UNIVERSIDAD AUTONOMA DE CHIHUAHUA. FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS. Microbiología de alimentos. Técnicas de análisis microbiológico en frutas y hortalizas frescas Dr. Iván Salmerón. Nolbertha Corral Soriano

Erwinia carotovora. Pertenece a la familia de las Enterobacteriaceae. Siendo estas del grupo de los coliformes. NOM-112-SSA1-1994 Bienes y Servicios. Determinación de bacterias coliformes. Técnica del numero mas probable (NMP) Densidad esperada es 1 bacteria X 10ml de liquido o X g de alimento solido Proporciona una estimación estadística de la densidad microbiana presente en los tubos con crecimiento positivo

FUNDAMENTO. Bacterias coliformes Fermentan la lactosa Incubadas a 35 ± 1°C durante 24 a 48 horas. Resultando una producción de ácidos y gas el cual es manifestado en forma de turbidez. Bacilos Gram negativos, no esporulados, aerobios o anaerobios facultativos.

REACTIVOS. Solución reguladora de fosfatos. Caldo lactosado Caldo lauril sulfato triptosa Caldo lactosa bilis verde brillante Preparación de muestra Medio selectivo de mayor concentración. Medio selectivo de enriquecimiento. Medio confirmativo.

PROCEDIMIENTO. PRUEBA PRESUNTIVA. 1ml de la dilución primaria inicial NOM -110 10 ml de la dilución primaria inicial (NOM- 110) 10 ml de Caldo lauril sulfato triptosa. 10 ml de Caldo lactosado. Incubar a 35 ± 0,5 °C por 24 ± 2 horas Realizar diluciones según se necesite.

PROCEDIMIENTO. PRUEBA CONFIRMATIVA. Después del tiempo de incubación de la prueba presuntiva 10 ml de caldo lactosa bilis verde brillante. Incubar a 35 ± 0,5 °C por 24 ± 2 horas Tubos con presencia de gas

Dilución 10-1 Dilución 10-2 Dilución 10-3 Índice del NMP/100ml 1 3 4 7 11 2 9 14 15 Los resultados se expresan como numero de bacterias /g o ml

De los tubos positivos, se puede sembrar en el agar selectivo MacConkey e incubar a 37 ºC por 24 h. Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos, aerobios y anaerobios facultativos. Todas las especies de la familia Enterobacteriaceae en este agar.

FUNDAMENTO DEL AGAR. Peptona Lactosa Sales biliares y cristal violeta Desarrollo de los microorganismos. Hidrato fermentable Inhibidores de Gram positivos

Pequeñas colonias de color rojo o rosa profundo Agar MacConkey Pequeñas colonias de color rojo o rosa profundo Agar MacConkey con Erwinia carotovora