Material respiratorio superior

Los procesos infecciosos de las vías respiratorias superiores constituyen seguramente la causa más frecuente de consulta en la práctica clínica diaria y las enfermedades que más ausencia escolar y laboral producen. Se calcula que se producen al año algo más de tres episodios de resfriado común por habitante y año. Se ha comprobado que casi el 30% de las consultas médicas relacionadas con la infección respiratoria son debidas a resfriados y el 20% a faringitis

MICROBIOTA HABITUAL DE LAS VIAS RESPIRATORIAS ALTAS La microbiota habitual incluye distintos microorganismos entre los que destacan los estreptococos, estafilococos, micrococos, neisserias, Moraxella catarrhalis, corinebacterias, Haemophilus spp, Porphyromonas, Prevotella, Fusobacterium, Veillonela, Peptostreptococcus, Actinomyces, etc. Bacterias potencialmente patógenas como S. pneumoniae o Streptococcus pyogenes se encuentran en no pocas ocasiones colonizando a las personas sanas. Los bacilos gramnegativos también pueden a veces colonizar a individuos sanos, principalmente si estos han estado hospitalizados o han padecido alguna enfermedad respiratoria recientemente. Los senos paranasales y el oído medio normalmente son zonas estériles.

FARINGITIS Los signos y síntomas de la faringitis causada por virus o por bacterias son inespecíficos. Los hallazgos clínicos que suelen acompañar a la faringitis aguda causada por S. pyogenes son dolor de garganta, a menudo con aparición brusca. . Etiología. La faringitis infecciosa puede estar causada por diversos microorganismos

S. pyogenes es la bacteria más frecuente (responsable del 20-40% de los episodios de faringitis aguda en la edad pediátrica y del 2-26% de los casos en adultos). Otros estreptococos beta-hemolíticos, pertenecientes a los grupos C y G y con tamaño grande de colonia, también se han asociado con brotes de faringitis, pero se desconoce su importancia en los casos esporádicos. S. pyogenes es la única causa frecuente de faringitis que requiere tratamiento antibiótico específico, cuyos principales objetivos son: prevenir las complicaciones supurativas locales (principalmente absceso periamigdalar, linfadenitis cervical y mastoiditis) y las no supurativas (fiebre reumática aguda y glomerulonefritis).

RECOGIDA DE LA MUESTRA El cultivo del exudado faringoamigdalar es la técnica de referencia para realizar el diagnóstico etiológico. La muestra debe obtenerse tan pronto como sea posible tras la aparición de los síntomas y antes de instaurar la terapia antibiótica. La muestra se debe obtener con hisopos de Dacron o alginato cálcico; con la ayuda de un depresor se inmoviliza la lengua, y se realiza la toma del área amigdalar y faringe posterior, así como de cualquier zona inflamada o ulcerada. Es fundamental evitar rozar la torunda con la úvula, la mucosa bucal, los labios o con la lengua, tanto antes como después de la toma. La torunda se introducirá en un tubo con medio de transporte tipo Amies-Stuart. Incluso en las mejores circunstancias, el cultivo de las muestras de exudado faríngeo presenta sus limitaciones debido a la variabilidad en la obtención, la ausencia de métodos de laboratorio estandarizados, la existencia de portadores asintomáticos y el tiempo de diagnóstico.

PROCESAMIENTO DE LA MUESTRA Se debe inocular una placa de agar sangre (preferentemente de carnero al 5%) con la torunda. Hay que asegurarse de rotar la torunda de modo que toda su superficie quede en contacto sobre el primer cuadrante de inoculación en la placa. A continuación se extiende la muestra con un asa estéril por los tres cuadrantes restantes de la placa, con el fin de obtener colonias bien aisladas. Finalmente se harán varias incisiones en el medio con la misma asa de siembra, para favorecer la visualización de la beta- hemólisis que sugiere la presencia de S. pyogenes.  

Streptococcus spp Se los puede clasificar según el tipo de hemólisis que producen en el agar en:  (beta) Hemolíticos o lisis completa.  (alfa) Hemolíticos o lisis incompleta, dan un color verdoso.  (gamma) Hemolíticos o no hemolíticos.

SELECCIÓN DE MEDIOS Y CONDICIONES DE INCUBACIÓN La placa con el medio de agar-sangre se incuba en estufa con 5% de CO2 a 35ºC durante 24 h. En caso de negatividad se reincubará hasta 48 h.

CRITERIOS DE INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS Las colonias de S. pyogenes miden >0,5 mm de diámetro, son blancas o grises y algunas tienen apariencia mucosa. Los bordes son enteros, están rodeadas por una zona relativamente amplia de beta-hemólisis, que es mayor en zonas con baja tensión de oxígeno, y no producen catalasa. Las pruebas definitivas para la identificación de S. pyogenes una vez confirmadas las características ya descritas son: la presencia de cualquier halo de inhibición con un disco con 0,04 unidades de bacitracina, la detección de pirrolidonilarilamidasa (PYR) y la detección del antígeno A de Lancefield mediante la utilización de sistemas comercializados

Streptococcus pyogenes o estreptococo β-hemolítico Grupo A

Streptococcus pyogenes

Técnicas de detección de antígeno de estreptococo grupo A Técnicas de detección de antígeno de estreptococo grupo A. La principal desventaja del cultivo para el diagnóstico de la faringitis estreptocócica es el tiempo que se tarda en obtener resultados. En los años 80, y ante la necesidad de obtener resultados con mayor rapidez, se desarrollaron técnicas de detección de antígeno de S. pyogenes en muestras faríngeas tomadas con torunda. Estas técnicas presentan la ventaja de la disponiblidad del resultado en el mismo momento de la consulta. Se basan en la detección del carbohidrato de la pared celular de S. pyogenes, solubilizado tras su extracción ácida, mediante una reacción inmunológica. Los primeros sistemas comercializados utilizaban una técnica de aglutinación con látex. A continuación se desarrollaron técnicas de enzimoinmunoensayo con puntos de corte claramente definidos y que tienen mejores resultados en cuanto a la sensibilidad

ESTREPTOCOCOS Hichock y Lancefield (Entre 1924 y 1928): Clasificación serológica para cepas β hemolíticas: Polisacárido de pared. Se han designado serogrupos A hasta H y K hasta V. De importancia medica A, B , C, F Y G Es un antígeno de pared específico para cada grupo: Aminoazucar. Se clasifican en función de Ag de H de C superficiales.

HISOPADO NASOFARINGEO PARA LA BUSQUEDA DE SARM Staphylococcus aureus coloniza normalmente piel; sin embargo, es un importante patógeno humano causante de enfermedades hospitalarias y de la comunidad, debido a su distribución cada vez más amplia y frecuente. Causa habitualmente serias infecciones crónicas, las cuales pueden ser refractarias al tratamiento antimicrobiano. Las infecciones estafilocócicas muchas veces están asociadas a síndromes leves como foliculitis e intoxicaciones alimentarias, hasta otros de elevada mortalidad, como neumonía, endocarditis y síndrome de shock tóxico, etc

ESTAFILOCOCOS Producen pigmentos blanco al amarillo intenso

El principal nicho ecológico de S El principal nicho ecológico de S. aureus en humanos lo constituyen las fosas nasales anteriores, las cuales son fuentes potenciales de infección y un factor de riesgo elevado para subsiguientes infecciones invasivas. Se ha registrado que muchas de ellas ocurren en personas que están colonizadas con esta bacteria y ha sido demostrado que S. aureus, en algunas ocasiones, puede tener una estrategia eficaz para evadir la respuesta inmune del hospedador y de esta forma sobrevivir en los tejidos, eludiendo la acción antibiótica y estableciendo así la infección crónica.

El SAMR-C se caracteriza por la sensibilidad al resto de los antibióticos no beta-lactámicos ensayados. Estos aislamientos con frecuencia poseen factores de virulencia característicos y son genotípicamente diferentes de los obtenidos en los ambientes hospitalarios. Es interesante destacar que las bases de la resistencia a meticilina están proporcionadas por el gen mec A que codifica la PBP2a (proteína ligadora de penicilina), la cual confiere resistencia a todos los betalactámicos

Toma de muestra Inserte un hisopo seco en la nariz paralelamente al paladar hasta la altura de los cornetes nasales (3cm en el adulto y un poco menos en niños). Frote el área y retírelo suavemente con movimiento rotatorio y repítalo para la otra fosa nasal. Colocar el hisopo en un medio de transporte. Realizar examen en fresco, gram e inocular en un extremo de cada uno de los medios de cultivo con los hisopos impregnados con la muestra faríngea y colocar el hisopo en un medio de transporte. Esterilizar el filamento del ansa de siembra y dejarla enfriar. Con el ansa en posición ligeramente horizontal realizar las estrías Incubar las placas de agar sangre en la jarra de anaerobiosis y las demás en la estufa.