. España. Pp 734-736. Brook G, Butel j, Morse S. (2005). microbiología Medica de Jawetz, Mednick y Adelberg. 25 edic. Edit. Manual moderno. Cali. Colombia. P. 621. Pumarola A, Rodríguez A, García J, Piedrola G. (nd). Microbiología y parasitología Medica. 2 edic. edit. Salvat. Barcelona. España. P 752. González G. (nd). Métodos básicos en el laboratorio de micología. Identificación de hongos. Consultado el 17 de marzo del 2012. disponible en: http://goo.gl/cfa7v Magaña M, Magaña M. dermatología. (2003). Editorial panamericana. México DF. Pp. 22 [versión web] Silva D. (nd). Pitiriasis versicolor. Consultado el 17 de marzo del 2012. disponible en: http://www.pediatraldia.cl/pitiriasis_versicolor.htm SA. (nd). Agares. Consultado el 17 de marzo del 2012. disponible en: http://danival.org/fungi/fungi_medios.html BD. (2007). Mycosel Agar. Consultado el 17 de marzo del 2012. disponible en: http://goo.gl/TJbzY Biocen. Agar Czapek-Dox . Consultado el 17 de marzo del 2012. disponible en: http://www.biocen.cu/producto/indicemc/lmcp1.htm HWG. (2002-2011). Agar Czapek-Dox . Consultado el 17 de marzo del 2012. disponible en: http://www.mold.ph/aspergillus-terreus.htm