Feresin, Valentina - Testa, Sabrina

Presentación del tema: "Feresin, Valentina - Testa, Sabrina"— Transcripción de la presentación:

1 Feresin, Valentina - Testa, Sabrina
ESTANDARIZACIÓN DE LA TÉCNICA DE AGLUTINACIÓN DIRECTA PARA EL INMUNODIAGNÓSTICO DE LA ENFERMEDAD DE CHAGAS Feresin, Valentina - Testa, Sabrina

2 Diagnóstico de la Enfermedad de Chagas en la fase CRÓNICA se basa en la detección de Anticuerpos específicos contra T. cruzi

3 La Confirmación es imprescindible porque el diagnóstico puede presentar reacciones cruzadas, principalmente con: * Leishmania spp. * T. rangeli * Plasmodium spp. *Toxoplasma gondii

4 La OMS recomienda el uso de 3 técnicas inmunológicas basadas en diferentes principios, de los cuales 2 deben ser POSITIVAS. * Hemaglutinación Indirecta (HAI) * Inmufluorescencia Indirecta (IFI) * ELISA

5 La Técnica de Aglutinación Directa presenta como ventajas:
La Técnica de Aglutinación Directa presenta como ventajas: * Sencilla y económica * No requiere de equipos especializados. * Buena Sensibilidad y Especificidad * Detecta Ac dirigidos contra Ag de superficie * Rápidos resultados positivos

6 Estudio de la Estandarización de la Técnica de Aglutinación Directa
Evaluación de DOS protocolos modificados Resultados Comparados con HAI ELISA IFI Midiendo la Concordancia y la Determinación de los índices diagnósticos

7 Materiales y Métodos Muestras Biológicas
Controles (+) : 35 sueros, individuos con enfermedad de Chagas Controles (-): 35 sueros , individuos Sanos Controles Heterólogos : 46 Sueros, individuos con otras parasitosis

8 Trypanosoma cruzi Cultivo: epimastigotes de T. cruzi
Preparación : con tratamiento Enzimático SIN tratamiento Enzimático Concentración Óptima: 50, 100, 250 y 500 x 106 parásitos /ml Coloración: Citrato de Sodio + Azul brillante de comassie Diluciones: 1/25, 1/50, y 1/100

9 Resultados: [C]de 500 x 106 parásitos/ml Adecuada Aglutinación
Tratamiento de los parásitos: Trat. Enzimático y Sin Comportamiento Idéntico Coloración Parásitos coloreados visualizacion de aglutinación Diluciones de Suero Apropiadas Punto de Corte Dilución 1/50 Periodo de Incubación horas

10 SUERO POSITIVO SUERO NEGATIVO

11 Indices Diágnosticos

12 Concordancia de la técnica de aglutinación directa con las pruebas de referencias

13 Conclusión - Tiene Potencial para uso como prueba de rutina. - Puede emplearse en áreas rurales y urbanas donde NO se cuente con : *Infraestructura adecuada *Equipos requeridos