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DESCRIPCIÓN Y MANEJO. FUNDAMENTO
EL MICROSCOPIO ÓPTICO DESCRIPCIÓN Y MANEJO. FUNDAMENTO
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1. MICROSCOPIOS Y MICROSCOPÍA
1.1 Microscopios ópticos De campo claro. De campo oscuro. De contraste de fases. De fluorescencia. 1.2 Microscopios electrónicos. De transmisión. De barrido. 2. LA RESOLUCIÓN DE LOS MICROSCOPIOS Empleo del objetivo de inmersión en aceite. 3. DESCRIPCIÓN DEL MICROSCOPIO ÓPTICO 4. MANEJO Y USO DEL MICROSCOPIO 5. MANTENIMIENTO Y PRECAUCIONES 6. PREPARACIONES PARA EXAMEN POR MICROSCOPÍA ÓPTICA TÉCNICAS DE " MONTAJE HUMEDO” Y GOTA PENDIENTE EXTENSIONES FIJADAS Y TEÑIDAS
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TAMAÑOS CELULARES 1 MICRA = 10-6 m 1 NANOMETRO = 10-9 m 1 AMSTRONG = m El ojo humano no distingue menos de 50 micras de diámetro
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TIPOS DE MICROSCOPIOS MICROSCOPIOS ÓPTICOS: MICROSCOPIOS ELECTRÓNICOS:
Fuente de iluminación: luz visible Sistema de lentes ópticas. MICROSCOPIOS ELECTRÓNICOS: Fuente de iluminación: chorro de electrones. Lentes: electroimanes.
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Microscopios ópticos Muestras de más de 0,2 micras.
Características de la muestra: Finas Contraste entre las estructuras Que reciba luz del condensador Necesario: Tinciones Equipo de contraste de fases
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TIPOS DE MICROSCOPIOS ÓPTICOS
De campo claro De campo oscuro De contraste de fases De fluorescencia
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Microscopio de campo claro
El más utilizado Zona de observación iluminada Preparaciones naturales y teñidas Amplificación: 1000 aumentos Dos sistemas de lentes (cóncavas y convexas) y espejos correctores Sistema de iluminación
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MICROSCOPIO DE CAMPO CLARO
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Observación con M.O de campo claro
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Microscopio de campo oscuro
Zona de observación oscura Objetos fuertemente iluminados Condensador especial: haces de rayos laterales sobre el objetivo Útil para microorganismos en suspensión (preparaciones en fresco o en gota pendiente)
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REPRESENTACIÓN ESQUEMÁTICA DE LA MICROSCOPÍA EN CAMPO OSCURO
REPRESENTACIÓN ESQUEMÁTICA DE LA MICROSCOPÍA EN CAMPO OSCURO. Solo penetran en el objetivo los rayos de luz que chocan contra un objeto situado sobre el portaobjetos.
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OBSERVACIÓN EN CAMPO CLARO
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Observación en campo oscuro
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MICROSCOPIO DE CONTRASTE DE FASES
Observación de células vivas. No hay que teñirlas. Provistos de diafragmas y lentes especiales: aumentan la diferencia en el índice de refracción de las células y el medio. Imagen en relieve.
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Células epiteliales con contraste de fases
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Microscopio de fluorescencia
Se utiliza luz ultravioleta. Dicha luz excita ciertas moléculas presentes en la muestra (naturales o añadidas) que emiten la fluorescencia.
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Células epiteliales con fluorescencia
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Células epiteliales con m. de fluorescencia a mayor aumento
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Microscopio electrónico
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MICROSCOPIOS ELECTRÓNICOS
Fuente de iluminación: chorro de electrones Lentes: electroimanes Amplificación: varios cientos de miles. (se pueden apreciar objetos de 3 A. No se puede utilizar para células vivas: la muestra es bombardeada por el chorro de e- que incrementan su temperatura. Se pueden utilizar sustancias para aumentar el contraste.
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ELEMENTOS BÁSICOS DEL M.E.
Cañón de e-: crean la imagen aumentada Lentes magnéticas: enfocan y dirigen el haz de e-. Sistema de vacío: para no alterar la trayectoria de los e-. Sistema de registro de la imagen
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MICROSCOPIOS ELECTRÓNICOS
Microscopio de transmisión: Cortes finos Amplificación: entre y aumentos. Microscopio electrónico de barrido Células enteras Amplificación: entre y aumentos.
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Mitocondria (X 60000) con microscopio electrónico de transmisión
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Bacteria creciendo sobre estomas (X 4000) Microscopio electrónico de barrido
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PODER DE RESOLUCIÓN: Ojo humano: 0,1 mm Microscopio óptico: 0,2 micras Microscopio electrónico: 4 amstrong OBJETIVO DE INMERSIÓN: Mayor amplificación de la imagen El más usado en Bacteriología
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Sistema óptico: condensador, objetivos y oculares.
Sistema mecánico: soporte (base, brazo), platina, macro y micrométrico, cabezal y revólver
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Gota pendiente: a.- Círculo de vaselina b.- Muestra c.- Se coloca el portaobjetos d.- Se da la vuelta y se observa
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EXTENSIONES FIJADAS Y TEÑIDAS:
Extensión 2. Fijación: - calor - química: ácido ósmico, formaldehido Colorante Lavar el exceso
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