ELECTROFORESIS
µ µ
MOVILIDAD ELECTROFORÉTICA q.E = Ff q.E = 6r v v = q.E / 6r = v/E = q/ 6r µ
pH alto: carga neta negativa pH bajo: carga neta positiva pI: carga neta nula pH alto: carga neta negativa
Cuando el pH es bajo, los grupos ionizables están protonados, y la carga neta de la proteína es de signo positivo. Cuando el pH es alto, los grupos ionizables están desprotonados, y la carga neta es de signo negativo.
* Moléc. (-) polo (+) o ánodo * Moléc. (+) polo (-) o cátodo * Moléc. (-) polo (+) o ánodo ELECTROFORESIS cátodo ánodo ELECTROFORESIS LIBRE moléculas en disolución o suspensión: poco resolutiva ELECTROFORESIS DE ZONA SOPORTE que retiene las moléculas: elevado poder de resolución ánodo cátodo SOPORTE
TIPOS DE ELECTROFORESIS Libre Papel Tipos de electroforesis De Zona Acetato de celulosa Almidón Poliacrilamida Agarosa Gel
EQUIPO DE ELECTROFORESIS Fuente de alimentación Soporte para las tiras de acetato de celulosa Aplicador Cubetas Puente Reactivos
EN ACETATO DE CELULOSA: PROTEINOGRAMA Soporte: (no restrictivo) Tiras de acetato de celulosa Electroforesis horizontal muestra Strip + - Campo eléctrico (DV) Avance de las proteínas 1. Aplicación de la muestra 2. Electroforesis 3. Detección por tinción: Azul de Coomassie Negro amido 4. Densitometría
APLICACIÓN DE LA ELECTROFORESIS Fraccionamiento de las hemoglobinas Diferenciación de la hemoglobina fetal Diagnóstico de talasemias, anemias falciformes, etc Proteínas séricas Proteínas urinarias Lipoproteínas Ácidos nucleicos Enzimas Inmunoelectroforesis Etc.