Proliferacion del epitelio en un modelo murino de asma Mailen Baeza Flores y Beatriz Ceballos González

INDICE: -Sistema Respiratorio -Asma -Proliferación (Ki-67) -Inmunohistoquímica    -Resultados de nuestra investigacion  -Conclusion

Que es el Sistema Respiratorio? Intercambio de Gases -Proporciona O2 -Elimina CO2 -Respiracion: involuntario y automatico Estructuras especificas del sistema respiratorio Sistema Respiratorio

Asma: -Enfermedad respiratoria crónica -Los bronquios se inflaman -Mayor produccion de Mucus  -Fibras musculares se contraen Causas:   -Alérgenos: Polen                         Acaros de Polvo                         Moho                         Caspa Animal Sintomas: -Dificultad respiratoria -Opresion toracica -Silibancias -Tos

Proliferación: ki-67 -Ki-67 marca nucleos positivos -Proliferacion: Incremento del numero celular 

Inmunohistoquímica: Antigeno: sustancia que provoca la produccion de anticuerpos Anticuerpo: proteina producida por el sistema inmunitario cuando detecta un antigeno -Técnica de tincion para detectar una proteina a traves de la utilizacion de anticuerpos. -Para desarrollar esta tecnica debemos poner anticuerpos externos al organismo (en este caso de raton) para reconocer los ki-67 de este.

Investigacion: Ratones :-Sanos (WT PBS) -Asmaticos (WT OVA)                   Hipótesis: el epitelio traqueal de los animales asmáticos presentará mayor proliferación de sus células que el epitelio de los animales sanos. Metodo: -Inmunohistoquímica                 -Conteo de núcleos de células epiteliales                  

Procedimiento 1.Obtencion muestra: 2.Inmunohistoquimica Tratamiento con ovoalbumina. Extracción de pulmón y conservación en formol para mantener estructura. Parafinación del pulmón. Corte con micrótomo (5 a 8 micrometros de grosor) 2.Inmunohistoquimica Desparafinacion de las muestras. Lavado con Tris HCl 1x (buffer) Microondas 10 minutos temperatura maxima- 6 minutos a 60ºc con buffer (recuperacion estructura) Incubacion con solucion Tris Hcl+ H2O2. Bloqueo. Aplicación anticuerpo primario. Aplicación anticuerpo secundario. Aplicación proteina. Tincion

Epitelio traqueal WT PBS Distal AA031 10x Celula positiva (AA58) Tráquea 10x PBS A2 Tráquea (AA031) Epitelio traqueal WT OVA Epitelio tráquea A006 3 40x Células positivas (tráquea AA031)

Resultados - Aumento en el grosor del epitelio traqueal de los WT OVA. -Diferencia mínima entre el numero de núleos de células de epitelio de WT OVA y WT PBS.

conclusión - El engrosamiento traqueal de los WT ova no se debe a la proliferación de las células epiteliales de este.