Descargar la presentación
La descarga está en progreso. Por favor, espere
Publicada porEsmeralda Avila Modificado hace 10 años
2
Estado nativo (N) Compactación óptima Grupos polares en el exterior Mínima superficie expuesta Anisotropía y baja periodicidad Organización jerárquica de la estructura Flexibilidad óptima Conformación única y cooperativa Mínimo energético
3
Estado desplegado (U) Expansión máxima (5-10 veces el volumen de N) Máxima superficie expuesta al solvente No existen interacciones preferenciales entre residuos Infinitas conformaciones Estado ideal, modelo teórico que describe aproximadamente el comportamiento de muchas proteínas en condiciones fuertemente desnaturalizantes
4
Estados parcialmente plegados (I) Grupo heterogéneo de conformaciones no nativas Estructura residual secundaria, nativa o no nativa Sin estructura terciaria Tendencia a la agregación Existen como: Precursores cinéticos de N En trazas en equilibrio con N En ausencia de cofactores específicos Resultado de vías muertas del plegamiento
5
¿Qué relación existe entre N, I y U? En soluciones fisiológicas N es absolutamente mayoritario En presencia de urea o cloruro de guanidinio concentrados (agentes caotrópicos), N se desestabiliza y aparecen I y U Los agentes caotrópicos solubilizan las cadenas laterales haciendo más favorable la interacción con el agua
8
No se observará I en el equilibrio
9
Se observará N, I y U en equilibrio
12
Equilibrium unfolding of IFABP
16
Nishimura et al J. Mol. Biol. (2005) 351, 383–392 quenching Met-Trp en la proteína salvaje y no en las mutantes
23
Temperatura (grados centígrados) elipticidad (miligrados)
24
IA-2ec
26
Differential Scanning Calorimetry (DSC)
33
100-400 kcal/mol 0-200 kcal/mol 4-10 kcal/mol Los efectos entalpicos y entrópicos contribuyen con fuerza parecida. Además son marcadamente dependientes de la temperatura
34
¿Cuáles son las contribuciones entrópicas? La diferencia enorme entre el número de conformaciones permitidas a U y N El ordenamiento de las moléculas de agua sobre la superficie accesible S=R ln(w)
35
¿Cuáles son las contribuciones entálpicas? Interacciones de van der Waals Puentes de hidrógeno Puentes salinos
36
Átomos en una esfera de radio 5 A centrada en cada átomo (no se incluyen el átomo central ni los unidos covalentemente a él) ESBL
37
Salvo muy escasas excepciones no existen puentes de hidrógeno sin satisfacer en el interior proteico. Todos son intramoleculares. Son muy pocos los puentes salinos encontrados en el interior proteico. En general desestabilizan a la estructura nativa.
38
N U Entropía conformacional Entropía del solvente Entalpía Teoría clásica del efecto hidrofóbico
39
H T S lnT U N C p,u C p,n U N C p,u C p,n STHG Cp T H Cp T ST
40
G(28ºC)=4.8-0=4.8 kcal/mol G(80ºC)=160-168=-8 kcal/mol G(-20ºC)=-139-(-132)=-7 kcal/mol
42
N U Entropía conformacional Entropía del solvente Entalpía de solvatación Modelo actual Entalpía del solvente Entalpía intramolecular
43
Thanks Alberto Podjarny Ermacora
Presentaciones similares
© 2024 SlidePlayer.es Inc.
All rights reserved.