Evolución del diseño de vacunas Genómica y Proteómica Evolución del diseño de vacunas Noemí Párraga Niño Instituto de Biotecnología y Biomedicina
Desarrollo de vacunas Estudio proteínas extracelulares: - Adhesión celular - Invasión células huésped - Detección condiciones físicas y químicas - Generación señales apropiadas
Estrategias de búsqueda Genómica: técnica clásica Clonación genes Sobreexpresión Purificación Modelos animales
Estrategias de búsqueda Proteómica: 1.- Bioinformática: predicción de proteínas de superficie Ej. Programa PSORT
Estrategias de búsqueda Proteómica: 2.- Subproteoma de membrana: - Fracción membrana plasmática - Extracción proteínas - 2D Electroforesis - Espectrometría de masas
ESTRATEGIA GENERAL PARA EL ANÁLISIS DEL PROTEOMA 1ª Dimensión: Isoelectroenfoque 2ª Dimensión, geles prehechos Tinción con nitrato de plata Análisis de imagen Análisis por MS, MALDI-TOF Digestión tríptica
High Mr Low Mr
Estrategias de búsqueda Proteómica: 3.- Surfoma: identificación proteínas expuestas en la superficie bacteriana Importancia surfoma: tan solo el 6,5% proteínas de membrana están expuestas
Surfoma Pionero: Manuel Rodríguez-Ortega Estudio Streptococcus grupo A Importancia en humanos Modelo animal conocido
Surfoma
Surfoma Identificación 72 proteinas: - Proteinas ancladas a membrana con motivos LPXTG-like - Lipoproteinas - Proteinas transmembrana - Proteinas secretadas Identificación 4 proteinas citoplaasmáticas
Surfoma
Surfoma Proteína M: tasa de supervivencia 90% Buena diana como posible vacuna