TEMA: EL PERFIL GENÓMICO DIRIGIDO REVELA MUTACIONES KRAS RECURRENTES Y GANANCIA DEL CROMOSOMA 1Q EN LOS CARCINOMAS MESONÉFRICOS DEL TRACTO GENITAL FEMENINO.

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1 TEMA: EL PERFIL GENÓMICO DIRIGIDO REVELA MUTACIONES KRAS RECURRENTES Y GANANCIA DEL CROMOSOMA 1Q EN LOS CARCINOMAS MESONÉFRICOS DEL TRACTO GENITAL FEMENINO. UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL. FACULTAD DE CIENCIAS MÉDICAS. CARRERA: MEDICINA. MATERIA: GENÉTICA. DOCENTE: DR. ANGEL OSWALDO ORTIZ ARAUZ. INTEGRANTES: PIERINA DOMÉNICA GARCÍA VINCES GRUPO 3 YAIRY YULISSA SÁNCHEZ SEMISTERRA GRUPO 4 DAYANA LILIBETH YÉPEZ ANCHUNDIA GRUPO 4 RODNEY JOSÉ CAGUANA EUGENIO GRUPO 4

2 ¿QUÉ HICIERON? PIERINA DOMÉNICA GARCÍA VINCES GRUPO 3

3 CARCINOMA MESONÉFRICO El carcinoma mesonefrico es un tumor maligno raro del tracto genital femenino que se presenta con mayor frecuencia en el cérvix uterino, representando el 1% de todos los carcinomas cervicales. 1–3 carcinomas mesonefrico primario crecen en el cuerpo uterino y la vagina. En el 60 a 70% de los casos, se suele acompañarse de anomalías como sangrado vaginal.

4 En general, estos tumores son frecuentes en la forma de un exofítico, nodular o polipoide Masa friable generalmente en la pared lateral del cuello uterino o involucrando la pared cervical circunferencialmente. También pueden agrandar la pared cervical sin una masa discernible, o incluso puede ser tremendamente nada destacable. CARCINOMA MESONÉFRICO

5 Histológicamente, los carcinomas mesonefrico se caracterizan por una variedad de patrones arquitectónicos tales como tubular, ductal, retiforme, sólido, células fusiformes endometrioide, sólido, papilar, retiforme, pequeños túbulos, cribiforme y glomeruloide Una mezcla de patrones es muy frecuente que este presente en el mismo tumor. Debido a la amplia gama de aspectos, el diagnóstico diferencial de el carcinoma mesonefrico puede ser amplio e incluir: -Hiperplasia mesonéfrica benigna -Adenocarcinoma endometrioide -Carcinoma de células claras -Carcinosarcoma -Carcinoma seroso La mezcla de diferentes patrones morfológicos pueden ser una pista para el diagnóstico del carcinoma mesonefrico.

6 Derivan de los remanentes de los conductos mesonefrico Del mismo modo, se cree que los remanentes de los conductos mesonefrico dan lugar al tumor anexial de probable origen Wolffiano, que es de comportamiento benigno. La explicación para el origen de este carcinoma es que en los machos, los conductos mesonefrico dan a los conductos eferentes del testículo, el epidídimo, las vesículas seminales y la conductos eyaculadores. En las hembras, los conductos mesonefrico se someten a regresión debido a la falta de testosterona; sin embargo, los restos mesonefrico puede persistir en los ligamentos anchos, la pared lateral de la útero (especialmente en el cuello uterino) y la vagina. CARCINOMA MESONÉFRICO Estas neoplasias, que son excesivamente raras, ocurren principalmente en la región para-ovárica pero también ocasionalmente dentro del ovario y se presume ser de origen mesonefrico (Wolffiano) por su localización y disimilitud morfológica. La patogenia y los eventos moleculares en el carcinoma mesonefrico como del tumor anexial de probable origen Wolffiano no se conocen.

7 OBJETIVO El propósito de este estudio fue caracterizar las mutaciones del carcinoma mesonefrico utilizando un ensayo de secuenciación de próxima generación (NGS) dirigido a identificar mutaciones del conductor, mutaciones terapéuticamente dirigibles. Este estudio consistió en 19 tumores de 17 pacientes: 18carcinomas mesonefrico (15 tumores primarios y tres tumores metastásicos) y 1 tumor anexial femenino de probable origen Wolffiano. Todo esto siguiendo la aprobación de la Revisión Institucional del área de patología Women's Hospital en Boston, en EE. UU.

8 ¿CÓMO LO HICIMOS ? DAYANA LILIBETH YÉPEZ ANCHUNDIA

9 En los archivos de patología de BWH se buscaron casos de carcinoma mesonéfrico. Todos los casos de carcinoma mesonéfrico con el material incorporado en parafina fijada con formalina y los diagnósticos confirmados histológicamente se incluyeron en el estudio y seis carcinomas mesonéfricos adicionales y un tumor anexial femenino de probable origen wolffiano fueron en total, 19. ¿Cómo lo hicimos?

10 Este estudio consistió en 19 tumores de 17 pacientes: 18 carcinomas mesonéfricos (15 tumores primarios y tres tumores metastásicos) y 1 tumor anexial femenino de probable origen wolffiano Se aisló ADN genómico y se realizó una secuenciación de próxima generación dirigida para:  Detectar mutaciones  Variación en número de copias y  Variantes estructurales mediante el estudio de regiones exónicas completas de 300 genes de cáncer y 113 regiones intronicas seleccionadas a través de 35 genes

11 Fluorescence In Situ Hybridization El FISH se realizó en cortes de parafina fijados con formalina y con un espesor de 4 μm de casos con material suficiente, de acuerdo con los protocolos estándar Específicamente, la ganancia del brazo largo del cromosoma 1 (1q) se evaluó utilizando el Vysis LSI1p36 yLSI1q25 Dual Color Probe Set 1 (Abbott Molecular, Des Plaines, IL) a 1p36 y 1q25, respectivamente, tanto en el tumor como en el tejido no neoplásico (el tejido no neoplásico sirvió como control positivo interno). Las sondas y los núcleos fueron esnaturalizados simultáneamente, seguido de hibridación y lavado, de acuerdo con las instrucciones del fabricante.La relación de señales de hibridación para 1p36 y 1q25.Se calculó sobre 50 núcleos para cada caso. ¿Cómo lo hicimos?

12 ¿QUÉ OBTUVIMOS? YAIRY SÁNCHEZ SEMISTERRA

13 El carcinoma mesonéfrico es un tumor ginecológico maligno derivado de restos mesonéfricos. En los varones: los conductos mesonéfricos dan lugar a los conductos eferentes del testículo, el epidídimo, los vasos deferentes, las vesículas seminales y los conductos eyaculatorios. En las mujeres, los conductos mesonéfricos experimentan regresión; Nuestro estudio incluyó 19 tumores de: -17 pacientes 16 carcinomas mesonéfricos. 1 tumor anexial femenino de probable origen wolffiano ¿Qué obtuvimos? Características clínico- patológicas de la cohorte. Sin embargo, los restos mesonéfricos pueden persistir en los ligamentos anchos, la pared lateral del útero (especialmente en el cuello uterino) y la vagina. Se presume que estos remanentes son el origen del carcinoma mesonéfrico.

14 DIAGNÓSTICO DIFERENCIAL DEL CARCINOMA MESONÉFRICO Debido a la amplia gama de aspectos morfológicos del carcinoma mesonéfrico, a menudo con una mezcla de elementos: tubulares, ductales, retiformes, sólidos, de células fusiformes y similares a cuerdas sexuales. El diagnóstico diferencial puede ser amplio e incluye: -Hiperplasia mesonéfica florida. -Adenocarcinoma endometrioide -Adenocarcinoma endocervical. -Carcinoma de células claras. -Carcinosarcoma. -Carcinoma seroso. -entre otras neoplasias. La mezcla de diferentes patrones morfológicos puede ser una pista para el diagnóstico de carcinoma mesonéfrico. Adenocarcinoma endometrioide Adenocarcinoma endocervical. Carcinoma de células claras. Carcinosarcoma.

15 ¿Qué se encontró? En este estudio, evaluamos 18 carcinomas mesonéfricos: -16 pacientes. - 1 tumor anexial femenino de probable origen wolffiano. Nuestro estudio encontró: El carcinoma mesonéfrico se caracteriza por un número limitado de aberraciones moleculares que pueden ser útiles para el diagnóstico y terapéuticamente importantes.

16 MUTACIONES Las mutaciones comunes en el carcinoma mesonéfrico son significativamente diferentes de las reportadas en otros adenocarcinomas cervicales y endometriales. Las mutaciones KRAS / NRAS son la aberración molecular más común detectada en el carcinoma mesonéfrico (81%); en contraste, estas mutaciones son menos comunes en otros adenocarcinomas cervicales y endometriales (menos del 30%) Los genes de remodelación de cromatina ARID1A, ARID1B y SM ARCA4 frecuentemente se mutan en el carcinoma mesonéfrico (31, 19, 12%, respectivamente; 62% en general) En los adenocarcinomas de endometrio, la frecuencia de las mutaciones de ARID1A es comparable con la del carcinoma mesonéfrico.

17 Los genes están mutados en 12% y 8% de los adenocarcinomas endometriales, respectivamente. Los carcinomas mesonéfricos también suelen albergar mutaciones BCOR / BCORL1 (19% y 12%, respectivamente MUTACIONES MUTACIONES. Algunos de los genes más comúnmente mutados en los adenocarcinomas endometriales y / o cervicales incluyen PIK3CA. (24–57% y 16–25%, respectivamente) Por lo tanto, la falta de mutaciones de PIK3CA, PTEN y TP53, en combinación con la mutación KRAS o NRAS, apoyaría el diagnóstico de carcinoma mesonéfrico sobre otro tipo morfológico de adenocarcinoma endometrial o endocervical.

18 RESULTADOS  La variación más común en el número de copias fue la ganancia de 1q.  Estaba presente en el 75% de los casos de carcinoma mesonéfrico.  Estuvo acompañada por la pérdida de 1p en siete casos. Los cambios en el número de copias en el carcinoma mesonéfrico se produjeron: - A nivel cromosómico -Brazo. Sin cambios distintivos en el número de copias a nivel genético. En el carcinoma mesonéfrico: La ganancia del cromosoma 1q puede ser un indicador de comportamiento agresivo, ya que todos los tumores con esta alteración fueron de pacientes con metástasis confirmada.

19 Ninguna de las alteraciones recurrentes encontradas en los carcinomas mesonéfricos en nuestro estudio se identificó en el caso único de tumor anexial femenino de probable origen wolffiano. La relación entre el carcinoma mesonéfrico y el tumor anexial femenino de probable origen wolffiano sigue sin dilucidarse. Relación entre el Carcinoma mesonéfrico y el tumor anexial femenino. No se pueden extraer conclusiones firmes dado que solo había un tumor anexial femenino de origen Wolffiano disponible para nuestro estudio.

20 En resumen, hemos demostrado que el carcinoma mesonéfrico se caracteriza por aberraciones moleculares que son significativamente diferentes de las que se encuentran en otros subtipos de carcinomas cervicales y endometriales. Las mutaciones KRAS / NRAS son comunes (81%) en el carcinoma mesonéfrico. Los carcinomas mesonéfricos también se caracterizan por una ganancia de 1q y mutaciones frecuentes en los genes de remodelación de la cromatina. Las mutaciones de TP53 son poco comunes y PIK3CA y PTEN. Las mutaciones no fueron identificadas. Nuestro estudio sugiere que los inhibidores dirigidos de la vía RAS / MAPK pueden ser útiles en el tratamiento del carcinoma mesonéfrico y se justifican estudios futuros para determinar su eficacia.

21 CONCLUSIONES CAGUANA EUGENIO RODNEY JOSÉ

22 Todos los casos de pacientes con metástasis confirmadas contenían al menos áreas focales de morfología con huso / sólido (desde 5 hasta 30%). La hiperplasia mesonéfica asociada se confirmó en 9/16 (56%) carcinoma mesonéfrico. Nuestro estudio encontró que el carcinoma mesonéfrico se caracteriza por un número limitado de aberraciones moleculares que pueden ser útiles para el diagnóstico y terapéuticamente importantes. las mutaciones KRAS / NRAS son la aberración molecular más común detectada en el carcinoma mesonéfrico (81%); en contraste, estas mutaciones son menos comunes en otros adenocarcinomas cervicales y endometriales (menos del 30%), 32–34 particularmente en los adenocarcinomas endometrioides estables microsatélite y los carcinomas endometriales serosos. CONCLUSIONES CONCLUSIONES.

23 En resumen, hemos demostrado que el carcinoma mesonéfrico se caracteriza por aberraciones moleculares que son significativamente diferentes de las que se encuentran en otros subtipos de carcinomas cervicales y endometriales. Las mutaciones KRAS / NRAS son comunes (81%) en el carcinoma mesonéfrico. Los carcinomas mesonéfricos también se caracterizan por la ganancia de 1q y las frecuentes mutaciones en los genes de remodelación de la cromatina, mientras que las mutaciones de TP53 son poco frecuentes y las mutaciones de PIK3CA y PTEN no se identificaron CONCLUSIONES

24 La ganancia del cromosoma 10 y / o 12 puede ser un indicador de Comportamiento agresivo en el carcinoma mesonéfrico Nuestro estudio sugiere que los inhibidores dirigidos de la vía RAS / MAPK pueden ser útiles en el tratamiento del carcinoma mesonéfrico y se justifican estudios futuros para determinar su eficacia. CONCLUSIONES