Prueba TSI El Agar-hierro-triple azúcar es un medio de cultivo. Gracias a su composición es uno de los medios de cultivo más empleados para la diferenciación.

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Transcripción de la presentación:

Prueba TSI El Agar-hierro-triple azúcar es un medio de cultivo. Gracias a su composición es uno de los medios de cultivo más empleados para la diferenciación de enterobacterias según: Fermenten o no glucosa. Fermenten o no lactosa o sacarosa. Produzcan o no ácido sulfhídrico. Produzcan o no gas.

Correspondientemente las reacciones sobre agar TSI son: -Si la bacteria problema fermenta la glucosa, acidificará el medio haciendo virar a amarillo el indicador en el fondo del tubo, mientras que si no es fermentadora de glucosa, el medio permanecerá de color rojo.

-Si la bacteria problema fermenta lactosa o sacarosa, acidifica el medio en su superficie volviéndolo de color amarillo, mientras que si no lo es, la superficie del medio continuará de color rojo. -Si aparece rotura o desplazamiento del medio, significa que la bacteria es productora de gas.

- Si produce ácido sulfhídrico (debido a la reducción de las sales de hierro), se presentará un ennegrecimiento del tubo.

Agar Citrato Esta prueba nos permite diferenciar un grupo de bacterias que son capaces de crecer con citrato como única fuente de carbono y sales amónicas inorgánicas como única fuente de nitrógeno, provocando la alcalinización del medio. El medio a utilizar es agar Citrato de Simons, que contiene citrato de sodio, fosfato de amonio y azul de bromotimol como indicador de pH. Sólo las bacterias capaces de metabolizar el citrato podrán multiplicarse en este medio y liberarán iones amonio lo que, junto con el metabolismo del citrato, generará una fuerte basificación del medio que será aparente por un cambio de color del mismo de verde a azul

Indol SIM: sulfuro indol movilidad MIO: movilidad indol ornitina Principio El indol es uno de los productos de degradación metábolica del triptófano. La prueba del indol se basa en la formación de un complejo de color rojo cuando el indol reacciona con el grupo aldehído del p-dimetilaminobenzaldehído.

SIM: Sulfuro Indol Movilidad Determina si un organismo es móvil o inmóvil, si es capaz de liberar ácido sulfhídrico por acción enzimática de los aminoácidos que contienen azufre produciendo una reacción visible de color negro y por último la capacidad de desdoblar el indol de la molécula de triptófano que se evidencia por la producción de un anillo rojo.

Medio MIO (Movilidad Indol Ornitina) Este medio como su nombre lo indica sirve para observar la movilidad, la produccíon de indol y descarboxilación de la ornitina. -La movilidad se detectará por la presencia de turbidez alrededor del punto de inoculación.

- El indol se formará si la bacteria tiene la capacidad de producir la enzima triptofanasa que desdoblará el aminoácido triptófano en indol, ácido pirúvico y amonio. El indol es incoloro pero al reaccionar con el reactivo de Kovacs (p-dimetil-aminobenzaldehido) que se adiciona después de que creció la bacteria, dará un color rojo violeta.

-Por lo que respecta a la descarboxilación de la ornitina como el medio tiene púrpura de bromocresol y una pequeña cantidad de glucosa cuando esta se fermenta se produce un color amarillo en el fondo (ornitina descarboxilasa negativa), sin embargo al descarboxilarse la ornitina se produce putresina la cual es alcalina y sobrepasa la acidez dada por la fermentación de las glucosa resultando en un color morado en el fondo.

Prueba LIA

Prueba de la ureasa: Fundamento La prueba determina la capacidad de un Microorganismo de producir la enzima ureasa, que hidroliza la urea. En la hidrólisis se produce amoniaco y CO2 .La formación de amoniaco alcaliniza el medio y provoca el cambio de pH que se detecta por el cambio de color. Resultados Positivo: cambio de color del agar del naranja pálido a fucsia. Negativo: sin cambio de color queda naranja pálido

Gracias…