Diapositivas presentación Jueves 15 Abril Avery Griffith Watson

Experimento de Frederick Griffith, 1928 Juárez Correa Mayra Sarahi

¿Qué es la transformación bacteriana? Es la incorporación de DNA exógeno a la bacteria, puede o NO integrarse al cromosoma bacteriano De cualquier manera le confiere propiedades nuevas a la bacteria receptora En la transformación, el DNA liberado de una célula bacteriana entra a otra célula, generalmente de la misma especie.

Cepa R inocua Cepa S letal Frederick Griffith, 1928 Streptococcus pneumoniae El bacteriólogo alemán Fred Neufeld, descubrió tres tipos de neumococos (Types I, II, and III). Hasta el experimento de Griffith, los bacteriólogos creían que los tipos era fijos y que no podían cambiar de una generación a otra. Cepa R inocua Cepa S letal

El experimento

S: cubierta de polisacáridos PRESENTE R: cubierta de polisacáridos AUSENTE

Resumen Las bacterias que se aislaban de los ratones muertos poseían cápsula y, cuando se las inyectaba, mataban otros ratones. Frederick Griffith fue capaz de inducir la transformación de una cepa no patogénica Streptococcus pneumoniae en patogénica. Griffith postuló la existencia de un factor de transformación como responsable de este fenómeno.

Identificación del principio transformante Colin McLeod Oswald Avery Maclyn McCarty

Antecedentes En 1928, Frederick Griffith describió el llamado fenómeno de transformación por neumococos. Se distinguen dos tipos de neumococos: Los neumococos de tipo R (rugoso) forman colonias de aspecto rugoso sobre un medio sólido, y son poco virulentos. Los neumococos de tipo S (liso) forman colonias aspecto liso y brillante sobre un medio sólido. Se caracterizan por poseer una cápsula de polisacáridos en la superficie celular que las protege del sistema inmunitario del huésped y provocan infecciones que matan al animal en 3 ó 4 días.

Los neumococos de tipo R (rugoso) forman colonias de aspecto rugoso sobre un medio sólido, y son poco virulentos. Los neumococos de tipo S (liso) forman colonias de aspecto liso y brillante sobre un medio sólido, y provocan infecciones letales. Los neumococos de tipo S (liso) provocan infecciones letales, pero son sensibles al calor. Si se inyectan al ratón neumococos de tipo S que han sido calentados, el animal sobrevive. Si se inyectan a un ratón neumococos vivos de tipo R y neumococos muertos de tipo S (ninguno de los dos es letal por separado) se produce la muerte del ratón. En los ratones muertos se encontraron neumococos vivos del tipo S que, a su vez, eran capaces de infectar a otros ratones: el cambio que se había producido era estable y era heredado por la descendencia

Objetivo Identificar el factor de transformación (FT), que debía encontrarse en los neumococos S muertos por el calor.

Método Para ello: Se trataron los pneumococos S muertos por calentamiento con detergente para obtener un lisado celular (un extracto libre de células que contenía el FT). Este lisado contiene (entre otras cosas) el polisacárido de la superficie celular, las proteínas, el ARN y el ADN de los neumococos S. Se sometió al lisado a diversos tratamientos enzimáticos Se inyectaron en ratones los neumococos de tipo R vivos junto con una fracción del lisado modificada enzimáticamente

FT = ADN Resultado Conclusión El FT está presente en el lisado Tratamiento realizado sobre el lisado Resultado Conclusión Ninguno El FT está presente en el lisado Se añadió la enzima SIII,que degrada la cápsula de polisacárido El FT no era el polisacárido que estaba presente en el lisado Se añadieron al lisado anterior (con el polisacárido degradado) las enzimas proteolíticas tripsina y quimiotripsina El FT no era una proteína. Debía ser un ácido nucleico (ARN o ADN) Se extrajeron los ácidos nucleicos del lisado anterior y se añadió la enzima ARNasa (que degrada el ARN) El FT no era el ARN Al extracto de ácidos nucleicos anterior se le añadió la enzima ADNasa (que degrada el ADN) FT = ADN

Conclusión Se demostró que la naturaleza química del factor de transformación (la información genética capaz de convertir neumococos R en nuemococos S) era un DNA y no una proteína como se sospechaba en aquella época.

Estructura del DNA (Doble hélice)

El DNA molécula de la herencia La naturaleza hereditaria de cada organismo está definida por su genoma, el cuál consiste de largas secuencias de ácidos nucleicos que proporcionan la información necesaria para construir al organismo El modelo de la doble hélice se construyo sobre los datos obtenidos por los científicos que le precedieron

1.Bloques estructurales del DNA Contienen tres tipos de componentes: Fosfato Desoxiribosa Base

Las bases nucleotídicas

2. Reglas de chargaff •La cantidad de adenina es la misma que la de timina: A=T •La cantidad de guanina equivale a la de citosina: G=C •La cantidad de bases púricas es la misma que las bases pirimídicas: A+G=T+C Pero la cantidad de A+T ≠G+C

3.Análisis por difracción de rayos X DNARosalind Franklin y Maurice Wilkins James Watson y Francis Crick,1953.Modelo de la doble hélice del DNA

La doble hélice Complementariedad Bases nitrogenadas: interior Fosfatos: exterior Cadenas anti-paralelas Extremo 5’: PO4− Extremo 3’: OH

Propiedades de la sustancia hereditaria Código genético Replicación Mutación