Eva del Valle, Pedro Zuazua-Villar, Pedro Casado, Sofía Ramos UNIVERSIDAD DE OVIEDO Departamento de Bioquímica y Biología Molecular Efectos de la Melatonina en la Expresión Génica de Células de Cáncer de Mama Eva del Valle, Pedro Zuazua-Villar, Pedro Casado, Sofía Ramos

Melatonina Hormona indólica natural Secreción circadiana Efectos fisiológicos Aparato reproductor Sincronización de ritmos biológicos Sistema inmune Neutralización de radicales libres Efectos antitumorales

La Melatonina como Molécula Antiestrogénica Inhibe el crecimiento de células MCF-7 (Cos y Sánchez-Barceló, 1993) Bloquea el efecto mitogénico del estradiol (Rato y Cols., 1999) Disminuye la unión del RE, estimulada por estradiol, al ERE (Rato y Cols., 1999) Inhibe específicamente al REa, a través de la calmodulina (del Río y Cols., 2004)

Regulación por Calmodulina de los Receptores de Estrógenos en el Desarrollo del Cáncer de Mama Determinar la expresión diferencial de genes implicados en el desarrollo tumoral en células MCF-7 Determinar la expresión diferencial de genes implicados en el desarrollo tumoral en células con mutaciones en el sitio de unión a calmodulina

Metodología Efecto de la melatonina sobre genes de expresión temprana en células MCF-7: Tratamientos de 1 hora con melatonina 10-9M y vehículo hormonal GEArray Q Series Human Breast Cancer and Estrogen Receptor Signalling Gene Array

GEArray Q Series Genes directamente asociados con cáncer de mama Genes asociados con la vía de señalización de estrógenos Genes asociados con el pronóstico del cáncer de mama Genes asociados con respuesta a quimioterapia

GEArray RNA total Retrotranscripción, amplificación y marcaje con 32P dCTP Prehibridación Desnaturalización de la sonda HIBRIDACIÓN

Análisis de los Resultados Control Melatonina 10-9M Scion Image

p < 0,5 p < 0,05

SOBRE-EXPRESIÓN POR MELATONINA GEN NOMBRE CARACTERÍSTICAS GSN Gelsolin (amyloidosis, Finnish type)  Regulación del crecimiento y apoptosis Posible supresor tumoral IL6ST Interleukin 6 signal transducer (gp130,oncostatin M receptor) Funciones variadas Buen pronóstico KIT v-kit Hardy-Zuckerman 4 feline sarcoma viral oncogene homolog (C-kit) C-kit se expresa en adenocarcinomas mamarios no invasivos

REPRESIÓN POR MELATONINA GEN NOMBRE CARACTERÍSTICAS ERBB2 v-erb-b2 erythroblastic leukemia viral oncogene homolog 2, neuro/glioblastoma derived oncogene homolog (avian)  Sobre-expresado en varios tipos de tumores mamarios Mal pronóstico HMGB1 High-mobility group box 1 Antiapoptótico HSP28 Heat shock 27kDa protein 1 Inhibidor de la apoptosis MKI67 Antigen identified by monoclonal antibody Ki-67  Marcador de proliferación

Estos resultados parecen indicar que el tratamiento con melatonina en concentración 10-9M durante 1 hora disminuye la expresión de algunos genes relacionados con invasividad y aumenta la expresión de otros genes asociados con buen pronóstico en cáncer de mama

Financiado por: ISCIII PI 04/2664 Sofía Ramos Pedro “The Nightmare Master” Casado Pedro Zuazua-Villar Eva del Valle Financiado por: ISCIII PI 04/2664