SÍNTESIS Y ANÁLISIS POR CLAR-EM DE IMPUREZAS DE DRONEDARONA Marina Santos1, Cintia Checura1, Cynthia García1, Carlos Fernandez2, Hernán Orgueira2 y María J. Comin1 1 Centro de Investigación y Desarrollo en Química, Instituto Nacional de Tecnología Industrial (INTI), B1650WAB-San Martín, Buenos Aires, Argentina; 2 MAPRIMED S:A, Av Directorio 6155, C1440ATA-CABA, Argentina (www.maprimed.com.ar). jcomin@inti.gob.ar Introducción Figura 1: dronedarona (1) y amiodarona (2) Esquema 2: Síntesis de impureza desbutilada 9 El uso de Dronedarona (1) fue aprobado por la FDA, en el año 2009, para el tratamiento de arritmias cardíacas. Esta molécula es una versión mejorada de la Amiodarona (2), que posee una vida media prolongada, acumulándose en tejidos adiposos y órganos, produciendo, además, efectos secundarios como hipo e hipertiroidismo, como consecuencia de la presencia de los átomos de iodo en su estructura. El control del perfil de impurezas presentes en un Ingrediente Farmacéutico Activo (IFA) es fundamental para asegurar la calidad del producto. La identificación y cuantificación de las mismas es una parte importante del trabajo al desarrollar un proceso de producción de un IFA. La naturaleza de las impurezas depende fuertemente, entre otros factores, del proceso sintético empleado y de la calidad de los materiales de partida utilizados. El proceso más utilizado para la producción de Dronedarona (1) se resume en el esquema 1.1 Las estructuras de las impurezas y metabolitos conocidos se muestran en la Figura 2.2,3 Se postularon las estructuras 9 y 10, desconocidas hasta el momento, como potenciales impurezas de la droga (Figura 3). Objetivos Síntesis de sustancias relacionadas 9 y 10. Desarrollo de método CLAR-EM para el análisis de lotes pilotos de producción y validación de 1. Esquema 3: Síntesis de impureza monobutilada 10 Esquema 1: síntesis de dronedarona Figura 2: sustancias relacionadas conocidas Condiciones de separación por HPLC Columna: XTerra MS C18 (Waters, Milford, MA, USA) Dimensiones: 100 mm x 2.1 mm, 3,5 mm Fase móvil A: Agua + 0.1% ácido fórmico Fase móvil B: Acetonitrilo + 0,1% ácido fórmico Grediente (Tmin A:B) : T0 50:50, T3.5 20:80, T6 20:80, T7 50:50, T11 50:50 Detección MS: Modo de ionización: positivo Capilar: 3,2 kV Cono: 40 V Temperatura de la fuente: 150 oC Figura 3: sustancias relacionadas desconocidas Resultados Figura 4: Cromatograma Dronedarona e impurezas relacionadas (nivel: 0,1%). Equipo: espectrómetro Waters Quattro Premier XE equipado con módulo de separación HPLC Waters Alliance (Waters, Milford, MA, USA) Las impurezas desconocidas 9 y 10 se sintetizaron a través de las secuencias descriptas en los esquemas 2 y 3 utilizando el derivado fenólico 3 como material de partida y diferentes agentes alquilantes. Las mismas se obtuvieron con rendimientos globales de 37 y 34% respectivamente a partir del compuesto fenólico 3. Se desarrolló un método CLAR-EM que permite la separación y cuantificación de Dronedarona e impurezas relacionadas en 6 minutos (Figura 4). Se analizaron 8 lotes de Dronedarona pertenecientes a distintas partidas. Se confirmó la presencia de las impurezas 7, 8 y 9 por debajo de los límites de cuantificación. No se observó la presencia de 10 en los lotes analizados. Conclusiones Se sintetizaron las sustancias relacionadas originales 9 y 10. Se desarrolló un método de análisis que permitió detectar la presencia de las impurezas 7, 8 y 9 en lotes de validación de dronedarona. La cantidad de 9 y 10 detectada en lotes de producción de dronedarona depende de la calidad del agente alquilante utilizado (4). Referencias Srivastava, S.; Crasto, A. M.; Gharpure, M.; Deore, D. B. Narayanan, S. B. WO2012007959, 2012. Tondepu, N.; Sait, S. S.; Surendranath, K. V.; Kaja, R. K.; Kumar, S. Am. J. Anal. Chem. 2012, 3, 544-551. Xie, C.; Yang, S.; Zhong, D.; Dai, X.; Chen, X. Journal of Chromatography B 2011, 879, 3071– 3075.