Dr. José Luis Díaz De León Álvarez

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Transcripción de la presentación:

Curso-Taller: Marcadores Moleculares: Útiles Herramientas para la Botánica Dr. José Luis Díaz De León Álvarez Universidad Autónoma de Baja California Sur Lab. de Biotecnología Vegetal

OBJETIVO Revisar los conceptos básicos empleados en la Biología Molecular para crear marcadores moleculares, específicamente microsatélites, así como su aplicación en la botánica para discriminar entre genotipos, identificar o confirmar híbridos, o para producir patrones de identificación de variedades, utilizando el trigo harinero como modelo biológico

METAS Actualizar el conocimiento sobre las metodologías biotecnológicas para el mejoramiento de plantas. Actualizar el conocimiento sobre los conceptos: RFLPs, AFLPs, RAPDs, SSRs, SNPs y microsatélites en plantas Demostrar las metodologías para el aislamiento y purificación de ADN, amplificación de microsatélites, patrones de restricción y aplicación como herramienta para determinar identidad.

METAS Demostrar la actividad hidrolítica de las enzimas de restricción Demostrar la metodología de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) Demostrar la metodología para la resolución electroforética de productos amplificados por PCR.

HERRAMIENTAS CONFERENCIAS DEMOSTRACIONES MANUAL DEL CURSO-TALLER

ACTIVIDADES CONFERENCIAS: ADN: CONCEPTOS BÁSICOS LA BIOTECNOLOGÍA APLICADA AL MEJORAMIENTO DE PLANTAS TÉCNICAS MOLECULARES: UNA INTRODUCCIÓN MARCADORES MOLECULARES: MAAPS, AFLPs, STS, SNP y MICROARREGLOS. DISCUSIÓN GENERAL

ACTIVIDADES DEMOSTRACIONES AISLAMIENTO DE ADN DE GRANOS DE TRIGO HARINERO AMPLIFICACIÓN DE MICROSATÉLITES POR PCR PATRONES DE RESTRICCIÓN DE LAS ENZIMAS EcoRI, HindIII, PstI Y MseI Patrón de identidad de ADN (DNA fingerprinting) Patrón de restricción de Lamda ADN RESOLUCIÓN ELECTROFORÉTICA DE PRODUCTOS OBTENIDOS POR DIGESTIÓN CON ENZIMAS DE RESTRICCIÓN Y DE LOS MICROSATÉLITES AMPLIFICADOS EN GELES DE AGAROSA

Protocolos Manual del curso-taller Introducción........................................................................................ 6 Materiales.............................................................................................7 Protocolo para la extracción de ADN................................................8 Protocolo para la PCR.......................................................................11 Protocolo para patrones de restricción e identidad.......................13 Electroforesis.................................................................................... 15 Protocolos de Tinción de geles....................................................... 22 Bibliografía.........................................................................................25

PROGRAMA