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ESTRUCTURA, PROPIEDADES Y FUNCIÓN DE ÁCIDOS NUCLEICOS TRANSFERENCIA DE MATERIAL GENÉTICO I: CONJUGACIÓN.

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Presentación del tema: "ESTRUCTURA, PROPIEDADES Y FUNCIÓN DE ÁCIDOS NUCLEICOS TRANSFERENCIA DE MATERIAL GENÉTICO I: CONJUGACIÓN."— Transcripción de la presentación:

1 ESTRUCTURA, PROPIEDADES Y FUNCIÓN DE ÁCIDOS NUCLEICOS TRANSFERENCIA DE MATERIAL GENÉTICO I: CONJUGACIÓN

2 Composición de los ácidos nucleícos Purinas Pirimidinas AdeninaGuanina Citosina UraciloTimina

3 Polímeros lineales de nucleótidos. Nucleótidos cuyos grupo fosfato unen las posiciones 3 y 5 de residuos de azúcar consecutivos. Los fosfatos de estos polinucleótidos tienen carga negativa a pH fisiológico

4 DNA 22 to 26 Å ancho

5 Plásmidos Fragmentos de ADN extracromosómicos. Los plásmidos o vectores se replican y transcriben de manera independiente del AND cromosómico.

6 Algunas características de los plásmidos: Confieren resistencia a antibióticos. Confieren resistencia a metales. pBR322

7 Transformación Transducción Conjugación Mecanismos de transferencia horizontal de material genético:

8 Cambio heredable de una célula u organismo conseguido por DNA exógeno. Sólo algunas bacterias pueden ser transformadas, éstas reciben el nombre de competentes.

9 El virus bacteriófago se comporta como un vector intermediario entre dos bacterias.

10 Fusión temporal de dos organismos unicelulares para el intercambio sexual de material genético

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15 Factor F Elemento en plásmido que le confiere la capacidad de ser transferido de una bacteria que lo posee a una bacteria que carece de este factor por conjugación. Este factor es portado en el episoma* F * Episoma: elemento genético en bacteria que se puede replicar libre en el citoplasma o puede ser insertado y replicado en el cromosoma bacteriano. Un ejemplo de episoma es el plásmido

16 Tipos de plásmido de acuerdo al factor F Plásmidos conjugativos contienen tra-genes, los cuales ejecutan complejos procesos de conjugación, como la transferencia de plásmidos a otra bacteria. Plásmidos movilizables sólo pueden transferirse en presencia de un plásmido conjugativo.

17 Plasmido F

18 - Bacterias F + : si el factor F se encuentra libre en el citoplasma. - Bacterias Hfr : si el factor F se encuentra integrado en el cromosoma bacteriano. -Bacterias F - : carecen del factor F (células receptoras)

19 CONJUGACIÓN BACTERIANA

20 Apareamiento entre las bacterias: F + y F -

21 Células Hfr (high frequency recombination) Apareamiento entre las bacterias: Hfr y F -

22 Procedimiento experimental E. coli JM1452Str R (Receptora) + E. coli W3110/F´KmTn3 en LB (Donadora) Tubo con 1 mL LB, 0.5 mL de JM y 0.2 mL de W3 Incubación a 37°C por 1 hora sin agitación. Caja petri LB con 2% estreptomicina E. coli JM1452Str E. coli W3110/F´KmTn3 Mezcla Sembrado por estría Incubación por 24 horas a 37 °C, refrigerar a 4 °C Parchar 50 colonias aisladas en LB con 1) Estreptomicina y 2) Kanamicina Incubar 24 h a 37 °C Observar y analizar resultados Reportar % de colonias transconjugantes

23 Sembrado por estría

24 Actividades para la siguiente semana


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