CLASIFICACION DE LOS METODOS SEGUN LA FORMA DE VISUALIZAR LA REACCION INTERACCION 1RIA: LA VISUALIZACION DEPENDE DE UN INTERACCION SIMPLE Ag-Ac SISTEMA AUXILIAR DE REVELADo  ALTA SENSIBILIDAD INTERACCION 2RIA: LA VISUALIZACION DEPENDE DE FENOMEno DONDE INTERVIENEN MUCHAS MOLECULAS DE AG Y AC NO REQUIERE SISTEMA DE REVELADO  BAJA SENSIBILIDAD

Inmunógeno: molécula o sustancia capaz de inducir una respuesta inmune específica. Antígeno: molécula o sustancia capaz de reaccionar con los productos de la respuesta inmune específica. Hapteno: molécula de bajo pesos molecular incapaz de inducir una respuesta inmune a menos que se encuentre conjugada a una proteína carrier

Anticuerpo monoclonal: es un anticuerpo que proviene de la activación de una única célula B y que reconoce un único epitope. Anticuerpos policlononales poliespecificos: es una mezcla de anticuerpo provenientes de la activación de muchas células B y pueden reconocer diferentes epitopes de varias moléculas. Ej. anti IgG humana Anticuerpos policlononales monoespecificos: es una mezcla de anticuerpo provenientes de la activación de muchas células B y pueden reconocer diferentes epitopes pero que se encuentran en una única molécula. Ej. anti cadena g humana

Reacciones de precipitación Son reacciones Ag-Ac de tipo secundaria donde ambos reactantes se encuentran solubles. Sin embargo para poder visualizar el fenómeno de precipitación la reacción se llevan a cabo en medios semisólidos (agar o agarosa).

Características diferenciales de las reacciones de aglutinación y precipitación Ag particulado Ag soluble Sensible Poco sensible Fase liquida Fase semisolida (agar)

Tipos de reacciones de precipitación Debido a que estas reacciones se realizan en medios semisolidos y los reactantes difunden a travez de este medio, estas reacciones son conocidas como reacciones de inmunodifusión. Inmunodifusión radial simple (IDRS) o metodo de Manchini Inmunodifusión Inmunodifusión radial doble (IDRD) o metodo de Ouchterlony

Inmunodifusión radial simple (IDRS) En esta variante el anticuerpo se encuentra diluido en el agar y el antigeno se siembra en un pocillo realizado en el agar. El antigeno difunde por el agar y cuando encuentra su zona de equivalencia con el Ac precipita formando un halo de precipitación

IMPORTANTE: El tamaño de halo depende de la del diámetro del pocillo de siembra y de la concentración de Ag. En base a esta característica este método puede emplearse para cuantificar antígenos

IDRS Cuantitativa M T1 T2 T3 D2 Medir el diámetro de halo de los testigos y realizar curva calibración. Luego medir el D de la M y extrapolar en la curva para obtener la [ ] [ ]

IDRS Cuantitativa La precipitación es un método que tiene baja sensibilidad. A través de este método se puede cuantificar proteínas que se encuentran en altas concentraciones : Inmunoglobulinas: IgG, IgA, IgM Factores de complemento: C3 y C4 Otros: Transferrina

Inmunodifusión radial Doble (IDRD) En este metodo el AC y el AG se siembran en pocillos separados realizado en el agar. El Ac y el Ag difunden por el agar y cuando encuentra su zona de equivalencia forman una línea de precipitación. Este método se utiliza para evidenciar la presencia de un antígeno en una muestra o para analizar el grado de relación entre antígenos

IDRD Cualitativa

Inmunoelectroforesis