INSTITUTO UNIVERSITARIO DE CIENCIAS DE LA SALUD FUNDACIÓN HÉCTOR A INSTITUTO UNIVERSITARIO DE CIENCIAS DE LA SALUD FUNDACIÓN HÉCTOR A. BARCELÓ CARRERA DE TÉCNICOS EN ANÁLISIS CLINICOS ANÁLISIS CLÍNICOS II: ETAPA ANALÍTICA Clase 2: HEMATOLOGÍA (I) Dra. Graciela Etcheverry

HEMATOLOGÍA METODOLOGÍAS RECUENTO EN CÁMARA CONTADORES HEMATOLÓGICOS Dra. Graciela Etcheverry

ERRORES EN RECUENTO EN CÁMARA NATURALEZA DE LA MUESTRA OPERADOR INHERENTES O DE CAMPO Dra. Graciela Etcheverry

RECUENTO EN CÁMARA HEMATÍES: retículo central , dilución 1/200 en NaCl, CV= 15% LEUCOCITOS: retículos angulares, dilución 1/20 Ác Acét al 2% PLAQUETAS: retículo central , dilución 1/200 en oxalato de amonio al 1% Dra. Graciela Etcheverry

METODLOGÍAS EN CONTADORES HEMATOLÓGICOS Impedancia eléctrica Enfoque óptico o hidrodinámico Citometría de flujo Frecuencia de radio Dra. Graciela Etcheverry

IMPEDANCIA ELÉCTRICA Cambio en resistencia eléctrica /abertura Recuento celular: número de pulsos (eje y) Tamaño celular: magnitud del pulso (eje x) Diluyente2-20 fL: plaquetas, más de 36 fL : GR Diluyente + lisante,ás de 35 fL: GB Dra. Graciela Etcheverry

Dra. Graciela Etcheverry UNA SUSPENSIÓN DE CÉLULAS SANGUÍNEAS ES PASADA A TRAVÉS DE UN PEQUEÑO ORIFICIO Dra. Graciela Etcheverry

ERRORES EN IMPEDANCIA ELÉCTRICA Recogida de sangre Partículas en diluyente microtécnicas de dilución limpieza en recipientes de cristal y abertura del contador Excesivo número de hematíes (plaquetas) Leucocitosis (- plaquetas) Plaquetas grandes Muestra hemolizada, fragmentos de GR (+ plaquetas) Dra. Graciela Etcheverry

Turgeon M. Instrumentación en hematología. En: Turgeon M Turgeon M. Instrumentación en hematología. En: Turgeon M. Hematología Clínica. Teoría y procedimientos. Madrid: Editorial Ergón; 2006. Dra. Graciela Etcheverry

Histograma de GR Curva a la derecha :anemias macrocíticas Curva a la izquierda: anemias microcíticas Distribución bimodal: aglutininas en frío, transfusión de GR normales a una persona con GR de tamaño anormal, fragmentos de GR , aglutinación ADE= DE /tamaño promedio X 100 Dra. Graciela Etcheverry

Turgeon M. Instrumentación en hematología. En: Turgeon M Turgeon M. Instrumentación en hematología. En: Turgeon M. Hematología Clínica. Teoría y procedimientos. Madrid: Editorial Ergón; 2006. Dra. Graciela Etcheverry

Histograma de GB Leucocitos en 35 fL o más Células por debajo de 35 fL: partículas (plaquetas aglomeradas o gigantes, GR nucleados y GR íntegros) Células entre linfocitos y mononucleares: linfocitos más grandes de lo normal, ciertas formas blásticas, células plasmáticas, eosinofilia, basofilia. Células entre mononucleares y granulocitos: aumento de granulocitos inmaduros, ciertos tipos de blastos y eosinófilos. Células en la región derecha lejana de la curva: recuento de granulocitos alto. Aumento significativo en la población mononuclear. Una alerta múltiple, cuando se afecta más de una de estas regiones. Dra. Graciela Etcheverry

Histograma de plaquetas Plaquetas: partículas de 2 a 20 fL Las partículas pequeñas pueden superponerse en el extremo bajo del histograma: burbujas, polvo. Los eritrocitos microcíticos interfieren en el extremo superior. Dra. Graciela Etcheverry

DETECCIÓN ÓPTICA Dispersión de luz /luz láser Recuento celular: número de pulsos Volumen o tamaño / forma y estructura celular, componentes internos : según el ángulo de luz dispersa Dra. Graciela Etcheverry

ERRORES EN DETECCIÓN ÓPTICA Sistema de bom,beo Aglomeración plaquetaria Dra. Graciela Etcheverry

CITOMETRÍA DE FLUJO Medición simultánea de múltiples características físicas de células individuales conforme la célula fluye en suspensión a través de un dispositivo de medición. Combina las tecnologías de dinámica de flujo, óptica, láser, computadoras y anticuerpos monoclonales conjugados con fluorocromos que clasifican con rapidez los grupos de células en mezclas heterogéneas. Dra. Graciela Etcheverry

CITOMETRÍA DE FLUJO Tamaño celular: dispersión directa de luz Grado d ereflexión interna: dispersión lateral o de 90º Componentes celulares (marcadores de superficie y citoplasmáticos): fluorescencia Dra. Graciela Etcheverry

APLICACIONES DE CITOMETRÍA DE FLUJO Hematología, Oncología, Genética y Microbiología Discriminación de poblaciones celulares Identificación intracelular de virus y parásitos Marcadores CD de linfocitos / HIV Dra. Graciela Etcheverry

FRECUENCIA DE RADIO Corriente electromagnética de alto voltaje Tamaño nuclear Densidad celular proporción entre núcleo y citoplasma, densidad nuclear y granulación citoplasmática Dra. Graciela Etcheverry

HEMOGLOBINA Cianometahemoglobina (525 y 546 nm) Sulfometahemoglobina Dra. Graciela Etcheverry

ANOMALÍAS EN PERFIL DE HEMATOLOGÍA ANEMIAS: microcíticas, normocíticas, macrocíticas Hematocrito: 36 - 45% Hemoglonina: 12-15 g/dl Recuento de eritrocitos: 4 -5 X 106/ mm3 VCM: 80 - 100 fL RDW: 12- 17% Dra. Graciela Etcheverry

ANOMALÍAS EN PERFIL DE HEMATOLOGÍA Leucocitosis / leucopenia Reacción leucemoide LMC LLC Leucemias agudas Dra. Graciela Etcheverry

LABORATORIO DE GUARDIA LABORATORIOS MÁS GRANDES Recuento de GB Recuento de plaquetas Hto Frotis sanguíneos GB GR plaquetas Hb Hto VCM HCM CMHC ADE VPM histograma diferencial de leucocitos Dra. Graciela Etcheverry

CONTROL DE CALIDAD EN CONTADORES HEMATOLÓGICOS Performance del equipo: calibración de sistema eléctrico, presión de vacío, voltaje de operación, aceptabilidad del fondo Muestras control: gráficos de Levy-Jehnnings Análisis de promedios móviles Revisiones delta Dra. Graciela Etcheverry