Reacciones catalizadas por enzimas
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Variables de la ecuación de velocidad Variable dependiente: velocidad inicial Variables independientes: A) Concentración de enzima B) Concentración sustrato
Concentración sustrato Concentración de enzima
Leonor Michaelis (der) Maud Menten (izq) Leonor Michaelis (der)
Bajo qué condiciones aplica la ecuación de Michaelis-Menten Velocidad inicial No añadir producto al medio de ensayo Concentraciones de sustrato muy superior a la concentración de la enzima La concentración de sustrato debe permanecer “casi” constante durante el periodo de tiempo en que se mide la reacción
Representación gráfica de la ecuación de Michaelis-Menten
Transformación de la ecuación de Michaelis-Menten
Paramétros cinéticos Son las constantes que aparecen en la ecuaciones de velocidad Están compuestos por las constantes de velocidad de los pasos que constituyen la reacción catalizada
Unidades
Velocidad máxima
Constante catlítica (kcat)
Constante de Michaelis-Menten (Km)
Constante de especificidad
Factores que afectan la velocidad Concentración de sustrato o sustratos (cofactores) Concentración de enzima Inhibidores Activadores pH Temperatura
Determinación de los parámetros cinéticos
Regulación de la actividad enzimática por union a la enzima de ligandos que no son sustratos
Tipos de Inhibidores
Sólo se afecta la Km
Afecta la Km y Vmax