cartografiado genético en bacterias Transformación (tema 24) Conjugación (tema 25) Transducción (tema 26) virus (tema 27)



Staphylococcus aureus Bacillus cereus Serratia marcescens Proteus mirabilis

Tema 24. Transformación

Griffith 1928 Avery, McLeod y McCarty (1944): determinan que el ’principio transformante’ es el DNA

mecanismo de transformación las bacterias pueden transferir genes mediante la transformación heteroduplex célula competente ¡dos sobrecruzamientos!

Electroporación

mapeo genético mediante transformación la frecuencia de cotransformación es inversamente proporcional a la distancia entre los genes

1.Sólo células transformantes (sólo ‘recombinantes’, no parentales) 2. Distancia en unidades de transformación: unidades de transformación = = transformantes sencillos / total de transformantes 3. Relación entre dos genes: transformación doble (no ligados) cotransformación (ligados) Genes ligados: en el mismo fragmento transformante (lineal), porque ¡siempre en el mismo cromosoma! mapas genéticos por transformación

Medios de cultivo trp his tyr colonias genotipos de crecen nº último genotipo elaboración de un mapa genético mediante transformación Transformación: trp+ his+ tyr+ trp– his– tyr–

Medios de cultivo trp his tyr colonias genotipos de crecen nº último genotipo genotipos número trp his tyr,34,13,40 unidades de transformación = = transformantes sencillos / total de transformantes marcadores (genes) se estudian dos a dos distancia trp-his = (+-) + (-+) (+-) + (-+) + (++) = 0,34 distancia his-tyr = 0,13distancia trp-tyr = 0,40 ojo: orden

Medios de cultivo trp his tyr colonias genotipos de crecen nº último genotipo genotipos número transformantes frec. trp his tyr +,768 +,835 +, , , ,585 distancia trp-his = (+-) + (-+) (+-) + (-+) + (++) = 0,34 distancia his-tyr = 0,13 distancia trp-tyr = 0,40 trp his tyr,34,13,40 Ligados o independientes frec. de cotransformación vs. transformación independiente

Medios de cultivo trp his tyr colonias genotipos de crecen nº último genotipo genotipos número transformantes frec. trp his tyr +,768 +,835 +, , , ,585 distancia trp-his = (+-) + (-+) (+-) + (-+) + (++) = 0,34 distancia his-tyr = 0,13 distancia trp-tyr = 0,40,768x,835=,641 ≈,637,768x,796=,611 >,585 lejanos,835x,796=,664 <,757 cercanos trp his tyr,34,13,40 independiente vs cotransformación

ingeniería genética

capítulo 8 problemas aprox. 1h de clase: 17 de abril de 2009 problemas: 1-6