CULTIVO, SEROLOGÍA, PRUEBAS DE SENSIBILIDAD, TINCIÓN DE GRAM Dra. Roxana Blanco Villarte DOCENTE PATOLOGIA CLINICA Dra Roxana Blanco Villarte
Dra Roxana Blanco Villarte CASO CLINICO Paciente de sexo masculino, 34 años de edad acude al servicio de urgencias inconsciente, piel y mucosas deshidratadas A referencia de familiar presento convulsiones Signos vitales: PA 80/50 mmHg FR: 32 rpm T: 35ºC FC: 110 lpm Dra Roxana Blanco Villarte
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Dra Roxana Blanco Villarte CULTIVOS DETECTA BACTERIAS HONGOS SEROLOGIA DETECTA VIRUS ACTUALMENTE PARASITOS Y BACTERIAS TINCION GRAM DETECTA SOLO BACTERIAS Dra Roxana Blanco Villarte
CULTIVOS COPROCULTIVO SE LO REALIZA DE CUALQUIER MUESTRA CULTIVOS UROCULTIVO COPROCULTIVO HEMOCULTIVO OTROS: CULTIVO DE SECRECION DE HERIDA, SECRECION NASAL, OCULAR, OIDO CULTIVO DE HISOPEADO FARINGEO Dra Roxana Blanco Villarte
Dra Roxana Blanco Villarte SOLICITUD DE CULTIVOS VA A DEPENDER DE LA CLINICA QUE PRESENTA EL PACIENTE Y DEL CRITERIO MEDICO. Dra Roxana Blanco Villarte
Dra Roxana Blanco Villarte HEMOCULTIVO Dra Roxana Blanco Villarte
Dra Roxana Blanco Villarte Toma de Muestra: Preparación de la piel LIMPIEZA CON ALCOHOL 70% ( 2 VECES MISMA DIRECCION) ESCOGER SITIO VENOPUNCIÓN SE RECOMIENDA LA MUESTRA INDEPENDIENTE DEL PICO FEBRIL Dra Roxana Blanco Villarte
Dra Roxana Blanco Villarte Toma de Muestra: Volumen de la muestra Bacteremias <1 a 10 UFC/ml a mayor volumen de muestra obtenido, mayor es la sensibilidad del examen Se recomienda 3 MUESTRAS DE SANGRE Relación volumen muestra y medio de cultivo= 1/5 a 1/10 Adultos 10 ml Pediátricos 3 a 5 ml RN 1 a 3 ml Dra Roxana Blanco Villarte
Dra Roxana Blanco Villarte FOCO DE INFECCION Extravascular Vasos capilares Vías linfáticas Intravascular Endocarditis (20-40% mortalidad) HEMOCULTIVOS Dra Roxana Blanco Villarte
¿Cuando solicitar Hemocultivos? Paciente febril sin Foco Estado de shock sin causas hemodinámicas Infecciones aparente o inaparente: Neumonía nosocomial, pielonefritis, meningitis, infección abdominal, infecciones complicadas piel Leucopenia o leucocitosis no relacionada con enfermedad Hematológica Paciente inmunodepremido Paciente usuario de catéter venoso Dra Roxana Blanco Villarte
DIFERENTES MORFOLOGÍAS COLONIALES Dra Roxana Blanco Villarte
MEDIO SELECTIVO Y DIFERENCIAL Colonia Lactosa negativa Colonia Lactosa positiva Dra Roxana Blanco Villarte
GRAM POSITIVO COAGULASA (+) Dra Roxana Blanco Villarte
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Dra Roxana Blanco Villarte COCO GRAM POSITIVO Dra Roxana Blanco Villarte
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Dra Roxana Blanco Villarte ANTIBIOGRAMA ES UTIL PARA DETERMINAR LA: SENSIBILIDAD RESISTENCIA DE UN DETERMINADO GERMEN A LA TERAPEUTICA EMPLEADA Dra Roxana Blanco Villarte
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Dra Roxana Blanco Villarte ANTIBIOGRAMA Dra Roxana Blanco Villarte
Dra Roxana Blanco Villarte ANTIBIOGRAMA Dra Roxana Blanco Villarte
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Dra Roxana Blanco Villarte TINCION GRAM Dra Roxana Blanco Villarte
UTILIDAD DE LA TINCIÓN DE GRAM PERMITE ENTREGAR INFORME PRELIMINAR EN LAS BACTEREMIAS ACELERAR EL INICIO DE TERAPIA ANTIBIOTICA ESCOGER O BIEN CAMBIAR TERAPIA EMPÍRICA DEFINE EL TIPO DE MEDIO DE CULTIVO ADECUADO PARA AISLAMIENTO Dra Roxana Blanco Villarte
Dra Roxana Blanco Villarte Lunes Tinción Tinción de Gram Frotis y fijación 1.- Poner una gota de agua en un porta 2.- Tomar la muestra con el asa de siembra 3.- Extender sobre el agua y fijar a la llama del mechero 1.- Cubrir la preparación con Cristal Violeta 2’ 2.- Añadir Lugol (mordiente) durante 1’ 4.- Lavar con agua 5.- Teñir con Safranina 1’ 6.- Lavar con agua, dejar secar y observar al microscopio 3.- Decolorar con Alcohol 96º hasta que no suelte colorante Dra Roxana Blanco Villarte
Dra Roxana Blanco Villarte Tinción de Gram Paso 1 Paso 2 Paso 3 Paso 4 Tinción del frotis Previamente fijado al calor, con cristal violeta Durante 1 minuto. Todas las células se tiñen de color azul-violeta. Añadir Lugol, dejar actuar 2 minutos Todas las células siguen Decolorar con alcohol Las células Gram + siguen de color azul-violeta. Las Gram negativas se decoloran. Tinción de contraste Con safranina 2 minutos. Las células G+ se ven azul-violeta. Las G- rosas o rojas. Gram + Gram - Dra Roxana Blanco Villarte
PROCEDIMIENTO COLORACION GRAM Dra Roxana Blanco Villarte
Dra Roxana Blanco Villarte Lunes Tinción de Gram Cocos Gram - Bacilos Gram - Dra Roxana Blanco Villarte
Diferencias Gram positivos y Gram negativos Dra Roxana Blanco Villarte
Morfología bacteriana Dra Roxana Blanco Villarte
MORFOLOGÍA BACTERIANA COCOS BACILOS Dra Roxana Blanco Villarte
Dra Roxana Blanco Villarte Diplococos Estreptococos Estafilococos Dra Roxana Blanco Villarte
Dra Roxana Blanco Villarte SEROLOGIA Dra Roxana Blanco Villarte
Dra Roxana Blanco Villarte DEFINICION La serología es el estudio que permite comprobar la presencia de anticuerpos en la sangre. Dra Roxana Blanco Villarte
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Dra Roxana Blanco Villarte ELISA INMUNOFLUORESCENCIA WSTERN BLOT AGLUTINACION Dra Roxana Blanco Villarte
Dra Roxana Blanco Villarte PARASITOS TOXOPLASMOSIS CHAGAS TOXOCARIOSIS HIDATIDOSIS CISTICERCOSIS AMEBIASIS LEISHMANIASIS PALUDISMO VIRUS HTLV 1 Y 2 HEPATITIS B,C, HIV RUBEOLA VIRUS EPSTEIN BARR VIRUS PARASITOS HONGOS BACTERIAS BACTERIAS HELICOBACTER PYLORI TREPONEMA PALLIDUM HONGOS CRIPTOCOCUS NEOFORMANS Dra Roxana Blanco Villarte
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Dra Roxana Blanco Villarte CASO CLINICO En la reevaluación del paciente, una vez el paciente se encuentra fuera de peligro: Refiere antecedente de relaciones sexuales sin protección, sintomas B (+) los cuales incluyen fiebre, sudoración nocturna y perdida de peso aproximadamente 6 kilos, ademas presencia de deposiciones liquidas en varias oportunidades de consistencia liquida Dra Roxana Blanco Villarte
Dra Roxana Blanco Villarte Al examen físico presencia de placas blanquecinas en cavidad oral, adenopatias region cervical e inguinal de aproximadamente 5 x 2 cm, no dolorosas a la palpacion. No se palpa visceromegalias Pulmones se auscultan estertores crepitantes diseminados en ambos campos pulmonares Dra Roxana Blanco Villarte
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Dra Roxana Blanco Villarte QUE SOLICITO PANCULTIVOS (Hemocultivo, cultivo y ATB de hisopeado faringeo, coprocultivo y ATB, urocultivo) RX PA TORAX Serologia hepatitis B, C, HIV, chagas, VDRL Hemograma, quimica sanguinea Dra Roxana Blanco Villarte
Dra Roxana Blanco Villarte Cultivo de hisopeado faringeo se aisla candida albicans Serologia HIV positivo Coprocultivo se aisla proteus mirabilis sensible ceftazidima, cefotaxima, imipenem, resistente a amoxcicilina, amoxicilina mas acido clavulanico RX PA torax compatible con imagen miliar sugestiva de Tuberculosis pulmonar Hemograma leucopenia de 3, 000 con neutrofilos absolutos de 1,000, anemia normocitica normocromica, trombocitopenia de 100,000 Hipokalemia k 2,5 mEql Na 135 mEql Dra Roxana Blanco Villarte
Dra Roxana Blanco Villarte PROXIMA CLASE LEER ANTICUERPOS ANTINUCLEARES, ANTI-ADN, FACTOR REUMATOIDEO GRACIAS Dra Roxana Blanco Villarte