DESEMPEÑO CROMATOGRÁFICO

Presentación del tema: "DESEMPEÑO CROMATOGRÁFICO"— Transcripción de la presentación:

1 DESEMPEÑO CROMATOGRÁFICO
Licda. Carol Villatoro de Santisteban Análisis Instrumental Departamento de Fisicoquímica Escuela de Química USAC

2 PROCESO DE SEPARACIÓN Sistema Ingreso de muestra Flujo Interacciones
Fenómenos Desempeño

3 Fenómenos y desempeño Dilución Velocidades diferenciales
Ensanchamiento de banda Velocidades diferenciales Coeficiente de distribución Tiempo de retención Factor de retención (o de capacidad) Factor de selectividad Eficacia Resolución

4 Coeficiente de distribución

5 Tiempo de retención

6 Velocidad de migración

7 Velocidad de migración

8 Experimentalmente

9 Velocidad de migración
Factor de retención o de capacidad: Describe velocidades de migración de los solutos en las columnas Ideal entre 2 y 10 Factor de selectividad Resolución

10 Velocidades de migración relativas
B más fuertemente retenida que A  α > 1 siempre

11 Experimentalmente B B

12 Velocidad de migración
Factor de retención o de capacidad: Describe velocidades de migración de los solutos en las columnas Ideal entre 2 y 10 Factor de selectividad: Comparación de velocidades de migración entre dos solutos Resolución

13 Resolución

14 Resolución

15 Velocidad de migración
Factor de retención o de capacidad: Describe velocidades de migración de los solutos en las columnas Ideal entre 2 y 10 Factor de selectividad: Comparación de velocidades de migración entre dos solutos Resolución Medida de la capacidad para separar dos analitos

16 Eficacia Teoría de platos Teoría cinética Equilibrio
Parámetros de eficacia Teoría cinética Movimiento al azar Explicación más completa

17 Eficacia

18 Experimentalmente

19 Ensanchamiento de banda
Movimiento aleatorio Cada molécula hace “recorrido” ligeramente distinto Tiempo de retención es un promedio Ensanchamiento es el incremento del rango de tiempos individuales de las moléculas Se evalúa por medio de H Varios factores influyen

20 Fenómenos que contribuyen al ensanchamiento de banda
Caminos múltiples de flujo Difusión longitudinal Transferencia de masa entre fases

21 Ensanchamiento de banda

22 Ecuación de van deemter

23 ANÁLISIS CROMATOGRÁFICO
Análisis cualitativo Análisis cuantitativo Optimización “El problema general de la elución”

24 RESOLUCIÓN Eficacia en cromatografía: capacidad para resolver mezclas = capacidad para separar analitos  Resolución “Medida cuantitativa de la capacidad para separar dos analitos”

25 FACTORES QUE AFECTAN

26 FACTORES QUE AFECTAN Número de platos /altura de plato Selectividad
Largo columna Ensanchamiento de banda Selectividad Retención

27 Tiempo

28 Variación de N Aumentar largo de columna Disminuir altura de plato
Disminuir tamaño de partícula (HPLC) Disminuir viscosidad de FM en c. líquida

29 Variación de k’ Aumentar T en c. de gases
Variar FM en c. de líquidos (relación solventes)

30 Variación de alfa Variar FM en c. de líquidos (identidad solventes)
Variar T (intercambio iónico) Variar FS Opciones específicas

31 El problema general de la elución

32 Análisis cualitativo Tiempo de retención Comparación con estándar
Necesidad de separación previo a análisis Confirmación de ausencia ¿Evidencia de presencia? Técnicas combinadas: detectores cualitativos

33 Análisis cuantitativo
Señal proporcional a concentración Comparación con estándares Altura de pico o área de pico Varios métodos

34 Métodos de cuantificación
Curva de calibración Patrón interno Normalización de áreas

35 fin Muchas Gracias por su atención