1 Tutorial de Uso Metamorph. Uso del “Sistema de Enfoque Perfecto” (PFS) Unidad de Microscopia

2 Perfect Focus System El equipo de microscopía Nikon 21(Modelo Eclipse TE-2000) presenta un mecanismo de enfoque perfecto. Su principal aplicación : largos experimentos de Timelapse(Series temporales) en los que el se tiende a perder el enfoque de la muestra a lo largo del tiempo. MUY IMPORTANTE MUY IMPORTANTE : -El sistema PFS sólo se activa en un determinado rango de proximidad al objetivo/foco:si la muestra está muy alejada el sistema PFS NO se activará y la caja de control PFS (T-RCP ) comenzará a parpadear : lo primero que debemos hacer para trabajar con el PFS es aproximar y enfocar la muestra. -El sistema PFS corrige la desviación del enfoque en un rango macrométrico limitado:si una vez enfocado el plano y activado el PFS “forzamos manualmente en exceso“ el ajuste macrométrico el sistema PFS NO será funcional.

3 Encendido del sistema PFS -Para usar el sistema PFS tenemos que encender la caja (T- PFC) controladora del PFS SIEMPRE ANTES del encendido del programa de captura Metamorph. -Si no encendemos previamente la caja PFS el programa no reconocerá el sistema PFS. Encendemos el sistema PFS : desde el botón (lateral derecho)de la caja T-PFC. Caja T-PFC Sistema de Enfoque Perfecto(PFS)

4 Uso del sistema PFS (1) -Para acceder al sistema PFS abrimos el comando DEVICES >>Focus (2) -....y accedemos a la pestaña “AUTOFOCUS” que permite el control del sistema de enfoque perfecto (PFS). (3)- Una vez enfocado copiamos el valor del plano de referencia de “CURRENT POSITION”y lo introducimos en:”CONTINOUS AF OFFSET: Current” (4) -Clicamos en STAR CONTINOUS FOCUSING para iniciar el funcionamiento del PFS (para detener el sistema PFS clicamos en “Stop Continous Focusing”) De este modo se iniciará el sistema PFS: Podemos comprobar que el sistema está activo correctamente porque : -nos corrige automáticamente pequeños desajustes macrométricos que introduzcamos manualmente y porque - el sistema comienza a realizar un leve sonido de crepitación resultante de la activación del PFS 1 2

5 Memorización de planos Es posible memorizar varios planos de enfoque con el sistema PFS. ¿Cómo? Enfocamos la muestra en el plano deseado. (1)- Clicamos en la función MEMORY LIST y en esta podemos grabar múltiples planos de enfoque. (2)- Damos nombre al plano, clicamos en la casilla interna y grabamos el plano de enfoque en MEMORIZE. Durante la sesión de trabajo es posible cambiar entre los diferentes planos de enfoque grabados desplegando la MEMORY LIST y clicando sobre los diferentes planos. 2 1

6 Indice: Uso del “Sistema de Enfoque Perfecto”PFS -Uso del “Sistema de Enfoque Perfecto” PFS Introducción: Uso del “Sistema de Enfoque Perfecto” PFS :Encendido Sistema PFS Uso del “Sistema de Enfoque Perfecto” PFS Uso Sistema PFS Uso del “Sistema de Enfoque Perfecto” PFS :Memorización de planos

7 Unidad de Microscopía Centro de Investigación del Cáncer Campus Miguel de Unamuno Salamanca (Spain).