VIROLOGÍA 2012 Teórico 16 Enterovirus

Relaciones filogenéticas entre cepas prototipo del género enterovirus, basadas en la región codificante de P1 (proteínas de cápside) La clasificación serológica original correlacionaba la respuesta inmune que generaban ciertas cepas con la protección cruzada, características de la enfermedad, etc. Pero dejó de emplearse por las inconsistencias entre las relaciones antigénicas de nuevos aislamientos. El sistema actual de clasificación se basa en la comparación de la organización genómica y la similitud de secuencias, y también considera propiedades biológicas. El árbol filogenético esta basado en proteínas de cápside. Pero sin embargo la recombinación es un evento muy frecuente entre distintos grupos de virus, lo que tiende a generar una población de variantes interrelacionadas y difícilmente clasificables de manera separada.

Estructura NO estructural Virus pequeño (30 nm) desnudo Simetría icosaédrica Resistentes a bajos pH y a solventes orgánicos RdRp NO estructural RNAss polaridad positiva Proteín VPg unida covalentemente al genoma

Ciclo de multiplicación

Adsorción

Penetración y desnudamiento

Traducción dependiente del Sitio interno de entrada al ribosoma: 5´Cap El genoma del virus pierde la proteína VPg luego de liberarse en el citoplasma. No tiene Cap 5´. Sin embargo tiene una secuencia de nucleotidos que le otorgan una estructura altamente organizada: IRES. Este permite el reconocimiento y unión de la subunidad pequeña del ribosoma., para iniciar la traducción. Entre distintos tipos IREs hay poca conservación de secuencia. Debe mantenerse la estructura. Traducción dependiente del Sitio interno de entrada al ribosoma: IRES

Regulación de la traducción celular

Traducción y procesamiento de proteínas

Síntesis de RNA RdRp viral ARN viral (poliovirus) Proteínas celulares Asociada a membrana RdRp viral ARN viral (poliovirus) Proteínas celulares Proteínas virales VPg actua como primer

Síntesis de RNA RdRp viral ARN viral (poliovirus) Primer dependiente VPg pUpU ARN viral (poliovirus)

Sitio de entrada, replicación y diseminación

Rta inmune innata Rta inmune adquirida celular citotoxica Mucosa orofaríngea/intestinal Rta inmune adquirida celular citotoxica Agmídalas/Placas de Peyer Nodulos linfáticos cervicales Nodulos linfáticos mesentéricos Viremia Rta inmune adquirida humoral AC SRE Rta inmune innata SNC

Infecciones por poliovirus Infección asintomática (90%). Poliomielitis abortiva (5%). Poliomielitis no paralítica (3-4%). Poliomielitis paralítica (1-2%): Poliomielitis espinal. Poliomielitis bulbar.

Diabetes Conjuntivitis hemorrágica

: Enterovirus

DIAGNOSTICO Recolección y conservación de las muestras RECOLECCION LCR Tubo estéril Materia Fecal Frasco limpio Hisopados Rectal, faríngeo. Tubo c/medio de transporte viral Biopsias, Necropsias Líquido Pericárdico

Diagnostico por cultivo

BEV-specific duplication Diagnostico molecular BEV-specific duplication Hypervariable region ► ◄ VP 4 VP2 VP3 VP1 2A 2B 2C 3A 3B 3C 3D 3'NTR 5'NTR capsid An PCR1 PCR2 Semi-nested PCR

SECUENCIACION GENOMICA Identificación de los enterovirus CULTIVO RT-PCR ENTEROVIRUS LCR TIPO VIRAL NEUTRALIZACION CON POOL LBM SECUENCIACION GENOMICA PARCIAL DE VP1

Serología FIJACION DE COMPLEMENTO TEST DE NEUTRALIZACION Respuesta tipo-específica Se mantienen de por vida FIJACION DE COMPLEMENTO Respuesta de Grupo Baja sensibilidad Desaparecen en 1-2 años. DETECCION DE IGM ENTEROVIRAL Poco sensible Puede persistir por muchos meses después de una infección enteroviral y puede detectarse en individuos sanos asintomáticos La presencia de IgM enteroviral no puede siempre establecer la causalidad de la enfermedad en cuestión

Vacunas atenuada e inactivada IPV

Comparación de los tipos de respuesta inmune inducida por virus replicativos vs inactivados Killed polio vaccine (Salk) Live polio vaccine (Sabin) Days Vaccination Reciprocal virus antibody titer 512 128 32 8 2 1 Serum IgG Serum IgM Nasal and duodenal IgA Nasal IgA Serum IgA Duodenal IgA 48 96

Vacuna atenuada: Ej. Polio 3 - Sabin Investigación de las bases genéticas de su atenuación

(LOCALIZACIÓN/POSICIÓN NUCL Vacuna atenuada: Ej. Polio 1, 2 y 3 - Sabin Bases genéticas de su atenuación VIRUS MUTACIÓN (LOCALIZACIÓN/POSICIÓN NUCL EOTÍDICA) P1 Sabin 5´UTR (480) VP1 (1106) VP1 (1134) VP3 (3225) VP4 (4065) P2 Sabin 5´UTR (481) VP1 (1143) P3 Sabin 5´UTR (472) VP3 (3091) Regiones no codificantes Regiones reguladoras Replicación Transcripción Traducción

(LOCALIZACIÓN/POSICIÓN NUCL Vacuna atenuada: Ej. Polio 1, 2 y 3 - Sabin Bases genéticas de su atenuación VIRUS MUTACIÓN (LOCALIZACIÓN/POSICIÓN NUCL EOTÍDICA) P1 Sabin 5´UTR (480) VP1 (1106) VP1 (1134) VP3 (3225) VP4 (4065) P2 Sabin 5´UTR (481) VP1 (1143) P3 Sabin 5´UTR (472) VP3 (3091) Regiones codificantes: Proteínas de cápside Otras proteínas?

Reducción de la incidencia de poliomielitis 1994 2003 1988 2000 Países libres de Polio salvaje Países endémicos Países No endémicos

Casos de Polio - 2011

Brote Polio en Isla Hispaniola

Vigilancia de Poliovirus Clasificación de poliovirus de acuerdo al porcentaje de similitud en VP1: 0.0-0.9% Poliovirus Sabin relacionado. 1.0-14.9%. Poliovirus Sabin derivado (VDPV). mayor a 15%. Poliovirus Salvaje. VDPVs se dividen en: − iVDPV: asociados a personas inmunodeficiencias primarias. − cVDPV: asociados a transmisión sostenida persona a persona y pueden causar brotes. aVDPVs: ambiguos, no se pueden definir como iVDPVs o cVDPVs. Recuperados del medio ambiente.

Tratamiento antiviral PLECONARYL

Bibliografía Fields Virology. David M. Knipe and Peter M. Howley. Fifth edition. Lippincott Williams and Wilkins. 2007. Principles of Virology. Molecular Biology, Pathogenesis, and Control of Animal Viruses. S.J.Flint, L.W.Enquist, V.R.Racaniello, A.M.Skalka. Third edition. ASM PRESS. Washington, D.C. 2009. Kew OM, Wright PF, Agol VI, Delpeyroux F, Shimizu H, Nathanson N, Pallansch MA. Circulating vaccine-derived polioviruses: current state of knowledge. Bull World Health Organ. 2004 Jan;82(1):16-23