Protocolo de identificación bacteriana Parte 1 : Preparación del sistema miniaturizado API
Materiales disponibles Tub de suero fisiológico estéril (5 mL) Agua destilada Aceite Placa de Petri Agar Sistema API Con caja y tapa Pipeta no estéril Pipetas estériles
1. Preparación de la suspensión Bacteriana
1.1. Con un asa de inoculación estéril, coge una colonia de la placa de Petri. Precaución! La muestra se hace en asepsia Alrededor del mechero de Bunsen.
1.2. Haz una suspensión con ésta colonia bacteriana en un tubo estéril de suero fisiológico (5mL). En el suero, restriega el asa de inoculación en la pared del tubo para dispersar todas las bacterias. Precaución! La muestra se hace en asepsia Alrededor del mechero de Bunsen.
S 1.3 Homogeniza tu tubo mediante rotaciones manuales y escribe « S » en éste tubo.
2. Preparación del sistema API
2.1. Rellena el fondo de la caja con agua destilada hasta cubrir todas las cavidades. 2.2. Haz movimientos rotatorios con la caja para distribuir el agua en todas las cavidades. Después, aspira el exceso de agua con una pipeta.
2.3. Con unas pinzas, sitúa el sistema API en la caja. 2.4. Cubre con la tapa y escribe tu «número de mesa» en la etiqueta de plástico de la caja.
2. Rellenar el sistema API
Introducción Cúpula Microtubos Ejemplos : Test no subrayado Test subrayado Test enmarcados
3.1. Abre la caja y usa la tapa como soporte para poner la caja en una posición inclinada.
3.2 Homogeniza tu suspensión con rotaciones manuales. Toma 2 mL de la suspensión « S » con una pipeta estéril. S Precaución! La muestra es realizada en asepsia Alrededor del mechero de Bunsen.
Para test enmarcado(example CIT),rellena el microtubo y la cúpula. 3.3 Rellena todos los tests con ésta suspensión respetando las siguientes reglas : Para test subrayados ó no (ejemplo : ONPG o ADH), rellena sólo el microtubo, Para test enmarcado(example CIT),rellena el microtubo y la cúpula. Cúpula microtubo
3.4 Con una pipeta estéril, añade aceite en las 5 cúpulas en los tests subrayados (ADH, LDC, ODC, H2S, URE). Cúpula
3.5 Cierra la caja e incúbala a 37°C durante 16 horas. Caja API en incubadora
4. Analiza tus resultados El segundo día, tras la incubación, Identifica tu bacteria (parte 2).