M. Paz Microbiología II-2011 Retrovirus M. Paz Microbiología II-2011

Retroviridae Familia de virus de hebra sencilla de ARN positiva con envoltura Asociados con cáncer, leucemia y SIDA Asociados con desórdenes inmunológicos y síndromes degenerativos y neurológicos. En 1911 Peyton Rous Asociación con tumores sólidos en los pollos Virus de la Leucosis Aviar Virus del Sarcoma de Rous Se replican por una transcriptasa inversa

Retrovirus son distintos de los virus tumorales ADN pero también integran su genoma al de la célula hospedera. El ARN debe ser copiado a ADN antes de integrarse al cromosoma de la célula hospedera. Esto va en contra del dogma de la biología molecular que el ADN es copiado a ARN.

Viriones de retrovirus

Estructura de los retrovirus Viriones de 80-120 nm de diámetro Morfología esférica Envoltura fosfolipídica con botones Nucleocápside: proteína unida a dos copias de ARN(+) de una hebra Ribonucleoproteínas están protegidas dentro de la cubierta proteica de la cápside para formar un core interno que tiene distintas formas (VIH: cónico)

Retrovirus - Estructura básica 1.- Core de ribonucleoproteína a. Genoma - 2 cadenas RNA b. Enzimas víricas Transcriptasa inversa Integrasa Proteasa c. Cápside 2.- Envoltura a. Doble capa lipídica b. Glicoproteínas de transmb.

Retrovirus - Estructura del Genoma TRES genes que codifican dos o más proteínas R U5 U3 R Poly A 5’ 3’ gag pol env gag (group specific antigen) - codifica proteínes estructurales del core pol (polimerasa) - codifica dos enzimas transcriptasa inversa: necesaria para la transcripción inversa es una DNA polimerasa - RNA dependiente integrasa: permite la integración del provirus env (envelope) - codifica proteínas de transmembrana de la envoltura

Estructura de los retrovirus Envoltura externa de la membrana plasmática de la célula hospedera Proteínas de cubierta (antígenos de superficie) son codificadas por genes env Dentro de la membrana está la cápside icosahédrica con proteínas codificadas por el gen gag Gen pol (proteasa viral) ARN diploide

Virus ARN tumorales

Retrovirus - Replicación Penetración Transcripción inversa Eliminación de viriones Integración Transcripción PROVIRUS

Productos del gen pol a) Transcriptasa inversa (polimerasa que copia ARN a ADN) b) Integrasa (integra el genoma viral al genoma hospedero) c) ARNasa H (rompe al ARN cuando el ADN es transcrito para que la TR pueda hacer la segunda hebra complementaria del ADN. d) Proteasa (rompe las poliproteínas traducidas del mARN del gen gag y del pol)

Virus de Inmunodeficiencia Humana VIH es un lentivirus Virus lento (infección de largo plazo) Blanco: células del sistema inmune Cinco serogrupos de lentivirus Primates Ovejas y cabras Caballos Gatos Ganado

Virus de Inmunodeficiencia Humana Dos tipos: VIH-1 y VIH-2. Causan enfermedad indistinguible, aunque el tiempo de establecimiento de la enfermedad es más largo para VIH-2 La epidemia mundial es causada por VIH-1 y VIH-2 está restringida al Africa occidental Los lentivirus se integran al genoma hospedero como un provirus.

Virus de Inmunodeficiencia Humana Puede permanecer durmiendo en la forma proviral dentro de las células por muchos años, especialmente en linfocitos CD4+ y establecer una infección de por vida. Al reactivarse, ocurre de nuevo una producción viral y destrucción celular VIH puede desaparecer de las células de la sangre, y la replicación continúa en otros tejidos.

De la infección original, hay un período de 8 a 10 años antes de que ocurran las manifestaciones clínicas de SIDA El período puede ser de dos años o menos Aprox 10% de los pacientes sucumben ante al SIDA en 2 a 3 años.

Infección aguda por VIH Sindrome Retroviral Agudo Si se adquirió por actividad sexual, el virus entra en macrófagos infectados en el semen o secreciones vaginales. Las células dendríticas en la mucosa se unen al virus y lo llevan a los ganglios linfáticos en donde se infectan los CD4+ Durante el curso de la enfermedad, el virus migra hacia otros tipos celulares.

Infección aguda por VIH Síndrome Retroviral Agudo Inicialmente, la infección es leve y autolimitada. Poco después de la infección, el virus se eleva, y puede provocar una enfermedad como la mononucleosis: fiebre, rash, adenopatía. Descenso de CD4+ y elevación de CD8+ Alta carga viral Período de ventana (seronegativo)

Síntomas de la retroviremia aguda en VIH mialgia Linfadenopatía Fiebre y fatiga Faringitis Rash En sangre: linfopenia Náusea, diarrea Pérdida de peso Sudoración nocturna Úlceras mucocutáneas cefalea

SIDA Síndrome de Inmunodeficiencia Adquirida Latencia se 1-2 años o hasta 15 años Disminución de inmunidad celular y aumento de carga viral Infecciones oportunistas

Indicadores de SIDA Neumonitis o esofagitis por más de 1 mes Sarcoma de Kaposi Linfoma cerebral Neumonía linfoide intersticial/hiperplasia linfoide pulmonar Tuberculosis diseminada Neumonía por Pneumocystis carinii Toxoplasmosis cerebral Candidosis (esófago, tráquea, bronquios y pulmones) Criptotocosis extrapulmonar Criptosporidiosis con diarrea persistente por más de 1 mes CMV y Herpes mucocutáneo

Definen el SIDA Infección micobacteriana Infecciones bacterianas múltiples o recurrentes Coccidioidomicosis diseminada Encefalopatía por VIH Histoplasmosis diseminada Isosporiasis Sarcoma de Kaposi Linfoma no Hodgkin de células B Burkitt o no Burkitt Sarcoma inmunoblástico

PRUEBAS LABORATORIALES Diagnóstico de la Infección del VIH Screening (tamizaje) Confirmatorio Pruebas complementarias para el seguimiento de paciente con la infección Recuento de de Linfocitos CD4/CD8 Carga Viral Pruebas de Rutina Hemograma Orina Baciloscopía Parasitológico Otros leucopenia linfopenia trombocitopenia VSE elevada

METODOS METODOS DIRECTOS - Aislamiento viral: Cultivo viral H9 - PCR : Detección de fracciones antigénicas del virus o genoma viral METODOS METODOS INDIRECTOS - Detectan la presencia de anticuerpos específicos contra el VIH por medio de técnicas serológicas. * TEST RAPIDOS * IFI * ELISA * WESTERN BLOT La técnica mas utilizada actualmente para el screening serológico es el test de ELISA y en menor proporción los Test Rápidos (OMS)

TAMIZAJE SEROLOGICO Etapa ELISA Negativo (1) WESTERN BLOT Etapa (2) Positivo/Indeterminado Repetidamente Correr una nueva muestra Repetidamente POSITIVO Etapa (1) WESTERN BLOT Negativo Indeterminado Positivo Correr una nueva muestra 30 a 60 días después Repetir etapas 1 y 2 Etapa (2)

Tratamiento: blancos terapéuticos http://www.fda.gov/default.htm Unión a receptores de superficie Fusión de las membranas viral y celular Pérdida de la envoltura de la nucleocápside Transcripción inversa del ARN a ADN Integración del pro virus Replicación Transcripción Empalme del ARN en el núcleo de la célula huésped Traducción de proteínas virales Proteolisis de las poli proteínas virales

Prevención