RED DE LABORATORIOS EN DIAGNOSTICO DE LA TUBERCULOSIS Mgt NILDA CONDE CJUIRO

CONTROL DE CALIDAD

Exámenes de Diagnóstico de la Tuberculosis 1.- Exámenes Bacteriológicos (baciloscopía, Cultivo y Prueba de Sensibilidad, y Tipificación de Cepas.) 2.- Examen Radiológico (radiografía de tórax) 3.- Examen Inmunológico (PPD o QuantiFERON)

Bacteriologia de la TUBERCULOSIS Baciloscopía: Es fundamental para el diagnóstico de TB y seguimiento del tratamiento de los pacientes con TBP Tiene mayor confiabilidad diagnóstica (especificidad=98%) y capacidad de detección (sensibilidad=60-80%) que el criterio clínico y radiológico).

LABORATORIOS LOCALES en el CONTROL DE LA TBC Recibir las muestras para baciloscopias durante todo el horario de trabajo.

Comprobar que los envases de la muestra estén claramente identificados en la pared y no en la tapa. Verificar que estén acompañados por la solicitud de Investigación bacteriológica. Observar la calidad de la muestra . Ubicar los envases dentro de la cubetas .

Efectuar las baciloscopias solicitadas en el ámbito de su jurisdicción.. Tamaño 2x3cm

Enviar muestras para cultivo según las indicaciones implícitas de cultivo. Integrar los resultados de la baciloscopias en tiempo optimo. Ser referencia para las Unidades Recolectoras de Muestras (URM)

Exámenes Bacteriológicos En la mayoría de pacientes, se realizará una baciloscopía para detectar la TB. En unos casos se usa el cultivo. Para definir TB MDR es necesario realizar el cultivo y después la prueba de sensibilidad.

Baciloscopía CULTIVO Deriva Las muestras de esputo para cultivo y prueba de sensibilidad de acuerdo a los criterios establecidos.

El cultivo Identificar que el BAAR es M.tuberculosis. Detectar TB de muestras paucibacilares (un resultado de BK de 1 a 9 BAAR). Confirmar TB en muestras extrapulmonares. Poder realizar la prueba de sensibilidad (en personas con factor de riesgo de tener TB MDR).

El cultivo (2) Un cultivo significa hacer crecer la micobacteria en sustancias que contienen nutrientes. Cuando el mycobacterium ha formado colonias (grupos), éstos pueden ser identificados para saber si es M. tuberculosis u otro tipo de micobacteria.

El cultivo (3) Consiste en dos partes: Detectar el crecimiento del mycobacterium. Crece lentamente. Puede demorar hasta 8 semanas para detectar. Identificar el organismo que ha crecido. Determinar si el organismo es M. tuberculosis u otro tipo de mycobacterium. Demora de unas 3 a 6 semanas después de haber detectado el crecimiento.

ENVIO DE MUESTRA PARA CULTIVO Rotulado de envase con nombres y apellidos. Transporte en cadena de frio(2°-8°C)

La lectura se realiza a los 7,15,30 y 60 días para dar el resultado negativo

LECTURA DE RESULTADOS (-) No se observan colonias Nº... Número total de colonias, si hay menos de 10. (+) De 20 a 100 colonias. (++) Colonias separadas más de 100. (+++) Colonias confluentes (desarrollo en toda la superficie del medio). Cultivo contaminado

PRUEBAS DE SENSIBILIDAD-ESNPCT Implementación de la NTS Nº 104 MINSA/DGSP v.01-ESNPCT CUSCO Octubre de 2014

Procedimiento para la detección de TB resistente por pruebas rápidas Toda persona con TB pulmonar debe ser evaluado por PS rápida para detectar resistencia a H y R ANTES de INICIAR TRATAMIENTO TBp FP debe hacerse prueba radida : MODS o Gries TBp FN debe hacerse MODS De no acceder a MODS debe hacerse cultivo y PS convencional Toda persona con PS rápida resistente a H o R debe tener un resultado de PS convencional 1 y 2 línea

Diagnóstico por cultivo Métodos aceptados: Löwenstein – Jensen, Ogawa, agar 7H10, MGIT, MODS Indicaciones de cultivo: Diagnóstico SR en seguimiento diagnóstico, paucibacilares, muestras valiosas: biopsias, aspirados, líquidos biológicos, etc. Control de tratamiento: a) A todo BAAR(+) a partir del segundo mes de tratamiento, b) A todo TB sensible al terminar el tratamiento, c) mensualmente a todo paciente en esquema TB resistente Para realizar PS indirecta: se hace cultivo a partir de muestras pulmonares o extra-pulmonares

Pruebas de sensibilidad PS Directas: cuando se realizan a partir de las muestras clínicas (por ejemplo esputo) .Entre estas tenemos : 1.-Prueba de sensibilidad a medicamentos mediante observación microscpica, MODS (Microscopic Observation Drug susceptibility) 2.- Prueba de la nitrato reductasa o prueba de Griess. PS indirectas: cuando requieren cultivo para aislar la Micobacteria. Tenemos : 1.- PS convencionales indirectas en medio sólido: Método de proporciones en medio Löwenstein- Jensen ( 1ra Linea)o en agar en placa ( 2da linea )

Pruebas rápidas fenotípicas para detectar TB-MDR (tamizaje) MODS: Prueba directa (a partir de muestras de esputo), simultáneamente TB y TB-MDR Indicada para resistencia a H y R Resultados en promedio 7 a 14 días En TB pulmonar con baciloscopía (+), (-) o paucibacilar Indicada antes o durante el tratamiento Nitrato reductasa (Griess): Prueba directa, a partir de muestras de esputo baciloscopía positiva (una cruz o más) Detecta resistencia a H y R Resultados entre 14 a 28 días Se debe migrar a prueba molecular Genotype® MGIT (BACTEC): Diagnóstico de TB y de sensibilidad a medicamentos de 1 línea: HRES + Z Resultado entre 4 a 12 día desde el cultivo positivo Indicada: detección de TB pulmonar y extra-pulmonar a partir de muestras pulmonares y extra-pulmonares: TB infantil, trabajadores de salud, VIH+, comorbilidades (diabetes, cáncer, IRC), TB SNC y otras extra-pulmonares. Mejorar la redacción de acuerdo a

Prueba rápida molecular de sondas de ADN (Genotype) Directa en muestras de esputo e indirecta en cultivos positivos Identifica complejo MTB y detecta mutaciones para rifampicina e isoniacida Resultados en 72 horas Se realiza en el INS y LRR e intermedios Indicaciones: Detección directa o indirecta de resistencia a H y R e identificación del complejo MTB en: Pacientes con TBP FP Pacientes con TB FN o extra-pulmonar con cultivo positivo Antes o durante el tratamiento No se debe usar para monitorear respuesta al tratamiento

Identificación y Tipificación de micobacterias Identificación del complejo M. tuberculosis: Por inmunocromatografía (Capilia) y prueba molecular Indicaciones: i) Resultado de una PS rápida resistente a INH y RIF ii) Cultivo de persona con VIH. El laboratorio donde se identifiquen cepas que NO pertenecen al complejo MTB debe remitir la cepa al INS para tipificación

Algoritmo de Diagnóstico y Tratamiento de la TB, Perú- TBP FN TBP FP TB EP CULTIVO CONVENCIONAL MODS MODS CULTIVO (+) Sensible H y R Resistente a H Resistente a R TB-MDR 2HRZE/4H3R3 PAN SENSIBLE 2RLfxZE/7RLfxE ESQUEMA MODIFICADO O AMPLIADO PS D 1 y 2L (Proporciones) TB DR no MDR Esquemas individualizados TB MDR TBP: Tuberculosis pulmonar H: isoniacida TBEP : Tuberculosis extra-pulmonarR: rifampicina FP/FN: Frotis positivo/negativo DR: drogorresistente BAAR: Bacilo alcohol resistente MDR/XDR: multi y extensamente resistente TB XDR

Muchas gracias Presentación disponible en: www.tuberculosis.minsa.gob.pe