Cinética Enzimática

Funciones de las Proteínas Las funciones de las proteínas son específicas de cada tipo de proteína y permiten a las células defenderse de agentes externos, mantener su integridad, controlar y regular funciones, reparar daños… Todos los tipos de proteínas realizan su función de la misma forma: Por unión específica de otra molécula o ión (ligando o ligante) De la unión se derivan: Formación de estructuras celulares (Proteínas fibrosas) Transporte y almacenamiento Reactividad específica (catálisis) Cambios conformacionales (alosterismo, motores moleculares, transmisión y transducción de señales)

Enzimas • Las enzimas son catalizadores biológicos que disminuyen la energía de activación de las reacciones que catalizan, pero no modifican la constante de equilibrio. • Por tanto aceleran en igual proporción la velocidad de la reacción en las dos direcciones.

Irreversible simplificada Reacciones catalizadas por enzimas Reversible Irreversible simplificada

Curva de Evolución de los componentes de la reacción

Leonor Michaelis (der) Maud Menten (izq) Leonor Michaelis (der)

Variables de la ecuación de velocidad Variable dependiente: velocidad inicial Variables independientes: A) Concentración de enzima B) Concentración sustrato

Bajo qué condiciones aplica la ecuación de Michaelis-Menten Velocidad inicial No añadir producto al medio de ensayo Concentraciones de sustrato muy superior a la concentración de la enzima La concentración de sustrato debe permanecer “casi” constante durante el periodo de tiempo en que se mide la reacción

Representación gráfica de la ecuación de Michaelis-Menten

Transformación de la ecuación de Michaelis-Menten

Paramétros cinéticos Son las constantes que aparecen en la ecuaciones de velocidad Están compuestos por las constantes de velocidad de los pasos que constituyen la reacción catalizada

Unidades

Velocidad máxima

Constante catlítica (kcat)

Constante de Michaelis-Menten (Km)

Constante de especificidad

Factores que afectan la velocidad Concentración de sustrato o sustratos (cofactores) Concentración de enzima Inhibidores Activadores pH Temperatura

Determinación de los parámetros cinéticos

Regulación de la actividad enzimática por union a la enzima de ligandos que no son sustratos

Tipos de Inhibidores

Sólo se afecta la Km

Afecta la Km y Vmax