Cartografiado genético en bacterias Transformación (tema 24) Conjugación (tema 25) Transducción (tema 26) virus (tema 27)

Presentación del tema: "Cartografiado genético en bacterias Transformación (tema 24) Conjugación (tema 25) Transducción (tema 26) virus (tema 27)"— Transcripción de la presentación:

1 cartografiado genético en bacterias Transformación (tema 24) Conjugación (tema 25) Transducción (tema 26) virus (tema 27)

2 

3

4

5 Staphylococcus aureus Bacillus cereus Serratia marcescens Proteus mirabilis

6

7

8

9

10

11 Tema 24. Transformación

12 Griffith 1928 Avery, McLeod y McCarty (1944): determinan que el ’principio transformante’ es el DNA

13 mecanismo de transformación las bacterias pueden transferir genes mediante la transformación heteroduplex célula competente ¡dos sobrecruzamientos!

14

15 Electroporación

16

17 mapeo genético mediante transformación la frecuencia de cotransformación es inversamente proporcional a la distancia entre los genes

18 1.Sólo células transformantes (sólo ‘recombinantes’, no parentales) 2. Distancia en unidades de transformación: unidades de transformación = = transformantes sencillos / total de transformantes 3. Relación entre dos genes: transformación doble (no ligados) cotransformación (ligados) Genes ligados: en el mismo fragmento transformante (lineal), porque ¡siempre en el mismo cromosoma! mapas genéticos por transformación

19 Medios de cultivo trp his tyr colonias genotipos de crecen nº último genotipo - - - 11.940 +++ 11.940 + - - 15.600 +++ -++ 3.660 - + - 12.047 +++ +-+ 107 - - + 13.120 +++ ++- 1.180 + + - 16.392 +++ -++ +-+ --+ 685 + - + 17.198 +++ -++ ++- -+- 418 - + + 15.827 +++ +-+ ++- +-- 2.600 elaboración de un mapa genético mediante transformación Transformación: trp+ his+ tyr+ trp– his– tyr–

20 Medios de cultivo trp his tyr colonias genotipos de crecen nº último genotipo - - - 11.940 +++ 11.940 + - - 15.600 +++ -++ 3.660 - + - 12.047 +++ +-+ 107 - - + 13.120 +++ ++- 1.180 + + - 16.392 +++ -++ +-+ --+ 685 + - + 17.198 +++ -++ ++- -+- 418 - + + 15.827 +++ +-+ ++- +-- 2.600 genotipos número + + + 11.940 - + + 3.660 + - + 107 + + - 1.180 + - - 2.600 - + - 418 - - + 685 trp his tyr,34,13,40 unidades de transformación = = transformantes sencillos / total de transformantes marcadores (genes) se estudian dos a dos distancia trp-his = (+-) + (-+) (+-) + (-+) + (++) = 0,34 distancia his-tyr = 0,13distancia trp-tyr = 0,40 ojo: orden

21 Medios de cultivo trp his tyr colonias genotipos de crecen nº último genotipo - - - 11.940 +++ 11.940 + - - 15.600 +++ -++ 3.660 - + - 12.047 +++ +-+ 107 - - + 13.120 +++ ++- 1.180 + + - 16.392 +++ -++ +-+ --+ 685 + - + 17.198 +++ -++ ++- -+- 418 - + + 15.827 +++ +-+ ++- +-- 2.600 genotipos número + + + 11.940 - + + 3.660 + - + 107 + + - 1.180 + - - 2.600 - + - 418 - - + 685 transformantes frec. trp his tyr +,768 +,835 +,796 + +,637 + +,757 + +,585 distancia trp-his = (+-) + (-+) (+-) + (-+) + (++) = 0,34 distancia his-tyr = 0,13 distancia trp-tyr = 0,40 trp his tyr,34,13,40 Ligados o independientes frec. de cotransformación vs. transformación independiente

22 Medios de cultivo trp his tyr colonias genotipos de crecen nº último genotipo - - - 11.940 +++ 11.940 + - - 15.600 +++ -++ 3.660 - + - 12.047 +++ +-+ 107 - - + 13.120 +++ ++- 1.180 + + - 16.392 +++ -++ +-+ --+ 685 + - + 17.198 +++ -++ ++- -+- 418 - + + 15.827 +++ +-+ ++- +-- 2.600 genotipos número + + + 11.940 - + + 3.660 + - + 107 + + - 1.180 + - - 2.600 - + - 418 - - + 685 transformantes frec. trp his tyr +,768 +,835 +,796 + +,637 + +,757 + +,585 distancia trp-his = (+-) + (-+) (+-) + (-+) + (++) = 0,34 distancia his-tyr = 0,13 distancia trp-tyr = 0,40,768x,835=,641 ≈,637,768x,796=,611 >,585 lejanos,835x,796=,664 <,757 cercanos trp his tyr,34,13,40 independiente vs cotransformación

23 ingeniería genética

24 capítulo 8 problemas aprox. 1h de clase: 17 de abril de 2009 problemas: 1-6