APLICACIONES EN MICROBIOLOGIA BIOLUMINISCENCIA APLICACIONES EN MICROBIOLOGIA

Cuando la reacción quimioluminogénica es enzimática, ocurre en un organismo vivo o bien se produce en sistemas químicos derivados de éstos, al fenómeno se le denomina BIOLUMINISCENCIA

El complejo luciferin –luciferaza para medir ATP se detecto por primera vez en Photinus pyralis cola de la luciernaga . La luz producida en la bioluminiscencia se mide en un tubo detector multiplicador y se expresa en unidades relativas de luz ( URL) Cuantificadas por un fotometro o luminimetro

Molécula + enzima + un poco de oxígeno = luz La producción de bioluminiscencia en los animales es un proceso químico complejo en el que la oxidación de un sustrato de proteína luciferina es catalizado por la enzima luciferasa. La luciferina acompañada de la enzima luciferasa, la molécula energética ATP La combinación entre la luciferina y el oxígeno provoca la oxidación de la luciferina dando lugar a la oxiluciferina. Esta reacción necesita del ATP para generar moléculas de oxiluciferina en estado excitado y el oxígeno genera la luz bioluminiscente

La bioluminiscencia es un fenómeno que ha sido explorado por una variedad  de organismos. Para que esta reacción química ocurra es necesaria la presencia de una proteína denominada luciferina, la enzima catalizadora luciferasa, oxígeno molecular y ATP (Trifosfato de adenosina), sustancia capaz de generar la energía necesaria para que se dé la reacción

Se puede observar del verde al azul, que es lo más frecuente, ya que es la luz que se transmite a mayor profundidad en el agua. Aunque se observa también del rojo o al ámbar, en menor medida ya que el color rojo se absorbe rápidamente en el agua y pocos organismos marinos tienen la capacidad de percibir ese color.  

La bioluminiscencia no debe confundirse con la fluorescencia, la fosforescencia o la refracción de la luz, técnicas empleadas también por numerosos organismos. Es un recurso evolutivo presente en bacterias, hongos, protistas unicelulares, celentéreos, gusanos, moluscos, cefalópodos, crustáceos, insectos, equinodermos y peces.

La técnica de detección está basada en la reacción ATP (Adenosin-trifosfato) presente en todos los organismos vivos. La cantidad de luz emitida es proporcional a la cantidad de ATP presente ya sea en una mesada (lote) o en el producto final. Mediante un Luminómetro portátil se mide la cantidad de fotones emitidos en URL o Unidades Relativas de Luz que es proporcional a la cantidad de microorganismos presentes.

Desventajas El método de Bioluminiscencia permite obtener resultados en un corto periodo de tiempo, sin embargo, no especifica cuantitativamente la población microbiana existente en una muestra determinada debido al ATP no microbiano presente en la muestra.

INNOVACIONES para el monitoreo ambiental conocer un estudio donde se destacan los beneficios de productos de ATP, además de ofrecerles un artículo sobre cómo identificar las zonas críticas y la frecuencia de las pruebas de ATP EL LUMINOMETRO MIDE EL ATP EN UNA MUESTRA EN 30 segundos

Usos en la Higiene Se utiliza para la detección rápida de microrganismos vivos y su monitorización Especialmente en la valoración de la contaminación . Especialmente en la Higiene de superficies instrumentos ,que afecta la calidad de los productos . Siendo las biopeliculas las que emiten microrganismos que pueden contener .

Las superficies que indican bajo ATP indican ausencia de contaminación . Si son altas indican presencia de organismos vivos o materia orgánica Los desinfectantes alteran la membrana celular ,inhiben la actividad metabólica . Disminuyendo la emisión de luz

Interferencias en el Metodo Factores ambientales como : Ph Temperatura Restos de detergente Desinfectantes . Provocando una disminucion de la luz emitida La medición de valores altos de ATP no indica necesariamente contaminación microbiana .

INDICADORES Si la cantidad de ATP es baja puede deberse a Presencia de bacterias gram negativas o esporas . Si es alta levaduras o gram positivas con actividad metabólica alta . Por lo tanto no sustituye los métodos tradicionales .

Equipos para medir ATP

Es un luminómetro portátil multifuncional que puede ser usado para validar higiene, empleando hisópos para medir ATP residual en superficies o líquidos. También puede ser empleado con zondas para medir PH, Temperatura y Conductividad. Reduce la necesidad de tener diferentes instrumentos en la planta. El equipo puede almacenar en su poderosa memoria hasta 5000 resultados. 

principales características : Monitoreo de limpieza en 10 segundos con sensibilidad de 0.000000000015 gramos de ATP ó contaminación por materia orgánica Cuenta con calibradores trazables NIST y controles positivos de ATP Totalmente portátil y ergonómico, 460 gramos de peso Almacena hasta 10,000 resultados y puede configurar hasta 1000 puntos diferentes Exclusivo software para configurar datos, transferencia a la computadora en un solo paso y software para analizar datos con capacidad gráfica con sólo configurar una pantalla en menos de 1 minuto Determina pH 0-14, temperatura de -20° hasta 105°C y concentración de sanitizantes y limpiadores desde 10 hasta 100,000 microsiemens y/o 10 hasta 200,000 ppm.