Tutorial Nikon 14 1 Tutorial de Uso Básico Nikon 14

Tutorial Nikon 14 2 Características Nikon 14………………………… pag.3-4 Pasos iniciales Uso Nikon 14……………………..….….pag. 5 Luz Transmitida Trabajo con luz transmitida Campo Claro………………………………………………….…pag. 6-7 Fluorescencia Trabajo con luz reflejada (fluorescencia)………………………..…………….…pag.8-10 Utilidades de Interés…………………………………….pag. 11 Nikon 14 “Tutorial de Uso”

Tutorial Nikon 14 3 Nikon 14 APLICACIONES. Microscopio de Fluorescencia -Fish (“hibridaciones in situ”) -Filtros fluorescencia : DapiAzulAmarilloRojoVerdeTriple(verde+rojo+dapi)Doble(verde+rojo) Localización : Microscopía Planta – 1 Microscopio de Luz Transmitida -Campo Claro -No tiene Fases ni DIC

4Tutorial Nikon 14 Nikon 14 CARACTERISTICAS Filtros Fluorescencia: -Dapi-Azul-Amarillo-Verde-Rojo-Doble(verde+rojo)-Triple(verde+rojo+dapi) Condensador : 1´4 Filtros/Anillos DIC No tiene Filtros/Anillos Fases No tiene Objetivos : x10x60oilX100oil Equipo conectado : -Iluminador Nikon -Rueda Filtros Motorizada -Cámara COHU -Mac PC -Centrador de lámpara fluorescencia

5Tutorial Nikon 14 1-Encendemos el microscopio Nikon 14 equipo. Es necesario encender 3 controladores: Es necesario encender 3 controladores: 1.1-Encendemos el microscopio (1) Encendemos la caja control de filtros fluorescencia (2). 1.3-Encendemos la caja de fluorescencia (3). 2-Encendemos el Ordenador asociado (Mac) para acceder al programa de captura de imágenes. Pasos Iniciales Uso Nikon

6Tutorial Nikon 14 Trabajar en Luz Transmitida (Campo Claro)(BF). 1-Encendemos el microscopio Nikon 14 y colocamos el botón frontal de control en posición de luz TRANSMITIDA (DIA)(1) en la rueda de control : El controlador presenta 3 posiciones posibles Off : equipo apagado BF: modo luz transmitida FL: modo fluorescencia 2-Colocamos la barra de control de imagen (lateral derecho )(2) en la posición adecuada. 2 posiciones posibles: -hacia adentro para VISUALIZAR la muestra (modo observador). -hacia afuera para CAPTURAR imágenes en programa asociado (modo captura) Bajamos la palanca del “difusor”(3) situada en el lateral derecho. Por defecto ya se encuentra bajada. 3 4-Colocamos la muestra y enfocamos la zona con el objetivo deseado. El cambio de objetivo está automatizado con la botonera lateral Izquierda (4) Objetivos disponibles: x 10 x 60oil x 100oil

7Tutorial Nikon 14 Trabajar en Luz Transmitida (Campo Claro)(BF) 5 –Para optimizar las condiciones del modo LUZ TRANSMITIDA se usan las ruedas reguladoras situadas en los laterales del equipo: 1- Control de intensidad luminosa :rueda lateral izquierda(5).Permite regular la cantidad de luz sobre la muestra. 2-Control de los diafragmas de campo y apertura : ruedas laterales derechas(6). NOTA: Si trabajamos con el objetivo más pequeño x10, es necesario abrir al máximo, los diafragmas de apertura y de campo (6), para poder optimizar la iluminación del campo de visión. 5 6

8Tutorial Nikon 14 Trabajar en Luz Reflejada (Fluorescencia) 1-Encender los 2 controladores de la FLUORESCENCIA 1-Caja de filtros fluorescencia 2-Caja de Fluorescencia Antes de encender la lámpara de fluorescencia es necesario verificar en el Registro de Uso del equipo que han transcurrido un mínimo de 30 minutos desde la sesión previa ( recordar que existe riesgo de explosión de la lámpara de mercurio (vapores tóxicos) si se enciende en caliente). Para evitar la pérdida/quemado de la fluorescencia de nuestra muestra cada vez que NO estemos capturando la imagen es recomendable USAR el “OBTURADOR de la Fluorescencia” Shutter:Botón lateral izquierdo (3) NORMAS BÁSICAS 1 2 3

9Tutorial Nikon 14 Trabajar en Luz Reflejada (Fluorescencia) 1-Encendemos el microscopio Nikon 14 y colocamos el botón frontal de control en posición de FLUORESCENCIA EPI (1) en la rueda de control : El controlador presenta 3 posiciones posibles Off : equipo apagado BF: modo luz transmitida FL: modo fluorescencia 2-Colocamos la barra de control de imagen (lateral derecho )(2) en la posición adecuada. 2 posiciones posibles: -hacia adentro para VISUALIZAR la muestra (modo observador). -hacia afuera para CAPTURAR imágenes en programa asociado (modo captura) Bajamos la palanca del “difusor”(3) situada en el lateral derecho. Por defecto ya se encuentra bajada. 3 4-Colocamos la muestra y enfocamos la zona con el objetivo deseado. El cambio de objetivo está automatizado con la botonera lateral Izquierda (4) Objetivos disponibles: x 10 x 60oil x 100oil 4

Tutorial Nikon Trabajar en Luz Reflejada (Fluorescencia) 5-El cambio de filtro se realiza a través del panel de control de fluorescencia(1) Filtros disponibles : -Dapi/Azul-Rojo-Verde 6-Para evitar la visión directa de la fluorescencia es posible usar el protector retráctil (2) 7-Aplicar el OBTURADOR de fluorescencia (3) para evitar quemar la fluorescencia cuando no estemos trabajando con la muestra

Tutorial Nikon Utilidades de Interés Nikon 14 presenta una barra reguladora (1) para trabajar en 2 modos posibles 1-OBSERVACIÓN. Posición Interna: permite la observación de la muestra 2-CAPTURA IMAGENES. Posición Externa: permite la captura de imágenes (Modo Captura de imágenes) NOTA :Nikon 14 posee una tarjeta accesoria Nikon IC card (2) que permite configurar y grabar en la tarjeta 3 parámetros: -diafragma de campo. -diafragma de apertura. -intensidad de transmitida. Por defecto las condiciones están optimizadas para la visión y captura de imágenes. Barra reguladora de imagen 1 2 Tarjeta de configuración Tarjeta de configuración.

12Tutorial Nikon 14 Unidad de Microscopía Centro de Investigación del Cáncer Campus Miguel de Unamuno Salamanca (Spain).