GENES ASOCIADOS A LA ESCLEROSIS MÚLTIPLE: CAMBIOS EN LA EXPRESIÓN GÉNICA MODULABLES POR PROCESOS EPIGENÉTICOS Delgado García, M1; Matesanz Del Barrio, F2; Izquierdo Ayuso, G3; Lucas Lucas, M1. 1.Servicio de Biología Molecular. Hospital Universitario Virgen Macarena, Sevilla. 2.Departamento de Biología Celular e Inmunología. Instituto de Parasitología y Biomedicina López Neyra (CSIC), Granada. 3.Servicio de Neurología. Hospital Universitario Virgen Macarena, Sevilla. Área Hospitalaria Virgen Macarena OBJETIVOS Antecedentes: El ácido valproico (VPA) y el fenilbutirato (NaPB) son inhibidores de desacelitasas de histonas (HDACi). Estos compuestos disminuyen el grado de compactación de la cromatina y aumentan la expresión génica. En este proyecto analizamos el efecto de VPA y NaPB en la expresión de genes IL2RA, IL7RA, CD6, TNFRSF1A, UBAC2, PTGER4 y RORc asociados a esclerosis múltiple (EM) seleccionados de estudios de GWAS (Genome-wide association study) para ver la posible regulación diferencial de la expresión de estos genes a nivel epigenético entre sanos y pacientes. MATERIAL Y MÉTODOS Se extrajo mRNA de células mononucleares de sangre periférica de controles sanos no activadas y activadas con acetato de forbol-miristato (PMA) y tratadas con VPA y NaPB. La cuantificación de la expresión de los distintos genes, relativa respecto al gen HPRT, se realizó por medio de retrotranscripción y PCR a tiempo real. En ensayos adicionales se ha medido la capacidad de los HDACi para modificar la producción de especies reactivas de oxígeno producidos por el PMA. RESULTADOS El PMA, activador de la proteín kinasa C (PKC) provocó un notable incremento de la expresión en todos los genes analizados. Ni el VPA, ni el NaPB activaron el efecto estimulador del PMA, sino que se comportaron como inhibidores. En ausencia de PMA ninguno de los agentes, modificó el grado de expresión basal de estos genes. El mismo patrón de expresión se observó en la línea celular JURKAT. Los HDACi no modificaron el efecto activador del PMA en la producción de especies reactivas de oxígeno. CONCLUSIONES Estos resultados sugieren que tanto VPA como NaPB están actuando por otros mecanismos diferentes a los de la descompactación de la cromatina. Entre las diferentes propiedades terapéuticas que poseen los HDACi , están descritas las neuroprotectoras y antiinflamatorias en el modelo animal de la EM, debido a que suprimen la expresión de citoquinas proinflamatorias entre otras proteínas responsables de la respuesta inmunológica. El mecanismo por el cual los HDACi inhiben la expresión de genes inducible por PMA no debe de ser de tipo competitivo, ya que no modifican la activación que el PMA causa en la producción de radicales libres. Actualmente están siendo analizados y contrastados con células de pacientes de EM. Figura 1: Representación de la expresión génica relativa de diferentes genes asociados a EM (seleccionados de estudios de GWAS). La cuantificación ha sido realizada mediante RT-PCR a partir de mRNA de células mononucleares de controles sanos (n = 20) , cultivadas con PMA (forbol de miristato acetato) e inhibidores de desacetilasas de histonas: VPA (ácido valproico) y NaPB (fenilbutirato). LXIV Reunión Anual Sociedad Española de Neurología. 20-25 Noviembre de 2012. Barcelona