METODOS DE DETECCION DE LA BACTERIA Candidatus liberibacter Coordinación de Servicios Técnicos de Detección y Diagnostico Fitosanitario.

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1 METODOS DE DETECCION DE LA BACTERIA Candidatus liberibacter Coordinación de Servicios Técnicos de Detección y Diagnostico Fitosanitario

2 Microscopía electrónica Plantas Indicadoras. Técnica de Biología Molecular (PCR) Tipos de Diagnósticos

3 Agente asociado al organismo causal del HLB Microscopía electrónica descrita desde 1970. Observaron unos tubos en tejidos de Naranja.

4 Figura 3. Fotografias de Microscopio Electronico de la Bacteria Liberobacter (Bov é, 2006).. Microscopia Electrónica Forma variable (desde redonda a ovalada alargada a baciliforme). Visualizar las estructuras de las bacterias.

5 Tejido Sano e Infectado (Epifloresencia)

6 Detección de la Bacteria Candidatus liberibacter pv. Asiático por microscopio electrónico.

7 Detección de la Bacteria Candidatus liberibacter pv. Africano por microscopio electrónico.

8 Elliot W. Kitajima Candidatus Liberibacter americanus Experimentó se infecto artificialmente la especie Catharantus roseus. Se observan el floema

9 Figura 3. Fotografias de Microscopio Electronico de la Bacteria Liberobacter (Bov é, 2006).. Plantas Indicadoras Consiste en la inoculacion del patogeno y reproducir los síntomas. Se observan sintomas producidos en Catharantus roseus.

10 Figura 3. Fotografias de Microscopio Electronico de la Bacteria Liberobacter (Bov é, 2006).. Plantas Indicadoras Se observan síntomas Nicotiana tabacum inoculada Ca. L. asiático

11 Figura 3. Fotografias de Microscopio Electronico de la Bacteria Liberobacter (Bov é, 2006).. Técnica de Biología Molecular (PCR) PCR es una técnica relativamente sencilla por medio de la cual ADN o ADNc es amplificado miles o millones de veces en forma rápida y confiable. Fue inventada por Kary B. Mullis (trabajando en Cetus Corporation Emeryville, California, USA) en 1983. Diez años después (1993), Mullis recibió el premio Nobel en Química por inventar dicha técnica Kary B. MullisKary B. Mullis

12 Figura 3. Fotografias de Microscopio Electronico de la Bacteria Liberobacter (Bov é, 2006).. Técnica de Biología Molecular (PCR) En el transcurso de los años, la automatización de la temperatura (Termocicladores) y el uso Polimerasas de ADN termoestables (Taq DNA Polymerasa aislada de Thermus aquaticus) han grandemente simplificado la técnica. En el transcurso de los años, la automatización de la temperatura (Termocicladores) y el uso Polimerasas de ADN termoestables (Taq DNA Polymerasa aislada de Thermus aquaticus) han grandemente simplificado la técnica.han grandemente simplificado la técnica.han grandemente simplificado la técnica. Una reacción típica de amplificación mediante PCR contiene la muestra de ADN, la polimerasa de ADN, un par de “primers”, deoxinucleótidos trifosfatos (dNTP’s), tampón, magnesio y otros aditivos. Una reacción típica de amplificación mediante PCR contiene la muestra de ADN, la polimerasa de ADN, un par de “primers”, deoxinucleótidos trifosfatos (dNTP’s), tampón, magnesio y otros aditivos. Teóricamente, en cada ciclo se dobla la cantidad de ADN amplificado en la reacción. 10 ciclos ≈ 1024 copias; 20 ciclos ≈ 1 x 106 copias Teóricamente, en cada ciclo se dobla la cantidad de ADN amplificado en la reacción. 10 ciclos ≈ 1024 copias; 20 ciclos ≈ 1 x 106 copias

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14 Técnica de Biología Molecular (PCR)

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16 El que Corrige sus Propios Errores no Tiene Tiempo de Juzgar los Ajenos Gratit ud Apoyo Ayuda + Amistad = GraciasGracias

17 La Compañía Cetus premio a Kary B. Mullis con un bono de $10,000 por su invención, sin embargo durante una reorganización corporativa, vendió la patente de PCR a la compañía farmacéutica Hoffmann-La Roche por $300 millones!!!!!!!!!!!!!!!Kary B. Mullis Atrás Kary B. Mullis http://www.selectscience.net/images/mailshots/alpha/pcr.jpg http://www.karymullis.com/

18 Reacción de la Polimerasa en Cadena (PCR) – Los Primeros Años. Atrás Reacción de la Polimerasa en Cadena (PCR) – Años Recientes. Técnica de Biología Molecular (PCR)

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