BIOANÁLISIS CONCEPTO UTILIDADES PRINCIPIOS Actividad de nuevas “Estimación de la concentración o de la potencia de una droga mediante la cuantificación de la respuesta biológica que produce” CONCEPTO Actividad de nuevas Función mediadores endógenos Toxicidad Concentración de conocidas UTILIDADES Comparación conocido / desconocido Patrón de respuestas en batería Variabilidad biológica Extrapolación incierta Potencias relativas Métodos de Medida según nivel biológico Respuestas graduales y cuantales Unidades animales? PRINCIPIOS

MODELOS ANIMALES DE ENFERMEDAD Anormalidades espontáneas parecidas a enfermedad humana CEPAS GENÉTICAS Mutaciones deliberadamente introducidas Mutagénesis condicionales Knock-in Knock-out ANIMALES TRANSGÉNICOS

MÉTODOS DE MEDIDA Técnicas moleculares y bioquímicas In vitro Ex vivo In vivo Clínicos en voluntarios sanos y enfermos Epidemiológicos socioeconómicos

Ejemplos de técnicas y diseños de bioanálisis Exposición sucesiva a reactivo biológico para identificar un patrón de respuestas Superfusión en cascada Obtención de respuestas en la parte lineal de la curva Evalúa potencia relativa, variabilidad del sistema y eventuales diferencias cualitativas Ensayos de líneas paralelas

CONCEPTO DE “NUEVA DROGA” Nueva molécula Asociación de drogas conocidas Diferente posología Vía de administración no usada Forma farmacéutica nueva Inesperada nueva indicación

CONCEPTO DE “DROGA IDEAL” Tener gran afinidad por determinados receptores Tener actividad sólo en esos receptores Tener vida media larga, pero sin acumulación Ser bien tolerada por la mayoría Ser estable y activa por vía oral o en solución acuosa

VÍAS PARA EL DESCUBRIMIENTO DE NUEVOS FÁRMACOS Screening de productos naturales al azar Compuestos basados en naturales activos conocidos Análogos estructurales de sintéticos activos conocidos A partir de Profármacos y Bioisósteros Diseño específico adaptado a un receptor determinado

ETAPAS DEL DESARROLLO DE UN NUEVO MEDICAMENTO ( Fase 0) Obtención de la sustancia química Valoración de propiedades Fisicoquímicas Desarrollo farmacotécnico Desarrollo farmacológico

DESARROLLO FARMACOLÓGICO SCREENING CIEGO Cualitativos, generales, sencillos, baratos SCREENING DIRIGIDO Selectivos, orgánicos, multiparámetros Farmacodinámicos Farmacocinéticos ESTUDIOS FARMACOLÓGICOS ESPECÍFICOS Toxicidad aguda Toxicidad subaguda Toxicidad crónica Toxicológicos generales Reproducción y desarrollo Muta y carcinogénesis Tolerancia local Dependencia física Toxicológicos especiales

ESTUDIOS FARMACODINÁMICOS Acciones bioquímicas y moleculares Estudios cuantitativos Órgano aislado y animal entero Valoración de variables fisiológicas usuales Valoración de efecto específico Efectos en modelos experimentales Varias especies y vías de administración

ESTUDIOS FARMACOCINÉTICOS Cuantificación predictiva de cinética animal Propiedades LADME para varias dosis Distribución por autorradiografía Inducción e inhibición enzimáticas Interacciones con otras drogas Detección de metabolitos activos

TOXICIDAD AGUDA 3 especies, una no roedora Una sola vez, diferentes niveles de dosis 3 vías, una parenteral o usada en clínica Duración de dos a tres días Establece la DL50 Mucha variabilidad multifactorial Muchos animales, sufrimiento desproporc. Idea de sobredosis aguda en humanos

TOXICIDAD SUBAGUDA 3 especies, una no roedora Dosis repetidas 3 niveles de dosis en c/grupo + control Dura de 1 a 3 meses Dosis tóxica mínima y máxima, tolerancia Observación conductual, bioquímica y patológica de animales muertos o sacrific. Detecta el “Órgano blanco”

TOXICIDAD CRÓNICA Similar a subaguda, pero prolongada Dura de 3 a 6 meses, pero puede durar 24 Duración relacionada con futuro uso Terap. La OMS establece duración de acuerdo a estimación de duración de uso clínico

TOXICIDAD SOBRE REPRODUCCIÓN Y DESARROLLO En ratas Función gonadal, ciclos sexuales, conducta en apareamiento, número de fetos y resorciones, número de crías, sexo y peso, etc. Fertilidad y capacidad reproductiva general Rata y conejo Embriotoxicidad, malformaciones, daños a la madre Teratogénesis Ratas Desarrollo fetal tardío, viabilidad neonatal, comportamiento de la madre, crecimiento de neonato, toxicidad neuronal en desarrollo Período peri y postnatal

MUTAGÉNESIS - CARCINOGÉNESIS Crónicamente Requieren muchos animales Ambigua y poco fiable Pruebas generales in vivo Test de los microtúbulos en rata Eritroblastos de Médula ósea Restos de DNA Células germinales de testículo Pruebas específicas in vivo Células procariotas: Salmonella Células eucariotas: linfoma Pruebas in vitro

ESTUDIOS DE TOLERANCIA LOCAL En rata y conejo Irritación o necrosis Droga y excipiente Vías parenteral o tópica En ojo, recto, vagina, mucosa respiratoria

INDICE TERAPÉUTICO Deseable: no <10 DL50 DE50 Superposición entre DE altas y DL bajas No contempla idiosincrasia y estado clínico Medida de impunidad ante sobredosis

Evalúa superposiciones IS <1 sólo en cáncer y Sida INDICE DE SEGURIDAD DL1 DE99 Deseable: no < 2 Más ventajoso que IT Evalúa superposiciones IS <1 sólo en cáncer y Sida

MEDICAMENTOS EN EL HOMBRE” (para correcta Elección, FARMACOLOGÍA CLÍNICA “ESTUDIO CIENTÍFICO DE LOS MEDICAMENTOS EN EL HOMBRE” ( OMS, IT 446, 1970:7) “Científico”: usa Método científico “Hombre”: experimentación en humanos (para correcta Elección, Empleo Seguro y Eficaz) DEFINICIÓN Y CONCEPTO

INTERESES, ACTIVIDADES Y TAREAS DE LA FARMACOLOGÍA CLÍNICA Confirmar o rechazar utilidad clínica Desarrollar juicio crítico Actividad terapéutica por evidencia Farmacocinética en sano y enfermo Detectar efectos adversos Advertir interacciones Determinar indicaciones y contraindicaciones

INTERESES, ACTIVIDADES Y TAREAS DE LA FARMACOLOGÍA CLÍNICA Seguridad en embarazadas y lactantes Diferencias en niños y ancianos Influencia de la genética Prevenir desastres terapéuticos Proveer información farmacológica objetiva, necesaria, no interesada, no tendenciosa y completa a la terapéutica

DIFERENCIAS CON TERAPÉUTICA FARMACOLOGÍA CLÍNICA Objetiva Científica Experiencia universalmente reproducida Aplicable a determinada enfermedad Conocimiento de la droga Rama de la farmacología TERAPÉUTICA Subjetiva Empírica Experiencia personalmente adquirida Aplicable a determinado enfermo Curación de la enfermedad Rama de la clínica

CORRELACIÓN DE NOMENCLATURAS DE METODO CIENTÍFICO Y ENSAYO CLÍNICO Hipótesis Diseño experimental Ejecución y Recolección Evaluación Demostración de hipótesis Comunicación ENSAYO CLÍNICO Introducción Material y métodos Presentación de resultados Discusión Conclusiones Publicación

TIPOS DE ERROR DE LOS ENSAYOS Tipo I ó alfa Encontrar inexistente diferencia Falso positivo Probabilidad de errar ( “Significancia”:0,05) Exceso de rigorismo Tipo II ó beta No encontrar existente diferencia Falso negativo Probabilidad de evitar ( “Potencia”:0,8-0,9) Defecto de rigorismo

“Cuantificación de la realidad basado en el cálculo de probabilidades” Casualidad / causalidad Sesgo Distribución aleatoria Error experimental / Error estadístico Diferencia significativa Criterios de Inclusión y de Exclusión Tamaño de la muestra Variables graduales y cuantales Eficiencia – Eficacia - Efectividad

FASES DE LA FARMACOLOGÍA CLINICA II III IV Caracte rística Primer contacto con el hombre Aplicación terapéutica inicial Ensayo terapéutico en gran escala Comercialización y uso universal Sujeto experi mental Voluntarios sanos Enfermos muy seleccionados, con patología única Enfermos menos selectivos, con otras patologías Enfermos comunes, no seleccionados Nº de sujetos Pocos 10 a 20 200 a 500 >50 (1000-10000) Todos los que reciben la droga Situación Internados UTI Internados o ambulatorios según patología Doméstica o institucional Duración Pocos días 5 a 24 meses 12 a 24 meses Mientras la droga se comercializa Ámbito Unicéntrico específico Unicéntrico ampliado Multicéntrico internacional Internacional y transnacional no centralizado

Objetivos Tolerancia biológica Farmacocinética Biodisponibilidad Efectos farmacológicos Efectos bioquímicos y fisiológicos Orientación de dosis( única inicial, ritmo de incremento y máxima tolerada, y repetidas) Detectar reacciones adversas Temprana: Posible efecto tera- péutico Farmacocinética en enfermos Rango de dosis tera- péuticas Reacciones adversas Tardía: Eficacia terapéutica Curva Dosis/respuesta Dosis óptima sugerida Comparar FC con sanos Reacciones adversas influídas por enfermedad Eficacia terapéutica en gran escala Establecimiento de dosis definitiva Confirmación o replanteo de datos Efecto en diferentes razas y etnías Efecto en pacientes con patologías concomitantes modificadoras de la farmacocinética Reacciones adversas menos frecuentes Eficacia a largo plazo y efectividad terapéutica Nuevas indicaciones Nuevas vías de administración Nuevas dosis/posologías Nueva asociación Reacciones adversas infrecuentes o inesperadas Interacciones Farmacovigilancia: Espontánea Intensiva: Prospectiva Retrospectiva Tipos de estudio No controlado Comparados( otro) Controlados ( placebo) Doble ciego Comparados Doble ciego - Abierto Notificación Registro Evaluación retro y prospectiva Inves tigador Farmacólogo clínico Toxicólogo Bioquímico Biofarmacéutico Estadígrafo Terapeuta experto Toxicólogo o Investigador clínico calificado Ídem anterior Médico asistencial Fármaco- epidemiólogo Organismo oficial de control