Huella genética del ADN Introducción e instruciones de trabajo sobre el proceso del experimento 1 Huella Genética

Contenido 1. Introducción de la huella de ADN 1.1 Areas de aplicación 1.2 Comparación clásica y procedimiento moderno 1.3 Origen del marcador de ADN 1.4 Enzimas de restricción 2 Huella Genética

1.1 Areas de aplicación Marcadores para la identificación forense ej: sangre / células de la piel, pelo, esperma.. Comprobación de genes extraños: - en organismos (¿son transgénicos?) - en alimentos (¿verdaderamente están hechas las hamburguesas de carne de vaca? Descubrimiento de una madre o padre biológico Comprobar si los gemelos son genéticamente idénticos 3 Huella Genética

1.2 Comparación Procedim. Clásico Procedim. Moderno Intrones Minisatellites VNTRs 15 - 300 bp Restricción Electroforesis en gel de agarosa Blotting Hibridacion con VNTR (número variable de repeticiones en tándem) Intrones Microsatellites STR 4 - 6 bp PCR Electroforesis en gel de agarosa 4 Huella Genética

Ventajas del procedimiento moderno Las áreas de AND son más cortas con un máximo de 5000 bp (vs. 20 000 bp) La técnica de PCR es más barata y rápida (1 día) 5 Huella Genética

Secciones de ADN investigadas 6 Secciones de ADN investigadas Intrón 1 CCTATTA 5 veces repetido Exón Intrón 2 sin CCTATTA Exón Intrón 3 CCTATTA 10 veces repetido Las secuencias repetidas en los intrones son diferentes individualmente. Las secuencias polimórficas aparecen a través de diferencias en un par de bases una secuencia de reconocimiento se pierde  diferente patrón de bandas en el gel 6 Huella Genética

7 Restricción Las diferencias de la secuencia dependen de los diferentes tamaños individuales de las piezas de ADN que aparecen. Las diferencias en el tamaño están clasificadas como (PLFR) polimorfismo de longitud de fragmentos de restricción. (RFLP) restriction fragment length polymorphism 7 Huella Genética

1.3 Origen del marcador de ADN: Lambda-Phage Organizada por E. coli Genoma 48502 Bp (secuenciado en 1982) El Genoma es cortado por la encima de restricción Eco RI cabeza cola 8 Huella Genética

1.4 Enzimas de restricción EcoR1 G A A T T C Corta las terminaciones C T T A A G Pst1 C T G C A G (Providencia stuartii) G A C G T C - HaeIII G G C C Corta los extremos romos C C G G 9 Huella Genética